中国博士后科学基金(2013M540076)
- 作品数:1 被引量:2H指数:1
- 相关作者:孙明哲张京声路福平郑宏臣曾文惠更多>>
- 相关机构:天津科技大学中华人民共和国农业部规划设计研究院中国农业大学更多>>
- 发文基金:中国博士后科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程更多>>
- 生物质降解菌系中GH11家族耐热木聚糖酶基因的克隆与鉴定被引量:2
- 2013年
- 以玉米芯粉为基质富集培养牛粪中生物质降解菌系,提取该降解菌系的宏基因组DNA,并以其为模板,通过简并引物PCR扩增出200bp左右的木聚糖酶基因片段,选择与耐热木聚糖酶相似性最高且丰度最高的基因序列,应用mTAIL-PCR扩增得到1 059bp的基因全长序列(xynHAD4),编码352个氨基酸,经序列比对分析,该木聚糖酶(XynHAD4)属于典型的GH11家族木聚糖酶,与来源于Dictyoglomus thermophilum的xylanase229B相似度为93%。将xynHAD4连接于表达载体pET22b(+),在E.coli BL21中成功得到表达,表达产物经纯化后,测定其分子质量约为36kDa,最适作用温度和pH分别为80℃和6.0,该酶在90℃保温1h,残余酶活为72%,pH作用范围较广,在pH4.0保存1h,残余酶活为82%,可见,XynHAD4属于耐热木聚糖酶,并且在酸性条件下可保持较高稳定性,在食品、饲料等领域具有潜在的应用价值。
- 郑宏臣孙明哲裴海生孟令彩曾文惠张京声刘逸寒路福平孙君社
- 关键词:宏基因组耐热木聚糖酶酶学性质