温州市科技计划项目(Y2006A033)
- 作品数：3 被引量：17H指数：3
- 相关作者：郑晓群彭颖黄燕燕华科吕建新更多>>
- 相关机构：温州医学院附属第二医院温州医学院更多>>
- 发文基金：温州市科技计划项目浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 浙江温州地区腹泻患儿腺病毒的检测及分型被引量：7
- 2009年
- 目的:了解浙江温州地区婴幼儿腹泻患者不同型别腺病毒的感染情况。方法:根据Gene Bank中腺病毒六邻体基因序列设计一对通用引物,建立PCR方法检测婴幼儿腹泻标本中腺病毒DNA,并对阳性标本进行PCR产物测序分析。结果:建立了快速、特异地检测婴幼儿腹泻标本中腺病毒DNA的PCR技术;127份婴幼儿腹泻标本中腺病毒DNA阳性4份,阳性率为3.15%(4/127);经PCR产物直接测序分析,3份为Ad3型,阳性率为2.36%(3/127),1份为Ad7型,阳性率为0.79%(1/127)。结论:PCR技术结合PCR产物直接测序的方法,使分析具有敏感、特异等优点,适用于腹泻标本中腺病毒的检测及分型;引起浙江温州地区婴幼儿腹泻的腺病毒主要为Ad3型和Ad7型。
- 黄燕燕郑晓群彭颖华科陈新宇
- 关键词：腺病毒腹泻PCR
- 细胞培养结合实时荧光RT-PCR法快速检测7型腺病毒感染被引量：5
- 2008年
- 目的建立一种细胞培养与实时荧光RT-PCR相结合的检测7型腺病毒(ADV7)感染的技术。方法A549细胞分离培养鼻咽分泌物中的腺病毒纯化后,以感染复数(MOI)为0.1、0.5、5.0和10.0的纯化病毒感染A549细胞,分别在感染后3、6、12和24h提取总RNA进行ADV7E1A基因的实时荧光RT-PCR检测并测序验证;最后用该法直接检测鼻咽分泌物标本中的7型腺病毒。结果实时荧光RT-PCR最快可在感染后3h检测出0.5MOI病毒感染的早期转录物;感染后6h可检测出0.1MOI病毒感染的早期转录物;鼻咽分泌物标本直接感染后6h即可检测到病毒的早期转录物。结论细胞培养结合实时荧光RT-PCR法能快速、灵敏、特异地检测出感染性的7型腺病毒,具有一定的推广应用价值。
- 尚定昆申宝玲郑晓群彭颖林新新
- 关键词：腺病毒细胞培养RT-PCR
- 应用实时荧光聚合酶链反应检测婴幼儿腹泻标本中的腺病毒被引量：7
- 2009年
- 目的建立实时荧光聚合酶链反应（Real-time PCR）方法检测腺病毒，并分析浙江省温州地区散发性婴幼儿腹泻患者不同型别腺病毒的感染情况。方法根据GenBank中腺病毒六邻体基因序列设计一对通用引物，建立Real-time PCR方法检测婴幼儿腹泻标本中腺病毒DNA，并与免疫层析法比较；同时对Real-time PCR方法检测阳性的标本进行PCR产物测序和病毒分离培养及酶切鉴定。结果建立快速、特异检测婴幼儿腹泻标本中腺病毒DNA的Real-time PCR技术。157份婴幼儿腹泻标本中免疫层析法检测阳性3份，阳性率为1．91％；Real-time PCR检测阳性5份，阳性率为3．18％（5／157）；154份免疫层析法检测阴性标本中，有2份Real-time PCR法检测为阳性。5份Real-time PCR检测阳性标本经测序鉴定，Ad3型占1．91％（3／157），Ad7型占1．27％（2／157）；经病毒分离培养检出阳性2例，酶切鉴定为Ad3型。结论Real-time PCR技术结合PCR产物直接测序分析具有敏感、特异等优点，适用于腹泻标本中腺病毒的检测及分型。2008年2—4月浙江省温州地区散发性婴幼儿腹泻的腺病毒主要为Ad3型和Ad7型。
- 郑晓群黄燕燕彭颖华科吕建新
- 关键词：腺病毒腹泻
