吉林省科技厅基础研究项目(20030550-5)
- 作品数：10 被引量：46H指数：5
- 相关作者：张西臣李建华宫鹏涛张国才杨举更多>>
- 相关机构：吉林大学北京军区疾病预防控制中心河北科技师范学院更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅基础研究项目国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 建立适用于旋毛虫抗肿瘤相关基因筛选的动物模型
- 2007年
- 目的为利用抑制消减杂交(SSH)法筛选旋毛虫抗肿瘤相关基因,建立理想的动物模型获取可靠的实验样本。方法Balb/c小鼠随机分为检测组(Tester)和驱动组(Driver),Tester为经口服感染旋毛虫250条、400条和550条组,Driver为不接种组,在感染后11 d,两组同时在皮下分别接种SP2/0细胞2×106个/只,检测组和驱动组小鼠荷瘤后,于20 d后处死,采集两组肿瘤组织和脾脏组织,用天平称量肿瘤块的重量,游标卡尺测量肿瘤块3个互相垂直直径进行体积比较;为了检测两组小鼠免疫情况,又采用流式细胞术检测体内T淋巴细胞的动态变化,以便评估所需样本的可靠性。结果将肿瘤组织与正常组织分离后,经统计分析比较两组肿瘤块重量和体积大小的差异均极为显著(P<0.01)通过检测T淋巴细胞亚类,FACS共检测1×105个细胞,分别得到脾细胞中CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞的数量,感染组小鼠机体的CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+显著增高,在接种不同剂量的旋毛虫后荷瘤,小鼠脾脏特异的T淋巴细胞亚类:CD3+差异显著(P<0.05);CD4+差异显著(P<0.05);CD8+差异显著(P<0.05);CD4+/CD8+差异显著(P<0.05)。通过以上指标的测定,我们认为所建立的动物模符合SSH的实验要求。结论建立的旋毛虫抗实体瘤动物模型,可用于旋毛虫抗肿瘤差异基因筛选的实验起始材料,为进一步研究旋毛虫抗肿瘤分子机制创造条件。
- 邓柏林张西臣李建华张国才高步先宫鹏涛
- 关键词：旋毛虫抗肿瘤动物BALB/C抑制消减杂交
- 旋毛虫与Sp2/0骨髓瘤细胞相关蛋白基因抗肿瘤效应研究
- ＜正＞为筛选旋毛虫与Sp2/0骨髓瘤细胞相关蛋白基因,观察其抗肿瘤效果,以探讨其抗肿瘤机制,本研究首先构建了旋毛虫cDNA表达文库,用抗Sp2/0骨髓瘤细胞的多克隆抗体对文库进行筛选,获得旋毛虫与Sp2/0骨髓瘤细胞相关...
- 段玲欣李建华宫鹏涛张国才杨举张西臣
- 文献传递
- 旋毛虫抗小鼠体内SP2/0肿瘤作用的研究被引量：15
- 2005年
- 目的观察旋毛虫感染对BAlB/c小鼠体内SP2/0瘤细胞生长的抑制作用。方法用不同剂量、不同方法致弱的旋毛虫感染BALB/c小鼠,在不同时间接种SP2/0细胞,于荷瘤后20 d解剖小鼠,测定小鼠体内肿瘤的体积、重量和无瘤生长小鼠比率,检测T淋巴细胞亚群。结果1)未致弱组、紫外线致弱组和60Co致弱组小鼠肿瘤体积和重量均显著低于对照组(P<0.01),CD4+/CD8+显著高于对照组(P<0.05);无瘤生长小鼠比率显著高于对照组;2)接种750条、500条和250条旋毛虫组肿瘤体积和重量均显著低于对照组(P<0.01),CD4+/CD8+显著高于对照组(P<0.05),无瘤生长小鼠比率显著高于对照组;3)接种3 d1、1 d和21 d后荷瘤组的肿瘤体积和重量均显著低于对照组(P<0.01),CD4+/CD8+显著高于对照组(P<0.05),无瘤生长小鼠比率显著高于对照组。结论未致弱的旋毛虫和经不同方法致弱的旋毛虫对BALB/c小鼠体内的SP2/0骨髓瘤细胞的生长均有抑制作用,接种剂量增加,抑瘤效果越明显,但对实验动物的机体损伤也加重。接种11 d后荷瘤组的抑瘤效果好于接种3 d后荷瘤组和21d后荷瘤组。
