辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(L2012306) 作品数:5 被引量:11 H指数:2 相关作者: 唐峰 唐雨顺 刘永华 李冰 刘秀萍 更多>> 相关机构: 辽宁医学院 吉林大学 更多>> 发文基金: 辽宁省科技厅自然科学基金 辽宁省教育厅高等学校科学研究项目 辽宁省科学技术计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
鼠抗镉单抗重链及轻链可变区基因克隆与分析 2015年 为获得鼠抗镉单抗的重链及轻链可变区,提取AG6细胞株的总RNA,利用RT-PCR技术获得c DNA,设计重链(VH)及轻链(VL)可变区基因合并引物,通过PCR扩增基因,对扩增产物进行测序,根据基因测序结果进行分析。结果显示,VH、VL基因分别为345 bp、306 bp,经IMGT分析,其结构具备鼠抗体可变区基因的特征。 赵祎云 马宇驰 阚银玲 李贺 李哲 唐峰关键词:镉 单克隆抗体 牛种布鲁菌VirB12蛋白的原核表达及纯化 被引量:1 2013年 目的原核表达并纯化牛种布鲁菌(Brucella)VirB12蛋白。方法利用PCR法从牛种布鲁菌基因组中扩增VirB12基因,插入pET-30a(+)载体,构建重组表达质粒pETV12,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经组氨酸结合树脂柱纯化后,进行SDS-PAGE及Western blot分析。结果重组表达质粒pETV12经双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约22 000,纯化的重组蛋白纯度达94%,可被布鲁菌免疫兔血清特异性识别。结论原核表达并纯化了牛种布鲁菌VirB12蛋白,为进一步研究VirB12蛋白的结构、功能及相关疫苗的研制奠定了基础。 唐峰 闫广谋 唐雨顺 刘永华 李冰关键词:布鲁菌 原核细胞 基因表达 土壤中产广谱抗菌肽菌株的筛选及鉴定 被引量:2 2015年 用双层平板法从土壤中分离到4株具有广谱抑菌活性的菌株,利用琼脂扩散法测定其对鼠伤寒沙门菌、大肠杆菌、福氏志贺菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉菌的抑菌能力,筛选其中抑菌能力最强的菌株命名为JZ4。菌液上清分别经过盐析、透析或与蛋白酶作用后测定其抑菌能力,发现该抑菌物质中含有肽类物质。经16S r DNA序列比对,初步鉴定其为侧孢短芽孢杆菌。 唐峰 李哲 王铁良 唐雨顺 刘永华 寇叙 刘秀萍关键词:土壤 抗菌肽 抑菌 侧孢短芽孢杆菌 鸡源嗜酸乳杆菌对蛋雏鸡生长性能、肠道微生物菌群及吸收功能的影响 被引量:6 2013年 试验旨在研究鸡源嗜酸乳杆菌对蛋雏鸡生长性能和肠道微生物菌群的影响。选用1日龄海蓝褐蛋用雏鸡120只,随机分成2组,每组3个重复,每个重复20只鸡。对照组饲喂普通商品化的雏鸡颗粒料,试验组日粮是在对照组日粮中均匀混合添加1%嗜酸乳杆菌冻干粉,试验周期40 d。分别于试验第10、20、30、40天测定各组的日增重和饲料增重比,从每组中随机取8只测定回肠内容物中乳酸杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌的数量以及回肠中钠-葡萄糖共转运载体1(SGLT1)、葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)和小肽转运蛋白1(PepT1)mRNA的水平。结果表明:基础日粮中添加嗜酸乳杆菌冻干粉后,对雏鸡具有促进生长的作用;可提高雏鸡肠道乳酸杆菌和双歧杆菌的数量,减少大肠杆菌和沙门氏菌在肠道内的定植和增殖,可提高SGLT1和PepT1 mRNA转录水平,进而提高对葡萄糖和小肽的吸收。 唐峰 王建发 刘秀萍 唐雨顺 刘永华 寇叙 曲祖乙 李冰关键词:嗜酸乳杆菌 肠道菌群 雏鸡 致病性大肠杆菌噬菌体分离及裂解特性分析 被引量:2 2014年 以鸡源致病性大肠杆菌O18为宿主菌,采用双层琼脂平板法从鸡场粪样中分离出1株噬菌体,命名为Bp-YK2。采用经纯化的噬菌体对24株鸡源致病性大肠杆菌进行裂解试验,并利用PCR技术对衣壳基因gene23进行扩增。结果显示,该噬菌体效价为1.55×1010pfu/mL,宽噬率为41.67%;噬菌体衣壳基因gene23与噬菌体Bp7同源性最高,同源性为97%,推测该噬菌体为肠杆菌T4噬菌体。本研究为开发治疗耐药大肠杆菌的噬菌体制剂奠定基础。 李冰 唐峰 刘孝刚关键词:大肠杆菌 噬菌体