国家自然科学基金(81172078)
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
- 相关作者：韩宝三陈园园徐枫叶园园刘颖斌更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属新华医院上海交通大学上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家临床重点专科建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SALL4及其在非生殖细胞恶性肿瘤中的临床应用价值被引量：2
- 2016年
- 婆罗双树样基因4 （SALL4）在胚胎干细胞和肿瘤细胞的增殖、多能性维持方面发挥着重要作用.在完全分化的细胞中,SALL4基因的表达被沉默或者下调,而在多种非生殖细胞恶性肿瘤中SALL4基因被再次激活,表达上调,并且SALL4的表达水平常常与疾病的进程、治疗效果及预后相关.因此,SALL4的检测对于非生殖细胞恶性肿瘤的诊断以及病情监测具有重要意义.
- 陈园园叶园园徐枫李志臻刘颖斌韩宝三
- 关键词：肿瘤
- 磁性纳米四氧化三铁协同表柔比星逆转MCF-7/ADR细胞多药耐药研究
- 2015年
- 目的探讨磁性纳米四氧化三铁(MgNPs-Fe3O4)联合表柔比星(epirubicin,EPI)逆转人源乳腺癌细胞MCF-7/ADR耐药性的机制。方法将乳腺癌细胞株MCF-7/ADR分为对照组、MgNPs-Fe3O4组、EPI组和EPI+MgNPsFe3O4组,CCK8法检测MgNPs-Fe3O4和EPI对MCF-7/ADR细胞增殖的抑制作用;Hoechst33342法检测细胞凋亡;RT-PCR检测耐药基因ABCB1和ABCG2mRNA表达水平变化;蛋白质印迹法分析耐药蛋白P-gp、BCRP及其表达率。结果 CCK8法检测结果显示,EPI和EPI+MgNPs-Fe3O4对MCF-7/ADR细胞增殖抑制作用呈浓度依赖性,5μmol/L的EPI对MCF-7/ADR细胞增殖抑制率为(27.59±2.32)%,5μmol/L EPI+20μg/mL MgNPs-Fe3O4对MCF-7/ADR细胞增殖抑制率为(49.70±3.60)%,P=0.002。Hoechst33342荧光结果显示,EPI+MgNPs-Fe3O4组与其他3组相比,细胞凋亡率为(69.34±1.53)%,细胞凋亡的形态变化更加明显,高于对照组(3.33±0.58)%、MgNPs-Fe3O4组(4.33±0.58)%和EPI组(33.33±2.08)%。实时定量PCR结果显示,EPI+MgNPs-Fe3O4组ABCB1mRNA的相对表达量为0.347±0.012,低于对照组(1.001±0.072)、MgNPs-Fe3O4组(0.971±0.015)和EPI组(0.622±0.043);EPI+MgNPs-Fe3O4组的ABCG2mRNA的相对表达量为0.528±0.068,低于对照组(1.002±0.073)、MgNPs-Fe3O4组(0.949±0.026)和EPI组(0.785±0.083)。蛋白质印迹法结果显示,EPI+MgNPs-Fe3O4组的P-gp蛋白的相对表达量为0.363±0.025,低于对照组(0.957±0.031)、MgNPs-Fe3O4组(0.887±0.038)和EPI组(0.680±0.056);EPI+MgNPs-Fe3O4组BCRP蛋白的相对表达量为0.387±0.035,低于对照组(0.947±0.015)、MgNPs-Fe3O4组(0.933±0.040)和EPI组(0.633±0.050)。结论MgNPs-Fe3O4可能通过下调耐药基因ABCB1、ABCG2和耐药蛋白P-gp、BCRP的表达,逆转乳腺癌细胞对EPI的耐受性,增强化疗药物敏感度。
- 叶园园陈园园徐枫刘颖斌刘培峰韩宝三
- 关键词：表柔比星乳腺肿瘤耐药逆转
- 叶酸修饰的乳腺癌靶向纳米超声造影剂的研究
- 背景:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁女性的身心健康;早发现、早诊断和早治疗是提高生存率的关键。而目前临床尚缺乏无创的乳腺癌早期检测方法。研究表明,纳米级超声造影剂具有较强的穿透能力,能够克服微米级造影剂血管池...
