国家教育部博士点基金(20050246041)
- 作品数：10 被引量：156H指数：9
- 相关作者：王文健应健陈伟华何燕铭刘毅更多>>
- 相关机构：复旦大学上海医学院复旦大学上海中医药大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金国家教育部“985工程”更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 黄芪多糖对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响被引量：45
- 2007年
- 目的:探讨黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)对前脂肪细胞增殖、分化的影响及其机制。方法:以XTT法检测3T3-Ll前脂肪细胞的增殖;油红O染色并通过比色定量分析检测3T3-L1前脂肪细胞分化过程中胞浆脂质的堆积;采用实时聚合酶链式反应和蛋白质免疫印迹(Western blotting)技术检测前脂肪细胞分化相关基因过氧化物体增殖剂活化受体γ(peroxi some proliferator activated receptorγ,PPARγ)、CAAT/增强子结合蛋白α(CAAT/enhancer binding proteinα,C/EBPα) mRNA以及蛋白质的表达。结果:APS浓度从0.025到0.8g/L,在24、48和72h各时间段对前脂肪细胞的生长均表现为增殖趋势,且呈一定的量效关系;0.4g/L APS处理的前脂肪细胞,胞浆中出现较大量脂滴,其作用与噻唑烷二酮(thiazo-lidinedione,TZD)类药物罗格列酮(rosiglitazone,ROS)相似;APS使前脂肪细胞分化相关基因PPARγ和C/EBPα mRNA与蛋白的表达明显增加,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:APS能够促进前脂肪细胞的增殖和分化,增加脂肪细胞分化过程中脂质的堆积,其机制可能与其促进PPARγ和C/EBPα mRNA与蛋白质表达有关。
- 刘毅王文健陈伟华应健
- 关键词：黄芪多糖增殖分化MRNA前脂肪细胞
- 聚证学说的建立和应用被引量：33
- 2007年
- 本文在继承的基础上创新性地提出了中医聚证学说的基本框架。聚证的病因是先天禀赋不足和后天脏腑受损,导致气化障碍,邪热、湿浊、瘀血乘虚留驻,使精微不得化生和正常输布。聚证属虚实夹杂之证,应以攻补兼施为治则,散聚为基本治法。应用聚证理论指导代谢综合征患者的治疗,在症状好转的同时,胰岛素抵抗、血糖、血脂、体质量、腰围及炎症因子均有改善,证实了聚证学说的理论意义和应用价值。
- 王文健
- 关键词：证候代谢综合征聚证
- 蒲黄总黄酮对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化及相关基因表达的影响被引量：12
- 2010年
- 目的脂肪细胞分化的调控与肥胖及胰岛素抵抗的发病机制有密切关系。文中研究蒲黄总黄酮(pollen typhae total flavone,PTF)对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化的影响,并通过相关基因的表达分析其可能机制。方法通过XTT法检测各剂量PTF干预的前脂肪细胞增殖的变化,对PTF干预分化的细胞进行油红O染色并通过比色定量分析脂肪细胞分化程度。RT-PCR检测脂肪细胞分化相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ)、CAAT/增强子结合蛋白α(CAAT/enhancer binding proteinα,C/EBPα)mRNA的表达。结果 PTF明显促进前脂肪细胞的增殖,在0.2 g/L时可明显促进前脂肪细胞的分化,但分化程度低于罗格列酮组。PTF可提高PPARγ和C/EBPαmRNA表达,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.01)。结论 PTF促进前脂肪细胞增殖分化水平,其机制可能与提高PPARγ和C/EBPα的mRNA表达有关。
- 傅晓东何燕铭陈伟华应健王文健
- 关键词：前脂肪细胞蒲黄总黄酮增殖分化
- 蒲黄总黄酮对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢的影响被引量：32
- 2006年
