长江学者和创新团队发展计划(IRT-0413)
- 作品数:2 被引量:11H指数:2
- 相关作者:王继峰牛建昭李健李亚东李彧更多>>
- 相关机构:北京中医药大学更多>>
- 发文基金:长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金高等学校学科创新引智计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 人循环纤维细胞的分离和鉴定被引量:8
- 2007年
- 目的建立分离、培养人循环纤维细胞的方法,并探讨其细胞生物学特征。方法取成人外周血白细胞,经淋巴细胞分离液分离,接种于含20%胎牛血清的DMEM培养液中进行培养。对贴壁生长的成纤维样细胞进行免疫组织化学鉴定,流式细胞仪分析和电镜观察,并通过测定培养液中羟脯氨酸含量,研究其胶原合成能力。结果细胞培养9d后CD34、CD45、Ⅰ型胶原分子阳性,其中Ⅰ型胶原分子阳性细胞含量为83.5%;电镜下观察具有典型的成纤维细胞特征;培养液中羟脯氨酸含量为11.17mg/L,明显高于空白对照组8.07mg/L(P<0.01),表明培养细胞具有胶原合成能力。结论成人外周血中存在成纤维细胞的前体细胞,经体外分离、培养可分化为循环纤维细胞。
- 李亚东牛建昭王继峰李健李彧
- 关键词:免疫细胞化学电镜成人外周血
- 循环纤维细胞和人胚肺成纤维细胞的比较研究被引量:5
- 2007年
- 目的比较人循环纤维细胞与人胚肺成纤维细胞的形态学特征和合成胶原的能力。方法体外分离、培养人循环纤维细胞,用酶水解法和天狼星红染色法分别测定培养液中的羟脯氨酸含量和细胞层中的胶原含量,比较其在不同分化阶段与培养的人胚肺成纤维细胞合成胶原的能力,同时用Western blotting分析其分泌胶原的类型。结果循环纤维细胞在体外分化过程中,形态学特征不断变化,从圆形幼小、多聚集成“细胞岛”的纤维细胞向梭形、透明、边缘多纤毛状突起的成纤维细胞样细胞分化,在分化过程中不断合成胶原,尤其在培养的细胞层中伴有大量胶原沉积,所分泌的胶原以Ⅰ型和Ⅲ型胶原为主。结论循环纤维细胞能够在体外分化为成纤维细胞样细胞,与人胚肺成纤维细胞具有相似的胶原合成能力。
- 李亚东牛建昭王继峰李彧李健李银生
- 关键词:成纤维细胞胶原体外培养