福建省自然科学基金(2006J0092)
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- mdr1 shRNA逆转膀胱癌耐药细胞株BIU-87/ADM对ADM的耐药性被引量：3
- 2013年
- 目的构建抑制mdr1基因表达的短发卡状RNA(shRNA)真核表达载体,研究shRNA逆转膀胱肿瘤细胞多药耐药的可行性。方法针对mdr1基因已知mRNA序列不同位点,选择2个靶序列,构建靶向mdr1shRNA真核表达载体,通过脂质体介导转染膀胱肿瘤耐药细胞株BIU-87/ADM,利用RT-PCR和免疫细胞化学检测mdr1mRNA及P糖蛋白(P-gp)表达水平的变化,MTT法检测BIU-87/ADM细胞对ADM的敏感性。结果构建的2种重组质粒pshRNA-A、pshRNA-B均明显抑制BIU-87/ADM细胞株mdr1基因表达(P<0.05),免疫细胞化学检测显示P-gp表达明显下调(P<0.05),MMT法检测显示膀胱癌耐药株BIU-87/ADM对化疗药物ADM的敏感性明显增强,对ADM药物敏感性的相对逆转效率分别为52.02%和54.87%(P<0.05)。结论shRNA可有效抑制BIU-87/ADM细胞mdr1mRNA的转录和P-gp蛋白的表达,恢复BIU-87/ADM细胞对ADM的敏感性,给逆转膀胱肿瘤的多药耐药提供了一种新的方法。
- 林劲权周辉良蔡卫平
- 关键词：MDR1基因P-糖蛋白SHRNA
- MDR1 shRNA表达质粒的构建被引量：1
- 2009年
- 目的构建由pSIREN-RetroQ-ZsGreeen载体介导、表达MDR1短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)的重组质粒。方法分别针对MDR1基因的两个不同位点,按BamHI+Sense+Loop+Antisense+终止信号+EcoRI结构合成编码shRNA的DNA序列及其反义序列,退火连接及磷酸化形成双链后,将其依次导入pSIREN-RetroQ-ZsGreeen载体,构建成能产生MDR1shRNA的质粒,并进行序列分析。结果重组质粒(pSIREN-RetroQ-ZsGreeen-A和pSIREN-RetroQ-ZsGreeen-B)经酶切与测序证实两段寡核苷酸片段成功插入到预计位点,序列完全一致,无任何碱基突变。结论MDR1shRNA的表达载体pSIREN-RetroQ-ZsGreeen-A和pSIREN-Ret-roQ-ZsGreeen-B成功构建,为进一步研究肿瘤多药耐药逆转奠定了实验基础。
- 周辉良蔡卫平林劲权
- 关键词：MDR1基因短发卡RNA质粒
- 沙利霉素对膀胱癌耐药细胞株BIU-87／ADM细胞周期及凋亡的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨沙利霉素对膀胱癌耐药细胞株BIU-87／ADM细胞周期及凋亡的影响。方法采用CCK-8法检测具有浓度梯度（0．2、1、5μM）的沙利霉素、DMSO组、对照组处理24、48、72h后的各组抑制情况；流式细胞仪检测处理24h后的细胞周期时相分布及凋亡率。结果CCK-8法检测结果显示沙利霉素药物浓度越高、作用时间越长，癌细胞的增殖活性越低；流式细胞仪检测显示：药物浓度越高，G0／G1期细胞也明显增多，凋亡率也明显升高。结论沙利霉素可抑制人膀胱癌耐药细胞的增殖，使细胞增长阻滞在G0／G1期并诱导细胞凋亡。
- 李斌周辉良王可举郑勇军
- 关键词：膀胱癌细胞周期凋亡
