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国家高技术研究发展计划(2008AA022424)

作品数：1 被引量：1H指数：1
相关作者：黄爱龙胡接力赖国旗张文露刘彦辰更多>>
相关机构：重庆医科大学更多>>
发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇乙型
  • 1篇杂交
  • 1篇杂交检测
  • 1篇耐药
  • 1篇类似物
  • 1篇寡核苷酸
  • 1篇寡核苷酸序列...
  • 1篇核苷
  • 1篇核苷(酸)类...
  • 1篇核苷酸
  • 1篇核苷酸序列
  • 1篇核苷酸序列分...
  • 1篇反向杂交
  • 1篇病毒
  • 1篇病毒耐药

机构

  • 1篇重庆医科大学

作者

  • 1篇胡源
  • 1篇刘彦辰
  • 1篇张文露
  • 1篇赖国旗
  • 1篇胡接力
  • 1篇黄爱龙

传媒

  • 1篇中华肝脏病杂...

年份

  • 1篇2011
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
反向杂交检测乙型肝炎病毒耐药突变方法的优化及其初步评估被引量：1
2011年
目的建立一种HBV耐药突变的反向杂交检测方法，并对该方法进行优化和评估。方法针对拉米夫定、阿德福韦酯和恩替卡韦3种药物10个耐药位点的常见耐药突变形式，合成兼顾HBV8种基因型的26条简并探针，并固定于同一张带正电荷的尼龙膜上，与地高辛标记的待测样本聚合酶链反应（PCR）产物进行杂交。为了提高检测灵敏度和特异性，从PeR产物标记地高辛的数目，紫外交联探针的能量强度，以及杂交和严格洗脱4个方面进行优化。为了证实方法的可行性，从检测特异性、灵敏度和临床标本的检测准确性3个方面进行评估。结果当检测体系为引物标记3个地高辛分子，紫外交联的能量强度选择1500×0．1mJ／cm2，杂交温度选择42℃，严格洗脱条件选择44℃，用0．5×SSC和0．1％十二烷基硫酸钠严格洗脱30min时，可获得灵敏、特异的结果。在该检测体系的评估中，当PCR产量在10mg／L以上，可以被检测到，且绝大多数探针特异性较好。临床标本的检测结果与直接测序法的检测结果符合率为93．9％（31／33）。结论该方法可以对HBV拉米夫定、阿德福韦和恩替卡韦耐药突变同时进行检测，是一种简便、快速、灵敏的分析方法，但部分探针的特异性有待进一步提高。对于180／181、202／204这4个位点的探针，由于两两距离较近，同一探针序列包含2个位点的密码子，杂交会相互干扰，通过组合距离较近的2个位点的密码子的各种形式来设计探针，可能有助于取得更好的结果。
刘彦辰黄爱龙胡源胡接力赖国旗张文露
关键词：乙型寡核苷酸序列分析核苷(酸)类似物耐药反向杂交
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