国家科技支撑计划(2013BAD10B02) 作品数:11 被引量:60 H指数:4 相关作者: 张昊 王恬 李悦 张莉莉 邓烨 更多>> 相关机构: 南京农业大学 华中农业大学 山西农业大学 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 国家自然科学基金 江苏省农业三新工程项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
微生态制剂替代抗生素对猪健康生产的影响 被引量:4 2013年 微生态制剂是一种新型无污染、无残留、无毒副作用的饲料添加剂,在调节动物肠道菌群平衡、提高饲料转化效率、增强机体免疫力等诸多方面具有抗生素所无法替代的优势,在现代养猪业中发挥着越来越重要的作用。本文回顾了微生态制剂的概念、分类情况及作用机制,结合试验结果剖析了微生态制剂在推进生猪健康养殖中的作用。 魏清甜 邓烨 黄丽 蔡文炳 李平华 黄瑞华关键词:微生态制剂 抗生素 养猪业 解淀粉芽孢杆菌ES-2对肉鸡屠宰性能和肉品质及肌肉抗氧化能力的影响 被引量:12 2016年 [目的]研究日粮中添加解淀粉芽孢杆菌ES-2(BAP)对肉鸡屠宰性能、肉品质及肌肉抗氧化能力的影响。[方法]选用1日龄AA(Arbor Acres)肉鸡600只,随机分成5组:对照组、抗生素组、试验Ⅰ、试验Ⅱ和试验Ⅲ组。对照组饲喂基础日粮;抗生素组添加45 mg·kg^(-1)金霉素;试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别添加200、500和1 000 mg·kg^(-1)的BAP,每组6个重复,试验期42 d。[结果]与对照组相比,500和1 000 mg·kg^(-1)的BAP可显著提高肉鸡胸肌率,且500 mg·kg^(-1)的BAP可显著降低腹脂率(P<0.05)。BAP主要影响胸肌的肉品质,500和1 000 mg·kg^(-1)剂量组宰后24 h胸肌的p H值较对照组显著提高(P<0.05);日粮中添加抗生素及500 mg·kg^(-1)的BAP均能显著降低胸肌压力损失(P<0.05)。500和1 000 mg·kg^(-1)剂量组及抗生素组胸肌总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性较对照组显著提高(P<0.05)。另外,日粮中添加500和1 000 mg·kg^(-1)的BAP可显著提高胸肌总抗氧化能力(T-AOC)水平,其中500 mg·kg^(-1)剂量组胸肌T-AOC水平要显著高于200 mg·kg^(-1)剂量组;500mg·kg^(-1)剂量组及抗生素组肉鸡腿肌T-AOC水平较对照组显著提高(P<0.05)。[结论]日粮中添加500和1 000 mg·kg^(-1)的解淀粉芽孢杆菌ES-2均可在一定程度提高肉鸡屠宰性能,增强胸肌宰后24 h的p H值,提高肌肉T-AOC水平和T-SOD活力,增强宰后肌肉的抗氧化能力,且以添加500 mg·kg^(-1)的解淀粉芽孢杆菌ES-2剂量效果较好。解淀粉芽孢杆菌ES-2替代抗生素在肉鸡饲粮中应用具有可行性。 杨敏馨 寇涛 李悦 张昊 金顺顺 苏越 张莉莉 王恬关键词:肉鸡 屠宰性能 肉品质 抗氧化能力 3株罗伊氏乳杆菌生物学特性的分析比较 被引量:12 2016年 【目的】对3株罗伊氏乳杆菌的生物学特性进行分析比较,为后期生产应用提供一定的参考。【方法】对实验室保藏的3株罗伊氏乳杆菌的生长曲线、pH曲线、耐受人工胃液能力、耐受猪胆盐能力、黏附能力、抑菌能力和对抗生素的耐药性等特性进行了分析比较。【结果】3株菌生长趋势大致相同;3株菌对人工胃液均具有良好的耐受性,且可以有效地抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长;菌株L0和L2对高胆盐的环境耐受性较差,菌株L1则对高胆盐环境具有极强的耐受性;菌株L1和L2具有很强的黏附能力;3株菌对20种抗生素表现出不同的耐受性。