- 目的：探讨蒲黄总黄酮对脂肪细胞糖脂代谢的影响。方法：药物处理胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞24h，通过检测培养液中的葡萄糖含量反映葡萄糖消耗量；XTT法观察药物对细胞活性的影响；^3H-葡萄糖摄入法观察细胞对葡萄糖的转运率；通过检测上清液中的浓度观察细胞游离脂肪酸（freefatty acid，FFA）的溢出。结果：蒲黄总黄酮在浓度为0．025-0．4g／L时有增加葡萄糖消耗的作用，且呈剂量效应。当浓度为0．4g／L时，XTT值明显下降，显示对细胞的毒性作用。在0．2g／L时，蒲黄总黄酮与罗格列酮相似，可明显提高细胞对^3H-脱氧葡萄糖的转运率。蒲黄总黄酮组培养上清液中FFA浓度明显低于空白对照组，而罗格列酮组则无明显差异。结论：蒲黄总黄酮能显著增加3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖摄取和消耗，同时可减少FFA溢出，通过调节糖代谢和脂代谢改善胰岛素抵抗。
- 何燕铭王文健陈伟华应健何春燕马宇滢刘毅李佑生
- 关键词：黄酮葡萄糖游离脂肪酸
- 蒲黄总黄酮对3T3-L1脂肪细胞过氧化物酶体增生物激活受体家族mRNA基因表达的影响被引量：23
- 2008年
- 目的:观察蒲黄总黄酮(Pollen Typhaetotal flavones,PTF)对脂肪细胞糖脂代谢和过氧化物酶体增生物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR)家族基因表达的影响,并分析其改善胰岛素抵抗的可能机制。方法:蒲黄总黄酮干预3T3-L1脂肪细胞,实时定量荧光多聚酶联反应检测脂肪细胞分化相关基因PPAR家族,包括PPARα、PPARγ和PPARβ/δ mRNA的表达。结果:蒲黄总黄酮可上调PPARα、PPARγ mRNA的表达,下调PPARβ/δ mRNA的表达,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:蒲黄总黄酮可能通过提高3T3-L1脂肪细胞PPARα和PPARγ mRNA的表达改善胰岛素抵抗。
- 何燕铭王文健陈伟华应健
- 关键词：脂肪细胞蒲黄总黄酮游离脂肪酸
- 小檗碱对3T3-L1脂肪细胞内脂素表达的影响被引量：9
- 2007年
- 目的观察小檗碱对3T3-L1脂肪细胞内脂素(visfatin)表达的影响和探讨小檗碱改善胰岛素抵抗的机制。方法采用RT-PCR法检测不同浓度小檗碱和不同作用时间后,3T3-L1脂肪细胞内脂素mRNA的表达,并以Western印迹方法检测其蛋白水平的表达。结果0～10μmol/L小檗碱剂量依赖性地增加内脂素mRNA的表达,其中10μmol/L时最明显,是空白对照组的4.96倍,其后随着小檗碱浓度的进一步增加,内脂素mRNA的表达反而降低;10μmol/L的小檗碱作用3 h后内脂素mRNA的表达开始明显增强,至作用12 h时表达增强最明显,是基础组的4.57倍,随着作用时间的延长内脂素mRNA的表达虽然有所下降,但到48 h时内脂素mRNA的表达仍比空白对照组明显增高;5、10、20μmol/L的小檗碱均可使内脂素蛋白的表达增加1.13、2.46、2.34倍,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论在一定浓度范围内小檗碱可剂量和时间依赖性地促进离体脂肪细胞内脂素mRNA及蛋白表达。小檗碱对内脂素表达的调节作用可能是其改善机体胰岛素抵抗、降低血糖的机制之一。
- 刘毅王文健李佑生马宇滢何燕铭何春燕陈伟华应健
- 关键词：小檗碱3T3-L1脂肪细胞基因表达
- 论聚证学说及临证辨治被引量：11
- 2008年
- 在继承的基础上创新性地提出了中医聚证学说的基本框架。聚证的病因是先天禀赋不足和后天脏腑受损,导致气化障碍,邪热、湿浊、瘀血乘虚留滞,使精微不得化生和正常输布。聚证属虚实夹杂之证,应以攻补兼施为治则,散聚为基本治法。运用中医学聚证理论来指导治疗代谢综合征,在其症状好转的同时,胰岛素抵抗、血糖、血脂、体重、腰围及炎症因子等均有明显改善,证实了聚证学说的理论意义和临床应用价值。
- 王文健
- 关键词：聚证代谢综合征
- 蒲黄总黄酮对Palmitate培养下的C2C12骨骼肌细胞葡萄糖代谢的影响被引量：12
- 2008年
