教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-04-0785)
- 作品数：3 被引量：26H指数：3
- 相关作者：陈旻湖陈惠新宋鑫陈为陈洁更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”广东省自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 表达幽门螺杆菌NAP蛋白的减毒沙门疫苗菌株预防幽门螺杆菌感染被引量：8
- 2006年
- 目的建立表达幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)中性粒细胞活化蛋白(Hp-NAP)的减毒沙门疫苗菌,并利用人类幽门螺杆菌感染的小鼠模型研究疫苗菌对Hp感染的免疫保护作用。方法利用分子克隆技术构建携带Hp-NAP基因的重组原核表达质粒pTrc99A-NAP,经PCR及酶切鉴定后测定其基因序列,并与美国国立医学图书馆基因文库中相关序列的同源性进行比较。重组质粒pTrc99A-NAP转化减毒伤寒沙门菌SL3261,培养后筛选阳性菌落,抽提质粒进行PCR及酶切鉴定。表达的Hp-NAP蛋白用SDS-PAGE和West-blotting进行鉴定,用薄层扫描分析蛋白含量。C57BL/6小鼠随机分成4组,分别灌胃给予生理盐水(A组)、减毒鼠伤寒沙门菌SL3261(B组)、携带pTrc99A的SL326组(C组)、携带pTrc99A-NAP的SL326组重(D组)。免疫后4周,予Hp攻击,攻击菌量107CFU/只,灌胃2次,每日1次。攻击4周后处死动物,取胃组织分别行改良Giemsa染色及定量细菌培养,观察Hp定植情况。结果核苷酸序列测定及同源性分析证实,克隆的Hp-NAP基因与GenBank中相关序列的同源性为98%(397/402),氨基酸序列的同源性为98%(131/133)。pTrc99A-NAP转化的减毒沙门菌,可表达Mr约15000的Hp-NAP蛋白,表达量约占菌体蛋白量的37·5%;表达的新生蛋白能与小鼠抗Hp血清特异性反应,具有良好的免疫原性。同空白对照组、SL3261组和SL3261(pTrc99A)组相比,表达Hp-NAP的疫苗株组实验动物的胃组织Hp定植密度明显下降(P<0·05)。结论成功构建表达Hp-NAP的减毒沙门疫苗菌;重组疫苗菌对小鼠Hp感染具有一定免疫预防作用,可作为未来多组分重组减毒沙门疫苗菌的侯选菌株之一。
- 焦志勇陈旻湖朱森林陈洁李国庆陈为胡品津
- 关键词：幽门螺杆菌疫苗免疫
- 微血管密度在胃癌癌变多阶段组织中的表达及其意义被引量：16
- 2006年
- 目的研究微血管密度在胃癌癌变多阶段组织中的表达及其意义。方法标本取自中山大学中山医学院病理学教研室保存的2000年6月至2004年2月的病理组织蜡块,其中慢性胃炎56例、慢性萎缩性胃炎50例、肠化生59例、不典型增生61例;在胃癌组织标本中,无淋巴结转移胃癌组织55例,有淋巴结转移胃癌组织57例。免疫组织化学Envision法显示胃癌癌变多阶段组织中CD34的表达。结果Envision方法检测微血管密度的结果(个/高倍视野,用x-±s表示):慢性胃炎组为13±10;慢性萎缩性胃炎组为11±7;肠化生组为13±9;不典型增生组为17±11;无淋巴转移胃癌组为27±11;有淋巴转移胃癌组为28±10。微血管密度在慢性胃炎组、萎缩性胃炎组、肠化生组组间比较,差异无统计学意义(均P>0·05);萎缩性胃炎组、肠化生组、不典型增生组组间比较,差异无统计学意义(均P>0·05);慢性胃炎组低于不典型增生组(P<0·05);慢性胃炎、萎缩性胃炎、肠化生、不典型增生各组均低于无淋巴转移胃癌组织、有淋巴转移胃癌组(均P<0·05);在胃癌组中,无淋巴转移胃癌组织与有淋巴转移胃癌组织组间比较,差异无统计学意义(P>0·05),其组织学病理程度高中分化组、与低分化组间差异也无统计学意义(P>0·05)。结论微血管密度在胃癌癌变多阶段组织中增加与胃癌的发生有关,与淋巴结转移无关。
- 席银雪宋鑫陈惠新彭挺生陈旻湖
- 关键词：胃肿瘤肿瘤转移抗原CD34微血管密度
- 幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A对人胃腺癌AGS细胞生物学行为的影响被引量：3
- 2008年
- 目的探讨幽门螺杆菌（Hp）细胞毒素相关基因A（CagA）对人胃腺癌AGS细胞生物学行为的影响。方法以CagA野生型Hp菌株和CagA突变型同型Hp菌株为实验对照感染体系，采用光镜和电镜技术、细胞侵袭实验等方法，研究HpCagA在细胞接触、播散和迁移中的病理生理学效应。结果cagA野生型Hp感染AGS细胞后，AGS细胞紧密连接明显破坏，细胞间隙显著增宽，细胞表现为失接触、播散和高侵袭的异常生物学行为。结论HpCagA可导致人胃腺癌AGS细胞发生融合度减弱、播散和高侵袭等生物学行为，从而加速肿瘤的恶性进展。
- 宋鑫陈惠新陈洁白爱平李晓艳陈为陈旻湖
- 关键词：细胞生物学
