湖北省教育厅科学技术研究项目(200524001)
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 相关作者：宋军王斌徐少勇曹书芬陈珺更多>>
- 相关机构：武汉大学湖北医药学院十堰市人民医院更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Skp2-siRNA重组腺病毒载体构建及鉴定被引量：3
- 2011年
- 目的:构建针对Skp2的siRNA腺病毒载体。方法:合成针对Skp2的siRNA靶DNA序列及相应阴性对照序列,退火成DNA双链,然后亚克隆穿梭质粒pShuttle-H1,Pme I线性化后,与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组,转染AD293细胞,包装得到pAd-Skp2-siRNA和pAd-Skp2-siRNA-NC重组腺病毒。用病毒体外感染结肠癌SW480细胞,Western blot检测Skp2蛋白表达水平。结果:重组腺病毒载体经酶切、鉴定正确,制备的病毒感染效率高,能显著抑制Skp2蛋白表达。结论:细菌内同源重组成功构建了Ad-Skp2-siRNA重组腺病毒及阴性对照病毒。
- 魏刚孙泽群孔霞黄永章王斌唐俊明徐少勇
- 关键词：SKP2SIRNA腺病毒载体
- p27和Skp2在大肠癌中表达及临床病理关系研究被引量：4
- 2006年
- 目的:研究大肠癌组织p27和Skp2蛋白表达,以及p27和Skp2表达与临床病理关系,探讨两者之间相关性。方法:采用免疫组织化学SP法检测30例大肠癌标本组织和18例正常大肠粘膜组织p27和Skp2蛋白表达。结果:p27在正常大肠粘膜组织中平均阳性率为55.2%,显著高于大肠癌组织(27.5%,P<0.05)。p27表达与大肠癌分化程度,Dukes'分期及淋巴结转移呈显著性负相关(P<0.05)。Skp2在大肠癌组织中平均阳性率为9.5%,显著高于正常大肠粘膜组织(1.8%,P<0.05)。Skp2表达与大肠癌分化程度呈显著性负相关(P<0.05),与患者年龄,性别,Dukes'分期及淋巴结转移无明显相关(P>0.05)。大肠癌中p27与Skp2表达呈负相关(r=-0.806,P<0.01)。结论:大肠癌中Skp2与p27降解有关,Skp2是大肠癌致癌基因,参与了大肠癌发生,可能成为大肠癌治疗新靶点。
- 宋军徐少勇王斌曹书芬
- 关键词：大肠癌SKP2P27免疫组织化学泛素-蛋白酶体途径
- Skp2基因沉默对大肠癌细胞SW480生物学特性的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:观察Skp2基因沉默对人大肠癌SW480细胞增殖与凋亡的影响。方法:通过细菌内同源重组法,构建含有H1启动子驱动、表达绿色荧光蛋白(GFP)标志和Skp2基因干扰片段的腺病毒骨架载体。通过测序鉴定后在HEK293细胞中包装成腺病毒,并扩增纯化。体外感染人大肠癌SW480细胞,在荧光显微镜下观察GFP表达,以确定转染效率;用蛋白免疫印迹技术检测基因沉默效率。用MTT比色法检测细胞生长率,流式细胞技术检测细胞周期和凋亡。结果:琼脂糖电泳和测序鉴定表明针对Skp2基因干扰片断的碱基序列及插入位点完全正确;Skp2基因沉默后影响大肠癌SW480细胞的周期进程,使其发生G0/G1期阻滞,抑制了细胞的增殖,使其生长速度减缓;并促使大肠癌SW480细胞凋亡。结论:Skp2基因沉默后影响大肠癌SW480细胞的细胞周期,发生G0/G1期阻滞,抑制了细胞的增殖,并诱导细胞凋亡。
- 魏刚王璠王斌黄永章徐少勇
- 关键词：S期激酶相关蛋白2腺病毒载体
- Notch1在大肠癌中的表达及临床意义被引量：1
- 2008年
- 目的研究大肠癌中Noteh1蛋白的表达以及Noteh1蛋白与大肠癌的临床病理关系。方法对30例大肠癌标本组织及18例正常大肠黏膜组织用免疫组织化学S—P方法检测其Noteh1蛋白的表达情况。结果Noteh1蛋白在大肠癌中高表达，其平均阳性率为（45．5±0．7）％，Noteh1蛋白在正常大肠黏膜中低表达，其平均阳性率为（6．8±0．9）％，两者差异有统计学意义（P〈0.05）。Noteh1蛋白在不同年龄，性别，肿瘤部位、有无淋巴结转移及Dukes分期中的表达差异无统计学意义（P〉0．05），但Noteh1蛋白在不同分化程度的大肠癌中的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Noteh1蛋白与大肠癌的发生有关，是潜在的致癌基因。Noteh1有望成为大肠癌治疗新的靶基因。
- 卢光新宋军徐少勇王斌陈珺杨桂芳
- 关键词：肠肿瘤基因
