浙江省科技攻关计划(2004C12035)
- 作品数：5 被引量：64H指数：4
- 相关作者：沈卫锋何丽华翁宏飚牛宝龙孟智启更多>>
- 相关机构：浙江省农业科学院中国林业科学研究院新疆农业大学更多>>
- 发文基金：浙江省科技攻关计划国家林业局重点科研项目浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 松材线虫actin基因全长cDNA的克隆被引量：4
- 2007年
- 借助电子克隆和RACE方法,克隆了松材线虫生长发育关键基因actin的全长cDNA序列(登陆号:EU100952)。该序列共1 296个碱基,有一个完整ORF,起始密码子在48位,终止密码子在1 176位,编码376个氨基酸。
- 沈卫锋牛宝龙翁宏飚何丽华刘岩齐晓朋孟智启
- 关键词：松材线虫ACTIN基因全长CDNA
- 根癌农杆菌介导的灰葡萄孢菌遗传转化研究被引量：14
- 2008年
- 以pCAMBIA1300-N载体为骨架,成功构建了以绿色荧光蛋白(gfp)为报告基因,潮霉素(hph)为抗性筛选标记的载体pKPG,并利用根癌农杆菌介导转化系统,成功获得了能表达绿色荧光蛋白的重组灰葡萄孢菌。通过PCR检测转化子的绿色荧光蛋白基因和潮霉素抗性表达框,观察菌丝和分生孢子的荧光表型,以及gfp基因的Southern杂交验证,结果表明:被测转化子基因组中均成功整合了目的基因片段。
- 沈卫锋翁宏飚牛宝龙何丽华刘岩齐晓朋孟智启
- 关键词：灰葡萄孢菌根癌农杆菌绿色荧光蛋白
- 松材线虫RNA聚合酶基因的RNA干扰研究被引量：7
- 2007年
- 克隆了松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)RNA聚合酶基因片段,构建大量表达松材线虫RNA聚合酶基因片段的特异双链RNA(dsRNA)表达载体,并用表达的双链RNA(dsRNA)对松材线虫进行了RNA干扰实验。结果表明,松材线虫浸泡在20℃的RNA聚合酶基因双链RNA(dsRNA)溶液中干扰24 h后再培养12 d,其繁殖倍数为73.2;对照处理的繁殖倍数为322.8,两者的繁殖倍数相差4.4倍;松材线虫浸泡在4℃的RNA聚合酶基因双链RNA(dsRNA)溶液中干扰24 h后再培养12 d,其繁殖倍数为120.8。RNA聚合酶基因的双链RNA(dsRNA)浸泡明显的抑制了松材线虫的繁殖;并且发现利用浸泡法对线虫进行干扰试验,双链RNA(dsRNA)20℃浸泡的干扰效果要好于前人报道4℃浸泡的干扰效果。
- 王守先牛宝龙沈卫锋翁宏飚何丽华蒋平吾中良孟智启
- 关键词：松材线虫RNA干扰
- ^60Coγ射线对松褐天牛生育力的影响被引量：9
- 2008年
- 用303、5与40Gy三个剂量的60Coγ射线辐照松褐天牛,结果表明辐照对松褐天牛的生育力有一定影响,其中以40Gy辐照剂量影响最为显著。通过保持雌虫不变,更换雄虫,发现雌虫与经辐照的雄虫交尾后再与非辐照雄虫交尾,雌虫的产卵量以及孵化率虽较更换雄虫前略有提高,但明显低于对照。说明辐照对松褐天牛的生殖系统有一定的影响。不同的配比模式之间产卵量和孵化率也存在显著差异。
- 马沛沛张永安王登元王玉珠曲良建蒋平牟建军
- 关键词：松褐天牛生育力Γ射线辐照剂量害虫防治
- 枯草芽孢杆菌作为外源基因表达系统的研究进展被引量：32
- 2005年
- 枯草芽孢杆菌是目前研究较为详尽的外源基因表达宿主,但由于受自身分泌蛋白酶多、构建的表达质粒不太稳定等因素影响,其应用受到一定的限制。文章综述了枯草芽孢杆菌基因组的特征、蛋白的分泌机制、重组表达质粒不稳定的原因,指出了枯草芽孢杆菌作为外源蛋白表达系统的瓶颈及今后的研究重点。
- 沈卫锋牛宝龙翁宏飚何丽华孟智启
- 关键词：枯草芽孢杆菌基因组
