国家自然科学基金(81172003)
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 相关作者：冷静张丽汪亦品白小明张海更多>>
- 相关机构：南京医科大学南京市妇幼保健院泰州市第四人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目江苏高校优势学科建设工程项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝癌细胞中EP3受体亚型表达及其调控肝癌细胞生长的研究被引量：1
- 2013年
- 目的:研究肝癌细胞中EP3受体剪接体亚型的表达类型及其调控肝癌细胞生长的功能。方法:EP3受体激动剂Sulprostone处理肝癌细胞株观察其生长情况;二维电泳和质谱分析研究EP3受体激动与下游信号蛋白之间的关系;Real-TimePCR实验鉴定肝癌细胞株中EP3受体剪接体亚型的表达类型。结果:10μmol/L Sulprostone处理CCLP1细胞24 h后,细胞生长率上调了31.46%(P<0.01);给予CCLP1细胞10μmol/L Sulprostone处理24 h后,二维电泳和质谱实验的结果显示促进细胞增殖侵袭、与细胞代谢正相关的蛋白水平升高,降低细胞代谢速度、减慢细胞生长、抑制细胞侵袭转移的相关蛋白水平下降;Real-Time PCR实验检测肝癌细胞,结果表明肝细胞癌HUH-7、Hep3B、HepG2细胞及胆管细胞癌HuCCT1、CCLP1细胞表达EP3-4、EP3-5、EP3-6和EP3-7 4种剪接体亚型。结论:EP3受体通过上调促细胞生长代谢蛋白,下调抑制细胞生长代谢蛋白而发挥促进肝癌细胞增殖的作用。肝细胞癌HUH-7、Hep3B、HepG2细胞及胆管细胞癌HuCCT1、CCLP1细胞表达EP3-4、EP3-5、EP3-6和EP3-7 4种EP3受体剪接体亚型。
- 陈萌马娟夏树开汪亦品白小明张丽冷静
- 关键词：PGE2肝癌
- PGE_2通过Gαs-cAMP-PKA通路上调子宫内膜癌细胞VEGF的表达被引量：1
- 2014年
- 目的 :探讨PGE2(prostaglandinE2,PGE2)对子宫内膜癌Ishikawa细胞血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响及其可能涉及的信号转导通路。方法:用PGE2、4种EP受体激动剂(17-phenyltrinor prostaglandin E2、butaprost、sulprostone和prostaglandin E1 alcohol)、EP2受体拮抗剂AH6809、PKA抑制剂H89、腺苷酸环化酶(AC)抑制剂SQ22536处理Ishikawa细胞,通过Western blot实验检测VEGF蛋白表达水平的变化。结果:PGE2明显提高Ishikawa细胞VEGF蛋白的表达水平,10μmol/L PGE2处理Ishikawa细胞后,VEGF蛋白的表达水平与对照组相比升高31.56%(P<0.05);10μmol/L EP1-4受体激动剂处理Ishikawa细胞后,VEGF蛋白的表达水平与对照组相比明显增高,其中EP2受体激动剂处理组上升了87.80%(P<0.05);10μmol/L EP2受体拮抗剂AH6809处理Ishikawa细胞后,Ishikawa蛋白的表达水平较PGE2处理组下调了45.66%(P<0.05)。25μmol/L AC抑制剂SQ22536、10μmol/L PKA抑制剂H89处理Ishikawa细胞后,VEGF蛋白的表达水平较EP2受体激动剂处理组分别下降了29.00%(P<0.05)和57.50%(P<0.05)。结论:PGE2可通过EP2受体激活cAMP-PKA信号转导通路上调Ishikawa细胞VEGF蛋白的表达。
- 许燕卢顺麟冷静
- 关键词：PGE2VEGF子宫内膜癌
- 前列腺素E2对人肝癌细胞β1-integrin表达调控及相关机制的研究被引量：1
- 2013年
- 目的:阐明前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)通过EP1受体上调肝癌细胞Huh-7中β1-integrin的表达及其相关的信号转导通路。方法:用PGE2、EP1受体激动剂(17-PT-PGE2)、EP1受体抑制剂SC19220、NF-κB抑制剂PDTC处理Huh-7细胞,通过Western blot、免疫荧光组织化学实验等方法检测β1-integrin蛋白表达水平和NF-κB的活性。结果:5μmol/L的PGE2处理Huh-7细胞24 h后,β1-integrin的表达水平与对照组相比上升了129.48%(P<0.01),5μmol/L EP1受体激动剂17-PT-PGE2处理使细胞β1-integrin的蛋白表达水平升高了216.34%(P<0.01)。