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HMGB1对大鼠类纤维母细胞样滑膜细胞STAT/SOCS/cyclin D1表达的影响被引量：6: 2010年; 目的:探讨高迁移率族蛋白(HMGB)1对大鼠滑膜细胞STAT/SOCS信号通路的调控作用。方法:将常规培养大鼠滑膜细胞株RSC-364细胞随机分为正常对照组和10μg/L HMGB1刺激组,分别培养6 h、12 h和24 h后,RT-PCR检测STAT1/3 mRNA的表达,Western blotting法检测磷酸化STAT(p-STAT)1/3和STAT1/3蛋白的表达,流式细胞术(FCM)检测p-STAT1/3、SOCS 1/3和cyclin D1蛋白的表达。结果:HMGB1呈时间依赖性上调STAT1 mRNA和蛋白的表达,以及cyclin D1蛋白的表达,并能明显增加p-STAT1的水平(P<0.01),但STAT3的表达以及p-STAT3的量与对照相比无明显差异。HMGB1刺激后还能明显增加细胞SOCS1的蛋白水平,但SOCS3蛋白仅于6 h呈一过性增高。结论:HMGB1能激活STAT1信号转导通路,并上调cyclin D1基因表达,这可能与HMGB1促进滑膜细胞的增殖有关。; 郭惠芳刘淑霞张玉军彭晨星左连富郭建文; 关键词：滑膜细胞细胞周期蛋白D1

HMGB1与JAK2/STAT1信号通路在大鼠滑膜组织增殖中的相关性研究被引量：3: 2011年; 目的探讨胶原诱导的关节炎大鼠中高迁移率族蛋白(high mobility group box,HMGB)1对磷酸化janus激酶(phospho-jgnus kinase,P-JAK)2/信号转导及转录活化因子(signal transducer and activator oftranscription,P-STAT)1信号转导通路的调控作用。方法将Wistar大鼠随机分成4组,正常对照Ⅰ组、正常对照Ⅱ组、模型Ⅰ组和模型Ⅱ组。光镜下观察关节组织结构变化。免疫组织化学检测HMGB1、增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)蛋白表达,流式细胞术检测P-JAK2、P-STAT1和细胞因子信号传导抑制蛋白1(suppressor of cytokine signaling,SOCS1)蛋白的表达。结果模型组大鼠随病程延长滑膜组织增生、炎细胞浸润、骨破坏加重,细胞核、细胞浆以及细胞外基质中HMGB1蛋白表达显著增加,同时伴随PCNA蛋白表达增加;与正常对照组相比,模型Ⅰ组P-JAK2、P-STAT1和SOCS1蛋白表达显著增加(P<0.01);与模型Ⅰ组相比,模型Ⅱ组P-JAK2、SOCS1的表达量下降(P<0.05),P-STAT1的表达量变化差异无统计学意义(P>0.05)。P-STAT1与HMGB1、PCNA的表达呈正相关(r=0.474,P=0.014;r=0.529,P=0.005)。结论 HMGB1可能激活了JAK2/STAT1信号转导通路,启动了滑膜增殖和骨质破坏过程。; 张明峰周守勤白连祥郭惠芳高丽霞马丽艳; 关键词：关节炎胶原