- 吴涛张西臣李建华刘全尹继刚杨举
- 关键词：旋毛虫致弱抑瘤效果
- 寄生虫抗肿瘤研究进展被引量：8
- 2008年
- 虽然旋毛虫抗肿瘤的分子机制仍不清楚,但旋毛虫具有抗肿瘤的效应却已被许多实验所证实。小鼠感染旋毛虫后对肿瘤细胞在体内的增殖或对移植进体内的肿瘤生长的抑制作用,其可能的机理是旋毛虫感染机体后激发宿主免疫网络系统促使机体产生多种免疫活性细胞因子,发挥特异性和非特异性抗肿瘤免疫功能;或者是由于寄生虫本身就具有能够分泌排泄一些抗肿瘤活性物质而发挥抗肿瘤效应;或者是由于寄生虫感染诱导肿瘤的基因表达发生变化而产生了抗肿瘤的效应。
- 邓柏林张西臣高步先张国才李建华
- 关键词：旋毛虫抗肿瘤
- 不同旋毛虫粗抗原对BALB/c小鼠体内SP2/0肿瘤抑制作用观察被引量：13
- 2007年
- 目的研究不同旋毛虫抗原对BALB/c小鼠体内的SP2/0骨髓瘤的抑制作用。方法对BALB/c小鼠经腹腔和肌肉注射不同抗原,3d后对小鼠荷瘤,30d后观察小鼠体内肿瘤的大小,检测小鼠机体的免疫状态,评价不同旋毛虫抗原对小鼠体内的肿瘤的抑制作用。结果腹腔注射肌幼虫可溶性粗抗原、成虫可溶性粗抗原和新生幼虫可溶性粗抗原组的抑瘤效果略好于肌肉注射组。肌幼虫ES抗原组的抑瘤效果最好,成虫ES抗原组次之,但比3种虫体抗原组的抑瘤效果好,3种虫体粗抗原组的抑瘤效果间没有明显差别。结论不同的旋毛虫抗原都有一定的抑制肿瘤的作用,腹腔注射肌幼虫ES抗原能够很好的抑制小鼠体内肿瘤的生长。
- 吴涛张西臣李建华张国才杨举宫鹏涛
- 关键词：抑瘤效果
- 纳氏旋毛虫肌幼虫细胞的体外培养及多重PCR鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的研究纳氏旋毛虫（Trichinella nelsoni，T7）肌幼虫细胞的分离和体外培养方法。方法消化法分离纳氏旋毛虫肌幼虫，用研磨法分离其细胞，倒置相差显微镜下观察分离细胞的形态并测量细胞核与细胞直径。用含10％胎牛血清的RPMI1640培养液进行细胞培养，并通过多重PCR对培养的细胞进行鉴定。结果纳氏旋毛虫肌幼虫细胞平均直径为11．72±1．13μm，细胞核平均直径为5．76±0．68μm。细胞在接种于培养液后24～72h开始贴壁生长，培养8～12d后单层细胞形成，贴壁细胞多为发亮、饱满、圆形细胞。对培养14d的细胞进行多重PCR分析，结果与纳氏旋毛虫肌幼虫具有相同的DNA条带。结论纳氏旋毛虫肌幼虫细胞在含10％胎牛血清的RPMI1640培养液中至少可存活20d。
- 李宛青崔晶赵桂花牛洪涛侯小君逯莉张西臣王中全
- 关键词：肌幼虫细胞培养多重PCR
- 旋毛虫抗C57BL/6小鼠体内Hepa1-6肝癌细胞作用的研究被引量：13
- 2009年
- 目的观察旋毛虫对C57BL/6小鼠体内Hepa1-6肝癌细胞生长的抑制作用。方法将C57BL/6小鼠随机分成8组,每组10只。第1和5、2和6、3和7组分别感染未处理旋毛虫、60Co处理和紫外线处理旋毛虫,4和8组为不感染旋毛虫对照组,1～4组和5～8组分别于接种旋毛虫前7 d和接种后11 d接种Hepa1-6肝癌细胞。荷瘤后25 d后处死小鼠,测量肿瘤体积、重量及脾脏CD3+、CD4+、CD8+淋巴细胞数量。结果未处理旋毛虫组、60Co处理组和紫外线处理组小鼠肿瘤体积和重量均显著低于对照组(P<0.05);脾脏CD3+、CD4+百分率和CD4+/CD8+、CD4+/CD3+的比值显著高于对照组(P<0.01或P<0.05)。结论未处理的旋毛虫、经60Co和紫外线处理的旋毛虫对C57BL/6小鼠体的Hepa1-6肝癌细胞的生长均有抑制作用,未处理旋毛虫的抑瘤效果最好。