【结论】菌株L1的生物学特性明显优于其他两株菌株,有利于后期的生产应用。 李文静 梁运祥 赵述淼关键词:罗伊氏乳杆菌 耐受性 抑菌 LPS诱导的免疫应激对肉鸡组织内参基因稳定性的影响 被引量:4 2015年 脂多糖(LPS)诱导的免疫应激下,选择适于校正肉鸡肝脏、心脏和回肠组织中目的基因表达量的内参基因。将30只1日龄的肉鸡随机分为对照组与处理组,21日龄时,处理组注射1 mg/kg的LPS,对照组注射等量灭菌生理盐水,2 h后,每组各取7只肉鸡的肝脏、心脏和回肠组织。通过实时荧光定量PCR技术(RT-q PCR)对各组织中β-肌动蛋白(ACTB)、β2-微球蛋白(B2M)、18 S核糖体RNA(18 S r RNA)、28 S核糖体RNA(28 S r RNA)和3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)共5个内参基因的表达定量,利用Ref Finder和Ge Norm软件分析内参基因的稳定性及配对差异。结果显示:LPS刺激下,5个内参基因的表达水平有不同程度的变化。18 S r RNA、ACTB和GAPDH适于肝脏中目的基因表达量的校正;B2M和GAPDH适于心脏中目的基因表达量的校正;18 S r RNA和ACTB适于回肠中目的基因表达量的校正。选择表达稳定性高的内参基因适于校正目的基因的表达量,RT-q PCR应根据不同的研究对象进行选择,建议选择2个或2个以上的内参基因。 冯焱 李建芳 张芬鹊 穆广袤关键词:肉鸡 LPS 内参基因 淀粉液化芽孢杆菌对脂多糖刺激肉鸡生长性能、肠道形态及免疫功能的影响 被引量:5 2016年 [目的]本试验通过测定肉鸡生长性能、肠道形态及免疫功能,研究日粮中添加淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens,BA)对大肠杆菌脂多糖(LPS)诱导肉鸡免疫应激的缓解作用。[方法]选用192只1日龄AA雄性肉鸡,采用2×2因子试验设计,主因素为免疫刺激因素(注射生理盐水或LPS溶液)和日粮因素(饲喂基础日粮或添加0.2%BA的试验日粮),每组6个重复,每重复8只,试验期为21 d。分别在16、18和20日龄给LPS组腹腔注射500μg·kg^(-1)的LPS溶液,对照组注射等体积的生理盐水。[结果]LPS刺激导致肉鸡1~21 d平均日增体质量和平均日采食量显著降低(P<0.05),血浆髓过氧化物酶(MPO)活性和白介素1β(IL^(-1)β)含量显著升高,空肠和回肠绒毛高度以及绒毛高度与隐窝深度比值显著降低,隐窝深度显著增加,空肠黏膜TLR4、IL^(-1)β、IL^(-1)0以及回肠黏膜IL^(-1)β、IL-6 mRNA表达水平显著升高(P<0.05)。日粮添加BA显著降低血浆髓过氧化物酶活性,显著降低空肠黏膜TLR4、IL^(-1)βmRNA表达水平,显著提高回肠黏膜IL^(-1)0 mRNA表达水平(P<0.05)。日粮添加BA有效阻止LPS造成的平均日增体质量降低、饲料转化率升高以及回肠隐窝深度增加,并降低了LPS导致的血浆MPO活性和回肠黏膜TLR4 mRNA表达水平升高。[结论]日粮添加BA可缓解LPS对肉鸡生长性能造成的不良影响与LPS刺激引起的炎性反应及肠道损伤,并改善肠道黏膜免疫状态。 李悦 张昊 杨敏馨 张莉莉 陆兆新 王恬关键词:免疫应激 肠道 肉鸡 淀粉液化芽孢杆菌对环磷酰胺刺激肉鸡生长性能与消化功能的影响 在高度集约化的养殖过程中,家禽面临诸多免疫应激。其中免疫抑制疾病,如马立克氏病、传染性法氏囊病及传染性贫血症等,由于症状不明显,常常被我们所忽视。免疫抑制会降低家禽免疫与消化功能,继而造成二次感染并降低其生长性能。研究发... 