10μmol/L的EP1受体抑制剂SC19220处理后β1-integrin表达水平与PGE2组相比下降了34.51%(P<0.05)。免疫荧光组织化学实验显示17-PT-PGE2处理Huh-7细胞120 min后,NF-κB核表达水平明显增加;Western blot实验显示5μmol/L 17-PT-PGE2处理Huh-7细胞120 min后,磷酸化NF-κB-p65上升了209.27%(P<0.01)。NF-κB抑制剂PDTC处理Huh-7细胞后β1-integrin蛋白表达水平与EP1受体激动剂组相比降低了63.49%(P<0.01)。结论:PGE2可通过EP1受体上调Huh-7细胞中β1-integrin的表达,此调节作用可能与NF-κB信号转导通路有关。
- 王洁白小明张海汪亦品张丽马娟冷静
- 关键词：前列腺素E2Β1-INTEGRINNF-ΚB
- PGE2通过上调CXCR4表达促进SKOV3细胞侵袭的机制研究被引量：1
- 2015年
- 目的 :探讨前列腺素E2(PGE2)上调人卵巢癌SKOV3细胞CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)的表达从而促进细胞侵袭能力的机制。方法:用PGE2、EP1受体激动剂或抑制剂、CXCR4抑制剂、蛋白激酶C(PKC)抑制剂和钙离子螯合剂处理SKOV3细胞,通过real-time PCR、Western blot、Transwell实验检测CXCR4 m RNA水平、蛋白水平以及细胞的侵袭能力。结果:5μmol/L PGE2处理SKOV3细胞后,CXCR4 m RNA及蛋白水平与对照组相比分别上升了60.33%、122.88%(P均<0.01),细胞的侵袭能力较对照组增强了112.24%(P<0.01);而经10μmol/L CXCR4抑制剂AMD3465处理后,细胞的侵袭水平较PGE2处理组下降了54.00%(P<0.05);5μmol/L EP1受体激动剂17-PT-PGE2处理SKOV3细胞后,CXCR4 m RNA及蛋白水平与对照组相比分别上升了47.90%(P<0.01)、85.56%(P<0.05),细胞的侵袭能力较对照组增强了108.79%(P<0.01);而10μmol/L EP1受体抑制剂sc-51322处理后,CXCR4蛋白表达水平较PGE2处理组下降了54.86%(P<0.05),细胞的侵袭水平较PGE2处理组下降了65.37%(P<0.05);5μmol/L PKC抑制剂BIS-1、10μmol/L钙离子螯合剂BAPTA-AM处理后,CXCR4蛋白表达水平较17-PT-PGE2处理组分别下降了57.38%、56.14%(P均<0.05),细胞的侵袭水平较17-PT-PGE2处理组下降了52.63%、55.26%(P<均0.05)。结论:PGE2可通过激活EP1受体经Gαq/Ca2+/PKC信号转导通路上调卵巢癌SKOV3细胞CXCR4的表达,从而增强肿瘤细胞的侵袭能力。
- 汪亦品冯晓敏张海张丽杨沁怡施凤冷静
- 关键词：卵巢癌PGE2CXCR4
- EP3受体各亚型对肝癌Huh-7细胞生长和侵袭的作用
- 2015年
- 目的 :探讨在肝细胞肝癌Huh-7细胞中前列腺素E2EP3各受体亚型对肿瘤细胞生长与侵袭的作用。方法:对常规培养的人肝细胞肝癌Huh-7细胞,瞬时转染EP3受体的4个亚型EP3-4R、EP3-5R、EP3-6R、EP3-7R,应用RT-PCR实验检测转染细胞EP3受体各亚型的m RNA表达水平;应用Western blot实验检测相关蛋白水平。对转染后的Huh-7细胞,分别给予不同浓度的EP3受体激动剂sulprostone作用24 h,用WST-8细胞增殖测定试剂检测细胞的增殖情况;应用划痕实验检测细胞的侵袭性;应用Western blot实验检测细胞内ERK蛋白磷酸化水平的变化。结果:RT-PCR及Western blot实验结果显示Huh-7细胞EP3受体表达水平明显增高。WST-8实验显示,经10μmol/L sulprostone处理24 h后,过表达EP3-4R、EP3-5R和EP3-7R亚型的细胞增殖率分别达到126.7%、124.0%、123.8%。划痕实验结果显示,过表达细胞的侵袭性分别增加到135.8%、123.5%、128.7%。Western blot显示,EP3-4R、EP3-5R和EP3-7R转染细胞内ERK磷酸化水平分别上调了54.8%、33.4%、44.3%。而过表达EP3-6受体亚型细胞的增殖率、侵袭率和胞内ERK磷酸化水平改变不明显。结论 :Huh-7肝癌细胞中,EP3-4R、EP3-5R及EP3-7R这3种受体亚型对细胞的生长及侵袭有显著促进作用,而EP3-6R亚型则无明显的促进作用。EP3受体促进肝癌细胞生长和侵袭的作用与ERK激活的现象一致。
- 施凤夏树开马娟张丽白小明张海杜明占汪亦品程珊玉冷静
- 关键词：肝细胞肝癌ERK
