广西青年科学基金(0991068)
- 作品数:3 被引量:15H指数:2
- 相关作者:梁方方何仁春廖玉英黄丽霞赖志强更多>>
- 相关机构:华南农业大学广西壮族自治区畜牧研究所更多>>
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- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 木聚糖酶产生菌的筛选鉴定及木聚糖酶基因(Xyn B)的克隆被引量:3
- 2011年
- 采用富集培养、透明圈平板筛选的方法,从长期堆放青贮饲料的土壤中分离到7株木聚糖酶产生菌。选取透明圈最大的木聚糖酶产生菌X7作为基础菌,对其进行16S rRNA部分序列PCR扩增测定,经BLAST同源性分析确定X7为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis strain GD3b(Genebank编码:HM055602.1)。然后设计特异引物,以X7基因组为模板,对其进行Xyn B基因序列PCR扩增,扩增产物经BLAST同源性分析表明已成功克隆了X7菌株的Xyn B基因,为日后构建木聚糖酶基因酵母表达载体,培育能够分泌表达具有高活性的木聚糖酶酵母工程菌奠定了基础。
- 莫毅梁方方赖志强卢玉发廖玉英何仁春黄丽霞杨琳
- 关键词:木聚糖酶菌株筛选RRNA基因克隆
- 木聚糖酶产生菌的筛选鉴定及酶学性质研究被引量:12
- 2011年
- 采用富集培养和透明圈平板筛选的方法,从长期堆放青贮饲料的土壤中分离到7株木聚糖酶产生菌。选取透明圈最大的木聚糖酶产生菌X7作为基础菌,对其进行16S rRNA部分序列PCR扩增测定,经基因序列比对(BLAST)同源性分析确定X7为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis strain GD3b,Genebank编码:HM055602.1)。然后将X7进行发酵产酶并对其酶学性质进行初步研究,结果表明:在温度37℃、摇床转速200 r/min和发酵2-3 d所产的木聚糖酶酶活可达13.47 U/mL;其相应粗酶液酶促反应的最适pH为6,酶促反应的最适温度为55℃。
- 梁方方莫毅杨琳蔡小艳赖志强卢玉发廖玉英何仁春黄丽霞
- 关键词:木聚糖酶菌株筛选发酵酶学性质
- 枯草芽孢杆菌木聚糖酶Xyn B在毕赤酵母中的表达
- 2012年
- 编码枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis strain GD3b)木聚糖酶(Xylanse B,Xyn B)基因从重组载体pUC-XynB中切割,并克隆到pPICZa A载体中,经酶切和测序鉴定,成功构建了分泌型毕赤酵母表达载体pPICZa-Xyn B。载体经线性化后转入毕赤酵母X-33,并筛选获得可通过甲醇诱导分泌表达Xyn B重组蛋白的毕赤酵母工程菌X-33/Xyn B。
- 莫毅梁方方赖志强卢玉发廖玉英何仁春黄丽霞杨琳
- 关键词:木聚糖酶毕赤酵母重组蛋白