- 陈园园
- 关键词：叶酸受体超声诊断靶向造影剂纳米粒乳腺癌
- 构建新型液态氟碳壳聚糖纳米超声造影微粒被引量：1
- 2013年
- 目的构建一种新型天然高分子聚合物纳米超声造影微粒,表征其理化特征、体外显像效果及其对肿瘤细胞的结合能力和毒性。方法采用超声乳化法制备包裹液态氟碳PFOB的壳聚糖(CTS)纳米粒和FITC标记的壳聚糖纳米粒(FITC-CTS),表征其表面形态、粒径、Zeta电位和稳定性;评价纳米粒的体外超声显像效果,以激光共聚焦观察FITC-CTS与细胞的结合作用,流式细胞仪检测FITC-CTS对细胞的黏附比例。结果制备的纳米粒形态圆整,CTS纳米粒平均粒径为(248.52±7.96)nm,Zeta电位为+(29.91±0.64)mV,FITC-CTS纳米粒平均粒径为(244.83±2.72)nm,Zeta电位为+(22.21±0.53)mV。纳米粒性质稳定,在体外能增强超声显影,激光共聚焦观察到纳米粒聚集在细胞膜周围,流式细胞仪测得纳米粒对细胞的黏附比例为(45.15±8.35)%。结论构建的CTS纳米粒性质稳定,体外能与肿瘤细胞MCF-7紧密结合,增强超声回声。
- 陈玲谷雪莲詹维伟周建桥韩宝三王涌
- 关键词：壳聚糖造影剂纳米
- 靶向阳离子脂质体递送乳腺癌抑制作用的研究miRNA对三阴性被引量：1
- 2017年
- 目的探讨靶向阳离子脂质体(CLPs)递送miRNA对三阴性乳腺癌(TNBC)相关特异性抑瘤基因的作用。方法通过薄膜分散法评估理化性质对阳离子脂质成分进行优化,制备具有理想表征性质的新型透明质酸(HA)CLP,表征CLPs的粒径和zeta电位。对CLPs进行表面HA靶向修饰,并通过激光共聚焦观察和流式细胞术的荧光检测评估HA-CLPs进入细胞的能力。利用EdU细胞增殖检测和细胞划痕实验对负载miRNA的HA-CLPs对细胞产生的生物学效应进行研究。结果薄膜分散法制备的CLPs纳米颗粒分散性良好、形态均一,呈中空球形结构,CLPs平均粒径为(180.6±3.4)nm、平均zeta电位为(43.4±2.8)mV。经过HA修饰后的纳米颗粒及运载miR-205后的纳米颗粒平均粒径分别为(236.65±6.9)nm、(205.6±2.2)nm,平均电位分别为(29.1±5.4)mV、(11.2±1.1)mV。经过激光共聚焦检测和流式细胞术荧光检测,验证了HA-CLPs能够顺利将miR-205运送至细胞内而分布在细胞核附近,且HA的靶向作用显著。EdU实验和细胞划痕实验验证了运载入TNBC细胞内的miR-205和miR-34a对其增殖和迁移的抑制作用。结论制备的靶向阳离子脂质体对TNBC细胞具有较强的靶向特异性,且通过靶向递送miR-205和miR-34a对TNBC细胞的增殖和迁移起到了一定的抑制作用。
- 徐枫刘婷赵亚男陆森陈园园叶园园刘培峰韩宝三
- 关键词：脂质体透明质酸乳腺肿瘤
- SALL4基因沉默对MCF-7/A细胞增殖和化疗敏感性的影响被引量：3
- 2016年
