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排序方式：

禽呼肠孤病毒σ2基因的克隆和表达: 采用RT-PCR技术扩增禽呼肠孤病毒ARV S1133毒株和广西分离株R1的σ2基因,将σ2基因克隆至PGEX-4T-1载体上,测序结果表明插入的片段为σ2目的基因。切下目的基因σ2重组到含有谷胱甘肽(GST)的融合蛋白...; 邓显文谢芝勋刘加波庞耀珊唐小飞; 关键词：禽呼肠孤病毒 PGEX-4T-1; 文献传递

禽呼肠病毒P10、P17非结构蛋白基因的克隆及序列分析被引量：4: 2006年; 根据GenBank上的禽呼肠病毒（ARV）S1基因序列，设计并合成了一对跨越P10和P17非结构蛋白基因的特异性引物，对13个ARV毒株进行RT—PCR扩增、克隆及序列测定。结果显示，13个ARV毒株的P10蛋白基因ORF全长均为297bp，编码98个氨基酸；P17蛋白基因ORF全长为441bp，编码146个氨基酸。这13个ARV毒株P10、P17蛋白基因核苷酸同源性分别在96．6%～100%和95．2％～99．3%之间，推导的氨基酸同源性分别在98．2％～100%和91．9%～99．0%之间。将这13个ARV毒株与Gen Bank上其他正呼肠病毒毒株，包括番鸭株（DRV）和飞狐上分离到的内尔森海湾病毒（Nelson Bay Vir US，NBV）及两个澳洲分离株（ARM—1和SOM-4）进行同源性比较和遗传进化树分析，结果表明，呼肠病毒有地域和种类的差别。; 秦春香谢芝勋谢丽基; 关键词：禽呼肠病毒克隆

禽呼肠孤病毒σNS非结构蛋白基因的克隆和表达被引量：8: 2005年; 采用RT-PCR技术扩增了禽呼肠孤病毒(ARV)S1133株与广西分离株R2 σNS非结构蛋白基因,将σNS基因克隆到质粒表达载体pGEX-4T-1上,获得的重组质粒经PCR、酶切鉴定以及测序分析,σNS基因的插入位置、大小和阅读框均正确,将阳性克隆命名为pGEX-S1133-σNS和pGEX-R2-σNS.构建好的重组质粒经37 ℃ 1 mmol/L IPTG诱导、SDS-PAGE分析超声裂解后的上清和沉淀,显示目的蛋白以包涵体方式表达,其蛋白质分子质量约为66.2 ku,约占菌体总量的31.5%～34.8%.Western-blotting分析表明,目的蛋白能够与ARV阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有较好的抗原性.; 谢丽基谢芝勋; 关键词：禽呼肠孤病毒克隆表达

禽呼肠孤病毒σNS基因的克隆及其功能分析被引量：5: 2007年; 采用RT-PCR技术对8株禽呼肠孤病毒(ARV)σNS基因进行了扩增,将获得的PCR产物分别与pMD18-T载体连接。测序结果表明,所构建的克隆质粒中均含有相应的σNS蛋白基因,大小为1 107bp。经DNAStar软件分析,除R1株外,其他ARV毒株的σNS基因核苷酸及其推导氨基酸序列与标准毒株S1133和1733株的同源性很高。Antheprot 5.0蛋白分析软件的分析结果表明,σNS蛋白无跨膜区,拥有较多的疏水区和抗原位点,可作为诊断候选蛋白。; 谢丽基谢芝勋秦春香; 关键词：禽呼肠孤病毒克隆

禽呼肠孤病毒P17蛋白基因在大肠杆菌中的表达及其ELISA检测方法的建立被引量：7: 2007年; 用设计合成的1对跨越禽呼肠孤病毒(ARV)P17非结构蛋白基因完整开放阅读框(ORF)的特异性引物,对ARV S1133株进行了RT-PCR扩增。扩增产物与pGEX-4T-1原核表达载体连接后,转化大肠杆菌BL21感受态细胞。经0.2 mmol/LIPTG诱导,表达的融合蛋白分子质量为42.4 ku,占菌体总蛋白的34%。表达产物P17蛋白经不同浓度尿素纯化后,纯度达到85%。Western-blotting显示,纯化的P17蛋白能与感染ARV的阳性血清反应,说明其具有抗原性。以此重组蛋白为包被抗原初步建立了用于鉴别检测ARV活病毒感染与灭活疫苗免疫的SPF鸡血清的ELISA。; 谢芝勋秦春香谢丽基; 关键词：禽呼肠孤病毒原核表达酶联免疫吸附试验

应用RT-PCR检测人工感染鸡体内禽呼肠孤病毒的动态分布被引量：5: 2004年; 应用一步法反转录聚合酶链反应 (RT -PCR)技术检测禽呼肠孤病毒 (ARV)在人工感染SPF雏鸡体内的动态分布情况。结果 3日龄感染ARVS1 1 3 3毒株后 ,1 2h就可以从关节、肝、脾等组织中检出病毒的RNA ,感染后 3 -7天为检出的高峰期 ,至感染后 2 7天还可从关节组织检测到 ;在 1 2种不同组织中 ,均不同程度地检测到病原的核酸 ,其中以关节组织检出率最高(80 9% ) ,其次为肝 (67 6% )、脾 (5 5 9% )、肾(5 0 0 % ) ,肛门棉拭子的检出率最低 (1 3 2 % )。显示了ARV在感染机体内的动态分布情况。; 廖敏谢芝勋刘加波庞耀珊邓显文谢志勤唐小飞; 关键词：一步法RT-PCR 禽呼肠孤病毒

禽呼肠孤病毒μNS非结构蛋白基因的克隆及序列分析被引量：1: 2007年; 根据GenBank中禽呼肠孤病毒(ARV)M3基因序列,设计并合成了一对跨越μNS非结构蛋白基因完整开放阅读框(ORF)的特异性引物,对ARV的10个毒株进行RT-PCR扩增、克隆及序列测定。结果表明,10个毒株μNS蛋白基因ORF的核苷酸序列全长均为1908 bp,编码635个氨基酸。这10个毒株之间的核苷酸及推导的氨基酸同源性分别都在98%以上。将它们与哺乳动物呼肠孤病毒(MRV)、番鸭呼肠孤病毒(DRV)等进行核苷酸及推导的氨基酸序列比较,并进行遗传系统树分析,结果表明ARV与MRV有较大的差异,与DRV差异较小。; 秦春香谢芝勋谢丽基; 关键词：禽呼肠孤病毒克隆

禽呼肠孤病毒分离株δ_3蛋白基因克隆及序列分析被引量：7: 2004年; 本研究将禽呼肠孤病毒广西两分离株R1、R2和美国分离株Isol S1基因中编码σ_3蛋白的基因片段进行克隆和鉴定。对克隆片段测序后与参考株S1133、1733、138、176毒株的S1基因相应序列进行比较分析。结果表明,广西分离株R1、R2与美国分离株Isol以及S1133、1733、176毒株的核苷酸和推导氨基酸的同源性均在95％以上,上参考株138的同源性在81％～85％之间。由此可见,除了与138参考株外,广西分离株R1、R2和美国分离株Isol与其他比较的毒株的S1基因上存在很大的相关性。; 廖敏谢芝勋刘加波邓显文庞耀珊谢志勤唐小飞; 关键词：禽呼肠孤病毒分离株

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