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中国博士后科学基金(2005038259)

作品数：8 被引量：8H指数：2
相关作者：裘秀春范清宇周勇杨彤涛许彦鸣更多>>
相关机构：第四军医大学唐都医院第四军医大学免疫学教研室更多>>
发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 7篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 6篇蛋白
  • 5篇凋亡
  • 5篇凋亡作用
  • 5篇肉瘤
  • 5篇骨肉瘤
  • 5篇促凋亡
  • 5篇促凋亡作用
  • 4篇融合蛋白
  • 4篇细胞
  • 2篇蛋白质
  • 2篇蛋白质类
  • 2篇肉瘤细胞
  • 2篇生长因子受体
  • 2篇受体
  • 2篇热休克
  • 2篇热休克蛋白
  • 2篇热休克蛋白9...
  • 2篇骨肉瘤细胞
  • 2篇靶向
  • 2篇白质

机构

  • 8篇第四军医大学...
  • 5篇第四军医大学
  • 1篇免疫学教研室
  • 1篇生物化学与分...

作者

  • 8篇范清宇
  • 8篇裘秀春
  • 6篇杨彤涛
  • 6篇周勇
  • 6篇许彦鸣
  • 5篇杨安钢
  • 5篇马保安
  • 4篇纪振钢
  • 3篇张明华
  • 3篇苟永胜
  • 3篇龙华
  • 3篇周本根
  • 2篇单乐群
  • 2篇任民
  • 1篇孟艳玲
  • 1篇文艳华
  • 1篇于翠娟
  • 1篇钱济先
  • 1篇李伟
  • 1篇何立宏

传媒

  • 2篇中国肿瘤生物...
  • 2篇医学研究生学...
  • 1篇中国癌症杂志
  • 1篇中华肿瘤杂志
  • 1篇现代肿瘤医学
  • 1篇中华肿瘤防治...

