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衢州市科技计划项目(20061128)
作品数:
2
被引量:1
H指数:1
相关作者:
汤巧
卢春
张玲
姚水洪
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相关机构:
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汤巧
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2008
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卡波济肉瘤相关疱疹病毒包膜糖蛋白gpK8.1的抗原性与免疫原性分析
被引量:1
2007年
目的表达并纯化卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)包膜糖蛋白gpK8.1,分析其抗原性和免疫原性。方法异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导重组大肠杆菌表达KSHV gpK8.1,用KSHV病人阳性血清作为抗体,经ELISA和Western blot检测其抗原性;用纯化的gpK8.1蛋白免疫新西兰兔,观察诱发抗体产生的时间及其效价,并用Western blot检测兔抗gpK8.1多克隆抗体特异性识别重组与天然gpK8.1抗原的能力,评价其免疫原性。结果ELISA和Western blot证实3份KSHV阳性血清均能识别重组gpK8.1蛋白;重组gpK8.1蛋白免疫动物6周后,兔血清多克隆抗体效价达到105。结论高效表达并纯化的gpK8.1蛋白具有良好的抗原性和免疫原性,为KSHV检测试剂和疫苗研究提供了基础资料。
姚水洪
卢春
张玲
汤巧
关键词:
卡波济肉瘤相关疱疹病毒
抗原性
免疫原性
抗原捕获ELISA检测卡波济肉瘤相关疱疹病毒的方法建立
2008年
目的建立检测卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)的抗原捕获ELISA方法,初步探讨其临床应用的可行性。方法以纯化的抗gpK8.1单克隆抗体(McAb)和多克隆抗体(PcAb)配对作为包被抗体和检测抗体,建立和优化抗原捕获ELISA检测方法,评价其敏感性、特异性和重复性,并初步用于3例已知KSHV阳性血清和257例临床血清样品中抗原的检测。结果包被的McAb浓度为5μg/ml、检测抗体浓度为1.6μg/ml时,P/N值最高,检测的敏感度为31.28ng/ml,且与EB病毒(EBV)、单纯疱疹病毒1型(HSV-1)、单纯疱疹病毒2型(HSV-2)等抗原无交叉反应,特异性高。检测3例KSHV阳性患者血清均为阳性,在257例临床血清样品中,4例捕获到KSHV抗原。结论建立了检测KSHV的抗原捕获ELISA方法,为可能的KSHV检测试剂研制提供重要实验依据。
姚水洪
汤巧
王先芳
邱惠萍
李胜琴
卢春
关键词:
卡波济肉瘤相关疱疹病毒
酶联免疫吸附试验
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