上海市医学领军人才项目(LJ06003)
- 作品数：8 被引量：28H指数：4
- 相关作者：陈生弟潘静洪桢王刚周海燕更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：上海市医学领军人才项目国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 泛素羧基末端水解酶-1抑制剂对多巴胺能神经元的神经毒性作用
- 2009年
- 目的利用人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞观察泛素羧基末端水解酶-1（UCH-L1）抑制剂对多巴胺能神经元的毒性作用并探讨其可能的毒性机制。方法用不同浓度（5、10、25、50、75、100μmol／L）的UCH—L1抑制剂作用SK-N—SH细胞24h，MTT法检测细胞活力、Hoechst染色检测凋亡的细胞核及Western blot检测UCH—L1蛋白、单个泛素分子及多聚化泛素蛋白的表达、荧光检测泛素蛋白酶体系统（UPS）的功能。结果经UCH—L1抑制剂处理24h后SK-N-SH细胞突起样结构消失，细胞体积变小、形态变圆；随着UCH—L1抑制剂浓度的增加，细胞活性进一步下降；与对照组比较，细胞活力在抑制剂浓度为50μmol／L时，作用24h后即出现明显下降，差异有统计学意义（P〈0．05）；Hoechst染色可见凋亡细胞碎裂的细胞核；Western blot检测到细胞内UCH-L1蛋白表达没有变化、单个泛素分子水平下降、多聚泛素化蛋白增加；荧光检测显示UPS功能下降。结论UCH—L1抑制剂在体外对多巴胺能神经元有毒性作用，可诱导细胞凋亡。在凋亡过程中。UPS功能下降、细胞内多聚泛素化蛋白堆积可能发挥了作用。
- 谭玉燕王志全周海燕陈生弟
- 关键词：泛素蛋白酶体系统
- 调控小胶质细胞——帕金森病药物研发的新方向(述评)被引量：4
- 2007年
- 陈生弟汪锡金
- 关键词：帕金森病小胶质细胞
- 帕金森病患者的睡眠障碍及相关因素评估被引量：1
- 2009年
- 帕金森病（PD）是一组以震颤、强直、运动迟缓和步态失调伴姿势不稳等运动障碍为主要临床表现的神经系统慢性变性疾病。除运动障碍外，自主神经功能紊乱、认知障碍、睡眠障碍、感觉异常等一些复杂非运动障碍也严重影响患者的生活质量。PD伴发睡眠障碍的发生率远远高于正常人群，越来越引起研究者的重视。我们对PD患者的睡眠质量进行了评估，并分析了PD患者睡眠障碍与各种可能因素的关系，并对该症状的发生原因进行探讨。
- 洪桢潘静王刚白丽郑汭陈生弟
- 关键词：睡眠障碍帕金森病自主神经功能紊乱病患变性疾病神经系统
- JNK信号通路与神经退行性疾病被引量：6
- 2008年
- c-JunN端蛋白激酶(JNK)是细胞功能的重要激酶,在各种刺激以及生理状态下导致神经元凋亡中起着重要的作用。JNK主要与一些神经退行性疾病有着密切的关系。理解JNK信号通路能够为将来选择JNK作为靶点干预这些疾病条件。JNK参与这些神经退行性疾病的发病机制,因此抑制其活性成为有效治疗的靶点。
- 潘静陈生弟
- 关键词：神经退行性疾病JNK靶点
- 尼古丁对Aβ_(25～35)细胞毒性的拮抗作用及与β-淀粉样前体蛋白代谢的关系被引量：2
- 2007年
- 目的研究尼古丁对β-淀粉样蛋白(Aβ)细胞毒性的拮抗作用及与β-淀粉样前体蛋白(APP)代谢之间的关系。方法不同浓度的尼古丁分别单独或与Aβ25～35同时作用于PC12细胞24h,然后采用MTT法检测细胞活力;WesternBlot法检测PC12细胞上清液中的可溶性β-淀粉样前体蛋白α片段(sAPPα)和细胞内胰岛素降解酶的表达水平。结果(1)尼古丁浓度于0.10～500μmol/L时,对PC12细胞无明显毒性作用(均P>0.05),当浓度升至1000μmol/L时则产生一定的毒性作用(P≤0.05);Aβ25～35浓度于1～100μmol/L时对PC12细胞具有明显毒性作用(均P≤0.01),Aβ25～35浓度降至0.10μmol/L时则失去其毒性作用(P>0.05)。