年份

  • 1篇2010
  • 1篇2008
  • 5篇2007
  • 1篇2006
共 8 条 记 录，以下是 1-8
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排序方式：
重组抗HER2融合蛋白基因ScFv/tBid对骨肉瘤E10细胞的促凋亡作用被引量：1
2008年
目的:构建抗HER2重组融合蛋白基因ScFv/tBid,并探讨其对骨肉瘤E10细胞的促调亡作用。方法:通过间接免疫荧光染色、流式细胞仪(FCM)检测E10细胞膜表面HER2的表达。将抗HER2单链抗体基因e23sFv与铜绿假单胞菌外毒素PE的转膜结构域基因(PEⅡ)和tBid基因连接,构建抗HER2重组融合蛋白基因ScFv/tBid,将其克隆入真核表达载体pCMV中构建重组pCMV-ScFv/tBid载体,转染骨肉瘤E10细胞。间接免疫荧光法检测目的蛋白表达和细胞形态学变化,Annexin V染色流式细胞术及TUNEL法检测E10细胞的凋亡情况。结果:流式细胞仪检测到E10细胞膜表面有HER2的表达。成功构建重组融合蛋白基因质粒pCMV-ScFv/tBid。重组质粒转染E10细胞后,间接免疫荧光双标记染色检测到E10细胞中tBid的过表达;细胞色素C在细胞质中出现;细胞出现明显的固缩、核浓缩等形态特征。Annexin V染色后流式细胞仪检测可见实验组细胞凋亡率较对照组明显升高(16.1% vs 4.5%);TUNEL染色显示,E10细胞出现典型的凋亡特征。结论:重组抗HER2融合蛋白基因ScFv/tBid可以在转染的骨肉瘤E10细胞中表达,并诱导骨肉瘤细胞发生凋亡。
裘秀春单乐群纪振钢杨彤涛龙华许彦鸣周勇马保安杨安钢范清宇
关键词：TBID人表皮生长因子受体2融合蛋白骨肉瘤细胞
格尔德霉素增强子宫颈癌HeLa细胞热疗效的影响
2007年
背景与目的:苯醌安莎霉素类如格尔德霉素(geldanamycin,GA)通过抑制热休克蛋白(heat shock protain90,HSP90)从而导致细胞内信号调节通路网络的多点阻断,如导致涉及细胞增殖、细胞周期调节及幸存调节等众多效应蛋白的降解。前期研究证明HSP90可作为抗肿瘤治疗的一个分子靶位。本研究以子宫颈癌HeLa细胞为研究对象,观察HSP90分子伴侣复合物阻止剂格尔德霉素能否增强加热对HeLa细胞的杀伤效应。方法:采用四唑盐比色实验(MTT)、流式细胞术(flow cytometry,FCM)、吖啶橙荧光染色等方法观察比较应用单纯热疗组、GA组、热疗联合GA组对HeLa细胞活力、凋亡率及细胞形态学的影响。结果:四唑盐比色实验观察到加热与GA化疗间有交互作用,加热联合GA组显著增强单独加热对HeLa细胞杀伤效应(P<0.01);Annexin V-FITC染色流式细胞术结果显示加热联合GA组、单纯加热组、单纯GA治疗组所致细胞凋亡率分别为92.1%、52.2%及26.8%。用吖啶橙荧光染色法观察到加热联合GA组明显见HeLa细胞固缩着色不均而且较深,细胞核浓缩、裂解等凋亡特征。结论:HSP90分子伴侣复合物阻止剂GA能增强热诱导的HeLa细胞的杀伤作用。
苟永胜裘秀春马保安周勇张明华钱济先青晓芬任民范清宇
关键词：子宫颈癌细胞
HER2靶向重组截短型Bid片段融合蛋白对骨肉瘤细胞的促凋亡作用被引量：1
2007年
目的:观察人上皮细胞生长因子受体2(HER2)靶向重组的活性截短型Bid(tBid)融合蛋白对骨肉瘤SOSP-9607细胞的促凋亡作用。方法:将抗HER2单链抗体基因e23sFv、与绿脓杆菌外毒素(PE)的转膜结构域基因(PEII)和tbid基因连接,构建成immuno-tbid(e23sFv-PEII-tbid)基因,将其克隆入真核表达载体pCMV中,转染SOSP-9607细胞,间接免疫荧光法检测目的蛋白表达和细胞形态学变化,通过AnnexinⅤ染色、流式细胞仪检测观察其促凋亡作用。结果:转染SOSP-9607细胞后,间接免疫荧光染色检测出tB id的表达,SOSP-9607细胞出现明显的固缩,核浓缩等凋亡特征。AnnexinⅤ染色、流式细胞仪检测可见明显的凋亡细胞,凋亡率为42%,对照组细胞仅6%,表明细胞膜表面有磷脂酰丝氨酸外翻,提示重组immuno-tbid基因表达后有促凋亡作用。结论:重组immuno-tbid基因可在转染的SOSP-9607细胞中表达,并诱导其细胞凋亡。
纪振钢裘秀春杨彤涛龙华马保安周勇张明华许彦鸣杨安钢范清宇
关键词：融合蛋白细胞凋亡
tBid基因的表达及其对骨肉瘤SOSP-9607细胞的促凋亡作用
2007年
