浙江省科技厅项目(2009c33089) 作品数:2 被引量:3 H指数:1 相关作者: 李敏 应国清 易喻 沈泓 梅建凤 更多>> 相关机构: 杭州博林生物技术有限公司 浙江工业大学 更多>> 发文基金: 浙江省科技厅项目 更多>> 相关领域: 生物学 更多>>
应用蛋白A亲和层析法纯化hCG单克隆抗体 目的建立从小鼠腹水中纯化人绒毛膜促性腺激素(hCG)单克隆抗体的一步层析法。方法将hCG单克隆抗体的腹水经离心、过滤预处理后,采用HiTraprProteinAFF亲和层析柱纯化,并探讨了上样缓冲液的pH值和离子强度、洗... 沈泓 易喻 梅建凤 朱克寅 李敏 应国清关键词:单克隆抗体 人绒毛膜促性腺激素 纯化 文献传递 应用蛋白A亲和层析法纯化hCG单克隆抗体 目的建立从小鼠腹水中纯化人绒毛膜促性腺激素(hCG)单克隆抗体的一步层析法。方法将hCG单克隆抗体的腹水经离心、过滤预处理后,采用HiTraprProteinAFF亲和层析柱纯化,并探讨了上样缓冲液的pH值和离子强度、洗... 沈泓 易喻 梅建凤 朱克寅 李敏 应国清关键词:单克隆抗体 人绒毛膜促性腺激素 纯化 文献传递 人绒促性素单克隆抗体的制备与分离纯化 被引量:2 2010年 目的制备人绒促性素(hCG)单克隆抗体。方法hCG抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0按5∶1融合,间接ELISA法筛选阳性孔,有限稀释法进行克隆化培养;制备腹水抗体;间接ELISA法测定抗体效价;采用HiTrap rProtein A FF亲和色谱柱纯化抗体。结果得到2株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,细胞培养上清中抗体效价达10-3以上,腹水抗体效价达10-7以上,纯化后的单抗纯度达98%以上,回收率达75%。结论成功获得两株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞,可用于早孕、肿瘤等诊断的研究。 沈泓 易喻 梅建凤 朱克寅 李敏 应国清关键词:单克隆抗体 杂交瘤细胞 hCG单克隆抗体的蛋白A亲和色谱纯化 被引量:1 2010年 建立了亲和色谱法从小鼠腹水中纯化人绒毛膜促性腺激素(hCG)单克隆抗体。将含hCG单克隆抗体的小鼠腹水经离心、过滤预处理后,采用蛋白A亲和色谱柱纯化,考察了上样缓冲液的pH和离子强度、洗脱液的pH和流速对抗体纯度及回收率的影响。用间接ELISA法测定纯化后单克隆抗体生物学活性。结果显示,以20mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0,含3mol/L氯化钠)为上样缓冲液,0.1mol/L枸橼酸钠缓冲液(pH3.0)为洗脱液,流速为5ml/min时,hCG单抗的纯度大于98%,回收率为75%。纯化后的单抗效价没有下降。 易喻 沈泓 朱克寅 李敏 应国清关键词:单克隆抗体 人绒毛膜促性腺激素 纯化