- 目的:探讨蒲黄总黄酮(PTF)对骨骼肌细胞葡萄糖代谢的影响。方法:PTF处理棕榈酸(Palmitate)诱导而致胰岛素抵抗(IR)的C2C12骨骼肌细胞,采用XTT法观察药物对细胞活性的影响;通过检测培养液中的葡萄糖含量反映葡萄糖消耗量;3H-葡萄糖摄入法观察细胞对葡萄糖的转运率。结果:0.25mmol/LPalmitate培养16h,造成C2C12骨骼肌细胞葡萄糖消耗量下降34.66%,0.5g/LPTF可使其葡萄糖消耗量显著增加,且呈一定的时间依赖效应,与罗格列酮(ROS)相比,统计学差异显著(P<0.05);0.25mmol/LPalmi-tate培养16h,使C2C12骨骼肌细胞葡萄糖摄取率下降30.43%,造成骨骼肌细胞胰岛素抵抗(IR)模型,0.5g/LPTF可使IR模型葡萄糖转运率增加32.39%,ROS可使其转运率增加45.88%,与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PTF能显著增加C2C12骨骼肌细胞的葡萄糖消耗和摄取,这可能是PTF改善骨骼肌IR的机制之一。
- 娄少颖刘毅陈伟华应健何燕铭王文健
- 关键词：蒲黄总黄酮糖代谢棕榈酸胰岛素抵抗
- 小檗碱对3T3-L1前脂肪细胞增殖及分化相关基因PPARγ、C/EBPα mRNA和蛋白表达的影响被引量：27
- 2008年
- 目的探讨小檗碱对脂肪细胞增殖、分化的影响及其机制。方法以XTT法检测3T3-Ll前脂肪细胞的增殖;油红O染色并通过比色定量分析检测3T3-L1前脂肪细胞分化过程中胞浆脂质的堆积;采用Real-time PCR和蛋白质免疫印迹(Western blotting)技术检测脂肪细胞分化相关基因过氧化物体增殖剂活化受体γ(peroxisome proliferator activated receptor,PPARγ)、CAAT/增强子结合蛋白α(CAAT/enhancer bindingprotein,C/EBPα)mRNA以及蛋白的表达。结果浓度低于10μmol/L小檗碱干预24h,对脂肪细胞增殖的影响不明显(与空白对照组比较,P>0.05),20、40、80μmol/L小檗碱在作用24h后即表现出明显的抑制效应;不同浓度的小檗碱作用48、72h后对脂肪细胞的增殖亦表现出抑制效应,且有一定的量效关系,即小檗碱浓度越高抑制作用越明显,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);10μmol/L小檗碱处理的前脂肪细胞,分化后胞浆中脂滴明显减少,分化相关基因PPARγmRNA、C/EBPαmRNA和蛋白的表达亦减少,与空白对照组和罗格列酮干预组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论小檗碱能够抑制前脂肪细胞的增殖和分化,减少脂肪细胞分化过程中脂质的堆积,机制可能与其抑制脂肪细胞分化相关基因PPARγ、C/EBPαmRNA和蛋白表达有关,实验为小檗碱防治肥胖等代谢相关性疾病提供了依据。
- 刘毅娄少颖何燕铭陈伟华应健王文健
- 关键词：小檗碱脂肪细胞蛋白
- 蒲黄总黄酮抑制棕榈酸培养下C2C12骨骼肌细胞白细胞介素6的表达被引量：11
- 2008年
- 目的:观察蒲黄总黄酮(Pollen Typhae total flavones,PTF)对棕榈酸培养下C2C12骨骼肌细胞白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)表达的影响,探讨PTF改善骨骼肌胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的可能机制。方法:0.25mmol/L棕榈酸培养建立骨骼肌细胞IR模型。根据处理方法不同,设对照组、模型组、核转录因子κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)抑制剂PDTC组、罗格列酮(rosiglitazone,ROS)组、ROS+PDTC组、PTF组和PTF+PDTC抑制剂组。处理16h后,3H-脱氧葡萄糖摄入法观察细胞对葡萄糖的转运率,实时定量多聚酶联反应检测IL-6mRNA的表达,酶联免疫吸附测定法检测细胞培养上清中IL-6蛋白水平。结果:0.25mmol/L棕榈酸培养16h,C2C12细胞葡萄糖摄取率下降30.43%,IR模型建立;PTF可使IR模型细胞葡萄糖转运率增加32.39%,IL-6mRNA表达及细胞培养上清液中IL-6蛋白水平均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);加入PDTC后,细胞IL-6mRNA表达及细胞培养上清液中IL-6蛋白水平上升(P<0.05)。结论:PTF通过抑制NF-κB通路而抑制C2C12骨骼肌细胞IL-6mRNA表达及蛋白分泌,可能是其减轻骨骼肌炎症状态和改善IR的机制之一。
- 娄少颖刘毅陈伟华应健何燕铭王文健
- 关键词：蒲黄总黄酮棕榈酸胰岛素抵抗白细胞介素6