李悦 张昊 杨敏馨 张莉莉 王恬关键词:环磷酰胺 肉鸡 文献传递 Real-timePCR分析免疫应激对肉鸡各肠段微生物区系的影响 被引量:2 2013年 【目的】应用细菌的16S rRNA序列设计双歧杆菌属(Bifidobacterium)、乳杆菌属(Lactobacillus)、肠杆菌科(Enterobacteriaceae)和肠球菌属(Enterococcus)的引物并对肉鸡肠道的这4类细菌菌属进行定量测定,检测免疫应激对肉鸡不同肠段微生物区系的影响。【方法】将180只AA肉公鸡随机分4个处理,每处理设5个重复,每个重复有9只。试验分为NV、CV、LPS和CYP处理组。免疫应激组分别于18、19、20、32、33和34 d肌肉注射相应剂量的LPS和CYP,NV组和CV组于同日龄注射等体积生理盐水。分别于21、28、35和42 d,每处理组各取6只鸡,无菌操作,宰杀后取十二指肠、空肠、回肠和盲肠内容物。将待测样品中提取的DNA分别进行4类菌属进行Real-time PCR反应。【结果】与NV相比,4类细菌的基因拷贝数发生显著变化。集中在回肠和盲肠,肠杆菌属:5.03—7.88 copies/mg;乳酸杆菌属:5.48—10.34 copies/mg;双歧杆菌属:4.11—7.98 copies/mg;肠球菌属:5.61—8.79 copies/mg。双歧杆菌属含量为4种菌属中细菌含量最低,乳酸杆菌含量高,盲肠含菌最多,十二指肠含量最少,后期各菌群趋于稳定。【结论】免疫应激可引起肠道菌群失调,乳杆菌属和双歧杆菌属的数量在无免疫情况下的含量相对高,LPS和CYP对肉鸡后期的肠道菌群的无显著影响。 冯焱 杨小军 李武林 杨宁 姚军虎关键词:微生物区系 免疫应激 肉鸡 特异性结合革兰氏阴性菌外膜蛋白C的单链抗体核糖体展示文库的构建 2015年 以纯化的重组大肠杆菌外膜蛋白Omp C免疫BALB/c小鼠,提取骨髓浆细胞总RNA,逆转录获得c DNA,作为模板通过PCR扩增获得重链和轻链可变区序列。由(Gly4Ser)3 linker连接两片段,获得单链抗体可变区片段基因库。重叠延伸PCR添加T7启动子、核糖体结合位点、gⅢtether和两端茎环结构等元件,成功构建对外膜蛋白C具有特异性亲和力的单链抗体可变区的核糖体展示文库,为特异性强、亲和力高的单链抗体可变区筛选提供了技术和材料基础。构建能与革兰氏阴性菌外膜蛋白C特异性结合的鼠源单链抗体核糖体展示文库,是奠定构建饲料革兰氏阴性腐败菌分子预警和靶向抗菌剂的靶向定位区的高亲和力单链抗体可变区片段的重要基础,对建立有害革兰氏阴性菌分子检测方法和靶向抗革兰氏阴性菌菌剂设计方法具有借鉴作用。 王潇 王秀敏 管庆丰 滕达 姚军虎 王建华关键词:核糖体展示 重组毕赤酵母(Pichia pastoris)高产Lunasin的发酵工艺优化 被引量:3 2016年 Lunasin是一个最初从大豆中分离,具有43个氨基酸的多肽,具有抗高血压,抗氧化活性,预防癌症,抗炎和降胆固醇的活性。为了实现Lunasin的高效生产,对重组毕赤酵母GS115 LN诱导阶段甲醇补料策略(溶氧反馈补料,指数-恒速补料)以及诱导温度进行了优化,并且在此基础上对双碳源(山梨醇、甘露醇)和甲醇混合补料策略以及复合氮源与甲醇混合补料策略进行了优化。研究表明,最优补料策略以及诱导温度分别为指数-恒速补料、24℃,最终在流加1%大豆蛋白胨以及0.02%天冬氨酸条件下,Lunasin表达量最高,达到3.27 g/L,是单一甲醇诱导的1.27倍。 康国凯 冯国栋 曹坤琳 陈正军 葛向阳关键词:重组毕赤酵母 高密度发酵 微生态制剂替代抗生素对猪健康生产的影响(续完) 被引量:2 2013年 上期回顾:上期本文介绍了微生态制剂的概念及分类,强调了微生态制剂的作用机理包括:维持肠道菌群微生态平衡、生物夺氧作用、竞争性抑制作用、生物拮抗作用、增强机体免疫力、合成酶和营养物质等六大方面。 魏清甜 邓烨 黄丽 蔡文炳 李平华 黄瑞华关键词:微生态制剂 抗生素 微生态平衡 机体免疫力 肠道菌群