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河南省教育厅自然科学基金(2010B310007)

作品数：1 被引量：2H指数：1
相关作者：孙瑞利王明永王凡平杨景瑞段巨洪更多>>
相关机构：新乡医学院更多>>
发文基金：河南省科技攻关计划河南省教育厅自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇克隆
  • 1篇活性
  • 1篇基因
  • 1篇基因克隆
  • 1篇功能活性
  • 1篇胞外段

机构

  • 1篇新乡医学院

作者

  • 1篇郭庆合
  • 1篇张婧婧
  • 1篇张新富
  • 1篇段巨洪
  • 1篇杨景瑞
  • 1篇王凡平
  • 1篇王明永
  • 1篇孙瑞利

传媒

  • 1篇中国免疫学杂...

年份

  • 1篇2011
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
人TLR4胞外段的克隆、表达及功能活性分析被引量：2
2011年
目的:获得高纯度、高活性的人TLR4胞外段蛋白。方法:采用PCR方法从含人TLR4 cDNA的质粒pCDNA3-TLR4中扩增人TLR4胞外段基因片段,将其插入载体pET32a并导入大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达。用Ni2+-NTA琼脂糖柱纯化融合蛋白。SDS-PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的相对分子质量和抗原性,ELISA和FCM鉴定其功能活性。结果:获得1 911 bp的人TLR4胞外段基因片段,构建成重组表达载体pET32a-TLR4并在大肠杆菌中表达。TLR4-Trx融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的12%,其纯度较高。ELISA和FCM检测显示,TLR4-TrX融合蛋白不仅与配体LPS结合,还能竞争性抑制LPS与THP1细胞结合。结论:所获TLR4-Trx融合蛋白纯度高,功能活性好,为进一步研究TLR相关的免疫调节机制提供物质基础。
王凡平王明永孙瑞利郭庆合张婧婧杨景瑞张新富段巨洪
关键词：基因克隆功能活性
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