- [目的]探讨沉默SALL4基因对乳腺癌耐药细胞MCF-7/A的增殖及化疗敏感性的影响。[方法]q RT-PCR和Western Blot实验检测MCF-7、MCF-7/A细胞内SALL4表达水平,运用慢病毒包装sh RNA方法沉默MCF-7/A细胞的SALL4基因;实验组(Lv-sh SALL4)、阴性对照组(Lv-sh NC)和空白对照组(CON)。CCK8法、克隆形成实验检测SALL4沉默对细胞增殖能力的影响;CCK8法检测表柔比星处理细胞24h和48h的半数抑制浓度(IC_(50));流式细胞仪检测细胞凋亡。[结果]SALL4在MCF-7/A细胞中的表达水平显著高于MCF-7(P<0.05)。MCF-7/A细胞中SALL4基因被成功沉默,病毒感染MCF-7/A细胞72h后,细胞感染效率约95%,沉默SALL4基因后MCF-7/A细胞内SALL4 m RNA及蛋白表达均明显降低(P<0.05)。沉默MCF-7/A细胞的SALL4基因,显著抑制了细胞的增殖能力(P<0.05),增强了细胞对表柔比星的敏感性;表柔比星24h和48h的IC_(50)均明显降低(P<0.05),并且表柔比星诱导的细胞凋亡增加(P<0.05)。[结论 ]沉默SALL4基因能够抑制乳腺癌耐药细胞MCF-7/A的增殖,增强耐药细胞对表柔比星的敏感性。SALL4基因沉默可能是乳腺癌治疗的新靶点。
- 陈园园叶园园李志臻徐枫牛瑞洁刘颖斌韩宝三
- 关键词：表柔比星
- 构建叶酸修饰的乳腺癌靶向纳米超声造影微粒被引量：3
- 2016年
- 背景:研究表明,纳米级超声对比剂具有较强的穿透能力,使血管外靶组织显像成为可能,超越了微米级对比剂仅能发生血池内显像的局限性。目的:构建叶酸修饰的乳腺癌靶向纳米超声造影微粒,评估其与细胞靶向结合的能力及体外超声成像效果。方法:采用超声乳化-蒸发法制备对比剂聚乙二醇化乳酸羟基乙酸共聚物包裹液态氟碳的纳米粒(记为m PP/PFOB)和叶酸修饰的聚乙二醇化乳酸羟基乙酸共聚物包裹液态氟碳的纳米粒(记为m PPF/PFOB)。(1)生物相容性检测:取对数生长期的人皮肤成纤维细胞HFF-1、人乳腺癌MCF-7细胞,分别加入0,0.005,0.01,0.02,0.05,0.1,0.2,1 g/L的m PP/PFOB或m PPF/PFOB,培养24 h后检测细胞活力。(2)体外寻靶能力检测:取对数生长期的HFF-1、MCF-7细胞,均分3组干预,A、B组分别加入Cy5标记的m PP/PFOB与m PPF/PFOB,C组在加入Cy5标记的m PP/PFOB前以叶酸处理2 h,培养0.5 h后,流式细胞仪检测荧光强度;培养20 min后,共聚焦显微镜观察对比剂在细胞中的分布。(3)体外超声显影:实验分3组,A组为生理盐水,B组制备m PPF/PFOB纳米粒与生理盐水混悬液,C组以m PPF/PFOB纳米粒与生理盐水混悬液重悬MCF-7细胞沉淀,制备纳米粒与细胞混悬液,将3种液体加入乳胶手套中扎紧,采用超声诊断仪检测体外超声成像效果。结果与结论:(1)生物相容性检测结果:两种纳米粒无明显的细胞毒性;(2)流式细胞仪检测结果:在MCF-7细胞中,B组平均荧光强度明显高于A组和C组;而在HFF-1细胞中,3组平均荧光强度无显著差别;(3)共聚焦显微镜观察结果:m PPF/PFOB主要聚集在MCF-7细胞膜周围,m PP/PFOB则分布在胞浆。(4)体外超声显影结果:m PPF/PFOB与MCF-7细胞结合后,在体外能增强超声回声;(5)结果提示:叶酸修饰的聚乙二醇化乳酸羟基乙酸共聚物包裹液态氟碳的纳米粒具有良好的生物相容性,具有与乳腺癌MCF-7细胞靶向结合能力和增强超�
- 陈园园徐枫杨辉刘婷周建桥蔡晨蕾叶园园刘培峰韩宝三
- 关键词：纳米粒聚乳酸-羟基乙酸共聚物叶酸受体靶向对比剂乳腺癌国家自然科学基金