(2)尼古丁浓度于0.10～1000μmol/L时,对Aβ25～35诱导的细胞毒性呈现不同的作用:尼古丁浓度于0.10～100μmol/L时可部分拮抗Aβ25～35诱导的细胞毒性作用(均P<0.01),但不能使PC12细胞活力恢复至正常细胞水平(均P<0.01);而当尼古丁浓度于500μmol/L和1000μmol/L时则不产生拮抗Aβ25～35诱导的细胞毒性作用(均P>0.05)。(3)Aβ25～35(20μmol/L)和尼古丁(100μmol/L,1000μmol/L)单独或联合作用均可引起PC12细胞可溶性β-淀粉样前体蛋白α片段分泌水平升高(均P<0.01),其中以尼古丁浓度为100μmol/L时可溶性β-淀粉样前体蛋白α片段的分泌水平最高。(4)浓度为20μmol/L的Aβ25～35可导致胰岛素降解酶表达水平降低(P<0.01),而浓度为100μmol/L的尼古丁可明显拮抗这种作用(P<0.01),1000μmol/L的尼古丁则无明显拮抗作用(P>0.05);将浓度为100μmol/L和1000μmol/L的尼古丁分别单独作用于PC12细胞时,胰岛素降解酶表达水平明显升高,与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论尼古丁对Aβ25～35诱导的细胞毒性的拮抗作用与可溶性β-淀粉样前体蛋白α片段的分泌水平并无直接关系,而可能与胰岛素降解酶的表达水平相关。
- 任汝静王刚潘静杨红旗陆国强陈生弟
- 关键词：烟碱淀粉样Β蛋白淀粉样
- LRRK2与帕金森病被引量：6
- 2007年
- LRRK2基因是家族遗传性帕金森病8型(PARK8)的致病基因。其编码蛋白LRRK2具有蛋白激酶活性,GTP酶活性,并作为支架蛋白参与蛋白质相互作用。现发现20余个LRRK2基因突变与家族性及散发性帕金森病相关,突变携带者具有典型帕金森病临床表现。突变的LRRK2蛋白致帕金森病机制仍不十分明确,可能与蛋白激酶介导的细胞毒性,细胞凋亡,线粒体功能障碍,氧化应激及泛素蛋白酶体系统异常相关。LRRK2及其突变蛋白的功能确立具有潜在的临床治疗前景。
- 张婷曹立陈生弟
- 关键词：帕金森病突变蛋白激酶
- 内质网应激在UCH-L1抑制剂诱导细胞凋亡中的作用被引量：3
- 2008年
- 目的探讨内质网应激(ERS)在泛素羧基末端水解酶-1(UCH-L1)抑制剂导致的细胞损伤过程中的作用。方法采用50μmol/L的UCH-L1抑制剂处理人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞。于处理前(对照组)和处理后不同时间点(2、4、6、12、24h),分别采用MTT比色法和Western blotting法检测细胞活力和ERS相关蛋白Bip/Grp78、Xbp-1、p-eIF2α及其促凋亡转录因子CHOP/Gadd153的表达。结果MTT比色法检测发现,50μmol/LUCH-L1抑制剂处理后4h,SK-N-SH细胞活力下降43.1%(P<0.05),且随处理时间的延长继续呈现显著下降趋势(P<0.01)。Western blotting检测显示,经50μmol/LUCH-L1抑制剂处理后,SK-N-SH细胞ERS相关蛋白Bip/Grp78、p-eIF2α和Xbp-1表达分别于处理后2、4、6h时显著增加;转录因子CHOP/Gadd153表达则在处理后2h和4h时略有增加,6h后达到高峰。结论在UCH-L1抑制剂诱导的细胞凋亡过程中,ERS是导致细胞损伤的路径之一。
- 谭玉燕王志全周海燕丁健青陈生弟
- 关键词：内质网应激凋亡
- 人类脑脊液的蛋白质组学研究被引量：6
- 2008年
- 脑脊液成分的改变可精确地反映疾病的病理过程。蛋白质组学研究方法的出现为分析脑脊液的蛋白质组成提供了一个很好的平台。文章综述了用于脑脊液蛋白质组学分析的方法,以及利用这些方法对脑脊液蛋白质组成进行研究的进展,包括脑脊液样本的准备、二维凝胶电泳、质谱分析技术、蛋白质组学的生物信息学、脑脊液的比较蛋白质组学、脑脊液的功能蛋白质组学等。
- 洪桢陈生弟
- 关键词：蛋白质组学脑脊液二维凝胶电泳质谱
