质检公益性行业科研专项项目(2007GYJ018)
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 相关作者：韩雪清林祥梅李超李全芬薛梅更多>>
- 相关机构：中国检验检疫科学研究院南京师范大学更多>>
- 发文基金：质检公益性行业科研专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 牛分支杆菌主要保护性抗原研究进展被引量：2
- 2009年
- 牛结核病是一种人兽共患病,是世界动物卫生组织(OIE)列为必须上报的传染病,主要由牛分支杆菌引起,其蛋白可以诱导动物机体产生相应抗体。这些蛋白可以用来诊断结核病,对新型疫苗的研制也具有重要意义。因此,这些蛋白一直是分子生物学研究领域中的热点。论文就牛分支杆菌主要保护性抗原的特性及其在诊断中的应用进行了综述。
- 林祥梅薛梅韩雪清
- 关键词：牛分支杆菌保护性抗原
- 牛γ-干扰素单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立被引量：3
- 2011年
- 建立牛结核病的γ-干扰素(BovIFN-γ)免疫学检测方法。本研究利用rBovIFN-γ抗原免疫Balb/c小鼠,经5次免疫后,通过淋巴细胞杂交瘤技术及间接ELISA筛选制备抗BovIFN-γ的单克隆抗体,在McAb及多克隆抗体的基础上建立双抗体夹心ELISA,并进一步优化ELISA反应条件。结果表明,获得一株能稳定分泌抗BovIFN-γMcAb的杂交瘤细胞株A12E9,分泌单克隆抗体腹水效价为1∶107,属于IgG1亚类,具有良好的特异性;所建立的双抗体夹心ELISA方法,BovIFN-γ最低检测限为40 ng/mL,与其他蛋白不发生交叉反应,表现出良好的特异性。该方法为建立牛结核病的γ-干扰素诊断方法奠定了基础。
- 李超林祥梅梅琳李全芬韩雪清
- 关键词：单克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 牛分支杆菌MPB70和CFP10-ESAT6基因的表达与检测被引量：1
- 2009年
- 以牛分支杆菌染色体DNA为模板,分别以MPB70、CFP10-ESAT6融合蛋白基因特异性引物进行PCR扩增,获得约600 bp的DNA片段,并将其克隆入PQE30质粒,构建出原核表达载体PQE30-MPB70,PQE30-CFP10-ESAT6。将质粒转化至感受态DH5α中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见相应外源蛋白带。纯化蛋白后作为包被抗原建立ELISA方法,为进一步研究牛结核病诊断方法奠定基础。
- 薛梅林祥梅余多慰李超韩雪清
- 关键词：牛分支杆菌MPB70酶联免疫吸附试验
- 牛干扰素单克隆抗体的制备与初步鉴定被引量：1
- 2010年
- 通过IPTG诱导的大肠埃希菌表达重组牛干扰素-γ融合蛋白(BovIFN-γ),利用GlutathioneSepharose 4 Fast Flow亲和层析柱进行融合蛋白的纯化,纯化后的融合蛋白BovIFN-γ作为抗原免疫Balb/c小鼠,经5次免疫后,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,间接ELISA筛选,有限稀释法克隆亚克隆获得分泌BovIFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并通过ELISA方法对其抗体效价、特异性、亚类及稳定性进行鉴定。获得一株稳定分泌BovIFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株A12E9,细胞培养上清和腹水效价可达1∶3 200和1∶160 000。
- 李超林祥梅余多慰李全芬李桂芬韩雪清
- 关键词：单克隆抗体