高迁移率族蛋白1及Toll样受体4在类风湿关节炎患者血清和外周血单个核细胞中的表达及意义被引量：5: 2009年; 目的通过研究高迁移率族蛋白（HMGB）1及Toll样受体（TLR）4在类风湿关节炎（RA）外周血单个核细胞（PBMC）和血清中的表达，探讨HMGB1的作用及其与疾病活动的关系。方法选取活动期RA患者38例和非活动期RA患者36例及健康对照组26名。采用反转录一聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测PBMC中HMGB1 mRNA的表达，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中HMGB1蛋白的表达。采用流式细胞术分析PBMC上TLR4的表达。结果①活动期RA组PBMC中HMGB1 mRNA相对表达量和血清中HMGB1蛋白水平均高于健康对照组和非活动期RA患者[分别为2．63与0．71，0．93和（10.2±1．2）与（7．5±1．8），（8.3±1．8）ng／ml，P〈0．01]。②活动期RA患者CD14^＋单核细胞和CD3^＋淋巴细胞上TLR4蛋白相对表达量高于非活动期和健康对照组（P〈0．05或P〈0．01），非活动期患者高于健康对照组（P〈0．05或P〈0．01）。③血清中HMGB1蛋白水平与红细胞沉降率（ESR）、C反应蛋白（CRP）、类风湿因子（RF）、关节压痛数、肿胀数及关节X线分期均呈正相关，亦与TLR4蛋白相对表达量呈正相关。结论RA患者PBMC具有合成和分泌HMGB1蛋白的功能，并部分通过与TLR4结合激活炎症反应，加重骨质破坏。; 郭惠芳刘淑霞刘晓雷左连富唐丽娟刘江惠张明峰马丽艳; 关键词：高迁移率族蛋白质类 TOLL样受体外周血单个核细胞

信号转导及转录激活子1和3在高迁移率族蛋白1诱导的大鼠纤维母细胞样滑膜细胞增殖中的作用被引量：1: 2010年; 目的探讨高迁移率族蛋白（high mobility group box，HMGB）1对大鼠滑膜细胞STAT信号通路的调控作用。方法将常规培养大鼠滑膜细胞株RSC-364细胞随机分为正常对照组和10μg／LHMGBI刺激组，分别培养6h、12h和24h，RT—PCR检测STAT1／3mRNA的表达，Western印迹法和流式细胞术（flow cytometric analysis，FCM）检测STAT1、STAT3、磷酸化STAT1（phospho—STAT1，p—STAT1）和磷酸化3（phospho—STAT3，p—STAT3）蛋白的表达，免疫细胞化学（ICC）检测PCNA蛋白的表达。结果HMGB1刺激6h～24h组STAT1 mRNA和p-STAT1蛋白的相对表达量呈时间依赖性上调，24h表达最高，与正常对照组相比差异均具有显著统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。PCNA蛋白阳性信号表达于细胞核内，呈棕黄色颗粒，且随着刺激时间延长阳性信号逐渐增强。RT—PCR、ICC染色和FCM均显示STAT3mR—NA和p-STAT3蛋白的相对表达量各组间相比差异均无统计学意义。结论HMGB1可能通过激活STAT1信号转导通路促进滑膜细胞的增殖和分化。; 郭惠芳刘淑霞刘青娟韩长城马丽艳高丽霞; 关键词：高迁移率族蛋白1 滑膜细胞细胞增殖

高迁移率族蛋白1对大鼠纤维母细胞样滑膜细胞增殖周期的调控作用被引量：4: 2010年; 目的:探讨高迁移率族蛋白(HMGB)1对滑膜细胞增殖周期的调控作用及可能机制。方法:将常规培养大鼠滑膜细胞株RSC364细胞随机分为正常对照组和10μg/LHMGB1刺激组,分别培养6、12和24小时,流式细胞术检测细胞周期分布和细胞中Cyclin D1/CDK4蛋白表达;免疫细胞化学检测PCNA和p21蛋白表达。结果:HMGB1作用至12和24小时,处于G0/G1期的细胞逐渐减少,G2/M期细胞增多,增殖指数升高分别为(68.00±1.42)和(69.61±5.86),与正常对照组(53.83±4.95)和6小时组(55.98±6.34)相比差异具有统计学意义(P<0.01或0.05)。PCNA和p21蛋白阳性信号均表达于滑膜细胞核内,随着作用时间延长,PCNA蛋白表达增强,阳性细胞数目逐渐增多,而p21蛋白表达减低,阳性细胞数目逐渐下降。HMGB1作用6～24小时CyclinD1蛋白相对表达量逐渐增加,分别为(1.42±0.02)、(1.65±0.03)和(1.67±0.01),与正常对照组(1.00±0.01)相比差异具有显著统计学意义(P<0.01),CDK4蛋白表达量也显著增加分别为(1.26±0.23)、(1.29±0.07)和(1.26±0.03),与正常对照组(1.00±0.0.25)相比差异具有显著统计学意义(P<0.01),但随着刺激时间的延长,其表达量无明显变化。结论:HMGB1可能通过上调细胞周期调控蛋白CyclinD1/CDK4的表达,下调细胞周期抑制剂p21的表达,促进滑膜细胞的增殖和分化。; 郭惠芳刘淑霞周守勤马丽艳高丽霞王志会; 关键词：高迁移率族蛋白1 滑膜细胞 CYCLIN P21