- 张媛媛宫鹏涛张西臣李建华杨举张国才
- 关键词：旋毛虫C57BL/6小鼠抑瘤效果
- 旋毛虫肌幼虫总RNA提取方法研究初报被引量：2
- 2007年
- 【研究目的】探索高质量的旋毛虫(Trichinella spiralis)肌幼虫总RNA提取方法;【方法】利用Trizol试剂采用三种方法提取旋毛虫肌幼虫总RNA。(1)液氮预冷的研钵中研磨新鲜虫体至样品快融化时,加入适量的Trizol,继续研磨至液状后转移到离心管中;(2)A将新分离的虫体放到-20℃预冷的研钵中,在研磨过程中不断地添加液氮以保持虫体冷冻,之后对冷冻状的样品粉末继续操作;B把液氮冻存的新鲜旋毛虫肌幼虫取出,放到-20℃预冷的研钵中重复A的操作;(3)新鲜虫体放入匀浆器中,加适量Trizol,在冰水混合物中研磨20分钟。虫体破碎后按Trizol说明书继续抽提。最后通过凝胶电泳和紫外吸收光度值检测。【结果】用液氮和Trizol结合的方法,使用新鲜样品提取旋毛虫肌幼虫总RNA,在纯度和得率上都较为理想;【结论】使用新鲜的样品,且液氮与裂解液结合,是获得高质量RNA的可行方法。
- 段玲欣张西臣尹继刚李建华张景芝宫鹏涛
- 关键词：总RNA旋毛虫肌幼虫
- 旋毛虫iRNA对BALB/c小鼠体内SP2/0肿瘤细胞的抑制作用被引量：3
- 2010年
- 目的观察旋毛虫免疫核糖核酸(iRNA)对BALB/c小鼠体内SP2/0肿瘤细胞的抑制作用。方法以不同剂量旋毛虫肌幼虫可溶性抗原免疫ICR小鼠、家兔和山羊,ELISA检测抗体效价达1:1024的最低免疫剂量确定为最佳免疫剂量,同时取各实验动物肝、脾和淋巴结,制备旋毛虫iRNA,并进行鉴定。以不同剂量iRNA接种BALB/c小鼠,并在不同时间接种SP2/0肿瘤细胞(试验分为先荷瘤和后荷瘤进行)。在荷瘤20d时,处死小鼠,测量肿瘤体积和重量,并检测脾脏T淋巴细胞亚群的变化。结果旋毛虫肌幼虫可溶性抗原的最佳免疫剂量分别为:ICR小鼠:300μg/只;家兔:2mg/只;山羊:20mg/只。制备的旋毛虫iRNA各项指标均合格。各试验组小鼠肿瘤体积和重量均小于相应的对照组,且差异均有统计学意义;各试验组小鼠的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比值较相应的对照组均有不同程度的增高。在后荷瘤试验组中,1mg组抑瘤效果最好;在先荷瘤试验组中,4mg组抑瘤效果最好。结论旋毛虫iRNA对BALB/c小鼠体内SP2/0肿瘤细胞的生长具有较强的抑制作用。
- 丁宁李建华宫鹏涛杨举李淑红张西臣张国才
- 关键词：旋毛虫免疫核糖核酸
- 旋毛虫对BALB/c小鼠体内人结肠癌HCT-8细胞的作用被引量：12
- 2008年
- 目的观察旋毛虫感染对BALB/c小鼠体内人结肠癌HCT-8细胞生长的作用。方法用不同剂量的旋毛虫感染BALB/c小鼠,并在不同时间接种HCT-8细胞,荷瘤20 d后解剖小鼠,测定小鼠体内肿瘤的体积、重量,计算抑瘤率,并检测T淋巴细胞亚群。结果各实验组小鼠肿瘤体积和重量均显著低于对照组,CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值、未长瘤小鼠比例、小鼠死亡率和抑瘤率均显著高于对照组;先接虫后荷瘤组抑瘤效果优于先荷瘤后接虫组。结论旋毛虫对BALB/c小鼠体内的人结肠癌HCT-8细胞的生长有一定的抑制作用。
- 李霞张国才张西臣李建华杨举宫鹏涛徐鹏
- 关键词：旋毛虫结肠癌HCT-8细胞
