公共文化服务平台

共 4 条记录，以下是 1-4

全选清除导出

排序方式：

口蹄疫病毒全衣壳前体(P1)重组T4噬菌体的构建和鉴定: 2007年; 以含完整的口蹄疫病毒全衣壳前体基因(P1)的质粒pP1-T为模板进行PCR扩增获得P1基因片段(约2 200bp),构建整合质粒pR-P1经引物对Pr.78/P1-A2进行PCR扩增筛选插入方向正确的重组质粒,EcoRⅠ酶切和T7启动子测序正确。以pR-P1质粒转化E.coliE2,感染噬菌体φT4-Z1进行同源重组,经溶菌酶依赖性筛选获得整合成功的噬菌体φT4-P1。SDS-PAGE检测重组噬菌体出现约98 000预计大小的条带;Western bloting检测表明,重组噬菌体φT4-P1与口蹄疫阳性血清可发生免疫反应。; 田纯见毕英佐曹永长; 关键词：口蹄疫病毒 T4噬菌体

3株O型FMDV VP1基因的克隆与序列分析被引量：1: 2008年; 以3株国内分离的O型口蹄疫病毒（FMDV）（分别命名F1、F2、F3）为研究目标,根据GenBank中注册的FMDV VP1基因的序列设计2对引物,采用RT-PCR方法成功地扩增出含有VP1全基因的cD-NA片段,将3个cDNA片段分别克隆到pMD20-T Vector载体中进行序列测定,得到3个毒株VP1基因的序列。结果表明,3个O型FMDV毒株VP1基因cDNA长度均为639 bp,编码213个氨基酸。3株O型毒株彼此之间的核苷酸序列同源性在92.3%-94.2%之间,推导氨基酸序列同源性在97.2%-98.6%之间。与3个毒株同源性高的主要为香港和台湾的毒株。; 李浩波马静云李大旭王玲玲谢青梅毕英佐; 关键词：口蹄疫病毒 VP1基因

以免疫活性串联片段FB为抗原检测FMDV抗体的间接ELISA方法被引量：1: 2005年; 将口蹄疫病毒免疫串联片段FB克隆至原核表达载体pBAD/TOPO中,得到重组质粒pBAD-FB,将此重组质粒转化到受体菌TOP10中,以不同浓度的阿拉伯醛糖进行诱导,并在不同诱导时间进行采样,经处理后做SDS-PAGE、Western-blotting分析。结果发现以终浓度为0.02g/L的阿拉伯醛糖进行诱导,4h后表达量可达高峰,其大小约为26ku,扫描结果显示,FB融合蛋白的表达量占细菌总蛋白的28.9%,能与抗FMDV抗体发生特异性反应,融合蛋白以包涵体和可溶形式存在。将融合蛋白的可溶性组分用500g/LNi-NTA树脂过柱纯化后作为包被抗原,成功地建立了检测血清中FMD抗体的间接ELISA方法。融合蛋白的最佳包被浓度是40μg/mL;标准阳性血清的最适稀释倍数为1∶160;最佳封闭液为50g/L脱脂奶粉和PBS;最佳封闭时间为1h。用建立的ELISA方法对采集的118份样品进行检测,并与全病毒包被抗原ELISA、间接血凝诊断试剂盒和UBIVP1抗体检测ELISA试验盒的检测结果比较,证明所建立的方法具有良好的特异性、敏感性和可重复性。; 马静云曹永长谢青梅史泉城毕英佐; 关键词：口蹄疫病毒抗体酶联免疫吸附试验

FMDV免疫活性串联片段FB与T4噬菌体SOC基因的融合表达: 2006年; 将FM DV免疫活性串联片段FB的cDNA片段插入表达质粒pSOC的E coRⅠ位点,获得重组质粒pSOC-FB。用pSOC-FB转化E.coli BL 21(DE 3),获得表达FB蛋白的工程菌BL-SOC-FB。在1μg/m l IPTG诱导之下,BL-SOC-FB表达了融合蛋白SOC-FB,其分子量为19 ku。SDS-PAGE检测表明,融合蛋白SOC-FB的最大表达量为细菌总量的24.5%。W estern b lot分析表明,大肠杆菌表达的SOC-FB能与FM DV阳性血清发生特异性反应。; 马静云刘忆云曹永长陈晓春谢青梅毕英佐; 关键词：口蹄疫病毒

全选清除导出

共1页<1>

广东省重大科技专项(2004A20403002)