HMGB1在类风湿关节炎疾病活动中的作用及其与EMMPRIN/CD147表达的相关性研究被引量：7: 2009年; 目的:探讨高迁移率族蛋白(HMGB)1在类风湿关节炎(RA)病情活动中的作用机制。方法:选取RA患者74例(活动期38例、非活动期36例)及健康对照者26例。采用RT-PCR方法检测外周血单个核细胞(PBMC)中HMGB1 mRNA的表达,酶联免疫吸附(ELISA)方法检测血清中HMGB1蛋白的表达。采用流式细胞术分析CD14+单核细胞表面Toll样受体(TLR)4和EMMPRIN/CD147的表达。结果:活动期RA组HMGB1 mRNA相对表达量和蛋白水平均高于健康对照者和非活动期RA患者[分别为2.63 vs 0.71,0.93和(10.20±1.24 vs 7.48±1.75,8.31±1.85)ng/ml)](P<0.01)。活动期RA患者CD14+单核细胞上TLR4和CD147的表达量均显著高于非活动期和健康对照组(P<0.01),非活动期患者显著高于健康对照组(P<0.01)。TLR4和CD147双阳性细胞数量和蛋白的相对表达量在活动期RA患者中均最高。血清中HMGB1蛋白水平与ESR、CRP、RF、及关节X线分期均呈正相关,亦与TLR4和CD147的表达呈正相关(P<0.05或P<0.01)。结论:RA患者PBMC具有合成和分泌HMGB1蛋白的功能。HMGB1可能通过与TLR4结合激活CD14+单核细胞并表达CD147,促进其向滑膜组织迁移而加速骨质破坏。; 郭惠芳孙熠峰刘淑霞左连富唐丽娟刘江惠田玉; 关键词：关节炎类风湿高迁移率族蛋白 TOLL样受体

类风湿关节炎患者血清中高迁移率族蛋白1的作用及其与MMP2、TIMP2的关系被引量：7: 2010年; 目的初步探讨高迁移率族蛋白(HMGB)1、基质金属蛋白酶(MMP)2及其组织抑制因子(TIMP)2在类风湿关节炎(RA)中的作用及可能作用机制。方法收集61例RA患者和24例健康志愿者外周血。采用ELISA方法检测血清中HMGB1、MMP2和TIMP2蛋白表达量。采用流式细胞术分析外周血单个核细胞(PBMC)表面Toll样受体(TLR)4和CD147的表达。同期进行ESR、CRP、RF和双手正位X线检查等相关指标检测。结果RA患者血清中,HMGB1浓度较健康对照组显著升高([9.34±2.25vs7.40±1.06)ng.mL-1](]P<0.01),而MMP2和TIMP2浓度明显低于健康对照组(571.26±81.95vs633.76±26.92)和(259.27±18.90vs273.85±26.31)(P<0.01和P<0.05)。PBMC中TLR4+CD147+和CD14+CD147+细胞比例和平均荧光强度显著高于健康对照组(P<0.01)。HMGB1水平与ESR、CRP、RF及X线分期均呈正相关(P<0.05或P<0.01),亦与CD14+CD147+和TLR4+CD147+的平均荧光强度呈显著正相关(P<0.01)。而MMP2水平与之呈负相关(P<0.05和P<0.01)。结论胞外HMGB1通过激活PBMC表达粘附分子CD147而发挥其致炎效应,并直接或间接下调了保护性因子MMP2的表达,加速关节炎进展。HMGB1可能成为RA治疗新靶点。; 郭惠芳刘淑霞马丽艳靳洪涛张明峰王志会; 关键词：类风湿高迁移率族蛋白 TOLL样受体

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河北省科技厅科技攻关项目(08206122D)

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