重庆市医学科研计划项目(042131)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 相关作者：张良锁吴小候高飞罗春丽田代印更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学更多>>
- 发文基金：重庆市医学科研计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ΔNp63 shRNA表达质粒的构建及在膀胱癌中的作用被引量：3
- 2006年
- 目的构建ΔNp63特异性短发夹RNA(shRNA)的表达载体,探讨其在膀胱移行细胞癌(TCCB)细胞中的作用。方法设计、合成ΔNp63特异性的短链寡核苷酸,克隆到Pgenesil-1质粒载体中,构建ΔNp63特异shRNA表达载体,转染TCCB细胞；免疫组化S-P法检测ΔNp63蛋白表达水平,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测ΔNp63 mRNA的表达水平,流式细胞术(FCM)检测细胞周期,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性。结果经PstⅠ和SalⅠ双酶切和测序鉴定,成功构建ΔNp63-shRNA质粒表达载体,并能够成功转染TCCB细胞。转染后可显著抑制细胞中ΔNp63蛋白和mRNA的表达,其中ΔNp63 mRNA的表达抑制率为63．0%；G_0/G_1期细胞显著增加,为(66．38±3．08)%,S期细胞显著减少,为(33．68±2．06)%；细胞增殖活性明显降低。结论运用Pgenesil-1质粒载体构建的ΔNp63-shRNA表达载体可成功转染TCCB细胞,有效抑制ΔNp63蛋白和mRNA表达,并可调控TCCB细胞的细胞周期,抑制其增殖。
- 何云锋吴小候罗春丽田代印张良锁高飞
- 关键词：△NP63SHRNA质粒膀胱肿瘤