目的:观察tBid基因在骨肉瘤细胞中的表达及其对转染的SOSP-9607细胞的凋亡作用。方法:采用脂质体转染的方法,将tBid基因转染骨肉瘤细胞,间接免疫荧光法检测目的蛋白的表达和细胞形态学变化,进一步电镜观察其超微结构改变。MTT法检测目的基因转染后细胞的增殖情况,通过Annexin V、染色流式细胞仪检测来观察其促凋亡作用。结果:转染SOSP-9607细胞后,间接免疫荧光染色检测tBid的表达,细胞出现凋亡。电镜观察呈现出典型的凋亡特征。MTT实验发现细胞的增殖被明显抑制。Annexin V染色流式细胞仪检测可见明显的凋亡细胞,与对照组细胞(凋亡率为6%)相比,其凋亡率为35.8%。结论:tBid基因可以在转染的SOSP-9607细胞中表达,并可抑制转染细胞的生长,诱导细胞发生凋亡。
纪振钢裘秀春杨彤涛龙华周本根文艳华许彦鸣杨安钢范清宇
关键词：TBID凋亡
热休克蛋白90阻止剂增强热诱导骨肉瘤细胞杀伤的研究被引量：3
2007年
目的:探讨热休克蛋白90(heat shock protain 90,HSP90)分子伴侣复合物阻止剂17-丙烯胺基-17去甲氧基格尔德霉素(17-allyl-amide-17-demethoxgeldanamycin,17-AAG),对热诱导的骨肉瘤SOSP-9607细胞杀伤作用的影响。方法:采用干细胞集落形成实验、流式细胞术(flow cytometry,FCM)和吖啶橙荧光染色等方法观察比较单纯热疗组与热疗联合17-AAG治疗组对骨肉瘤SOSP-9607细胞活力、凋亡率及形态学影响。结果:干细胞集落形成实验显示,热疗联合17-AAG治疗组较单独热疗对骨肉瘤SOSP-9607细胞的杀伤效应明显增强,P=0.036;Annexin V-FITC染色流式细胞术结果显示,热疗联合17-AAG治疗组所致凋亡率(52.2%)大于单纯热疗组(17.5%);用吖啶橙荧光染色法观察到热疗联合17-AAG治疗组明显见骨肉瘤SOSP-9607细胞固缩着色不均而且较深,细胞核浓缩、裂解等凋亡特征。结论:HSP90分子伴侣复合物阻止剂17-AAG能增强热诱导的骨肉瘤SOSP-9607细胞的杀伤作用。
苟永胜裘秀春杨彤涛马保安周勇张明华周本根李伟何立宏范清宇
人重组caspase-6融合蛋白对骨肉瘤SOSP-9607细胞靶向促凋亡作用被引量：2
2007年
目的:探讨Her2靶向重组的caspase-6融合蛋白对骨肉瘤SOSP-9607细胞的促凋亡作用。方法:将抗Her2单链抗体基因e23sFv与绿脓杆菌外毒素PE的转膜结构域基因(PEⅡ)和活性caspase-6基因连接,构建成Immunocasp-6(e23sFv-PEⅡ-casp-6)基因,将其克隆入真核表达载体pCMV中,转染SOSP-9607细胞,间接免疫荧光法检测目的基因表达和细胞形态学变化,通过AnnexinV染色、流式细胞术、MTT法检测来观察其促肿瘤细胞凋亡的作用。结果:转染SOSP-9607细胞后,间接免疫荧光染色检测出caspase-6的表达,SOSP-9607细胞出现明显的核浓缩、碎裂;电镜观察到细胞质浓缩,胞内空泡,核染色质浓集等典型的凋亡特征;MTT法检测发现细胞的增殖明显被抑制;AnnexinV染色流式细胞术检测可见明显的凋亡细胞,凋亡率为31.4%,较对照组细胞(凋亡率为6.0%)有非常显著的增加(P<0.01)。结论:重组Immunocasp-6基因可以在转染的SOSP-9607细胞中表达,并诱导细胞发生凋亡。
周本根许彦鸣裘秀春杨彤涛纪振钢苟永胜任民周勇杨安钢范清宇
关键词：CASPASE-6HER融合蛋白骨肉瘤
重组LacZ复制缺陷型腺病毒的构建和鉴定被引量：1
2006年
目的:构建表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒。方法:用AdEasy-1TM系统,在大肠杆菌中同源重组,构建表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-LacZ)。重组腺病毒在HEK293细胞内包装并扩增,测定病毒滴度、电镜鉴定病毒存在、斑点杂交检测其复制缺陷性,然后感染HeLa细胞X-gal染色检测LacZ的表达情况。结果:成功构建了重组LacZ腺病毒表达载体,包装获得的重组腺病毒的滴度为1.58×109PFU/m l。在转染的细胞和感染的靶细胞内均可检测到LacZ的表达。电镜下可见感染的HEK293细胞核内含晶格状结构的腺病毒包函体。斑点杂交提示重组病毒为复制缺陷型,其基因转移百分率和感染强度和感染时间有一定的相关性。结论:成功构建了表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒。
裘秀春许彦鸣马保安周勇单乐群杨彤涛于翠娟孟艳玲杨安钢范清宇
关键词：腺病毒表达载体LACZ
人重组型caspase-6融合蛋白对骨肉瘤的促凋亡作用
2010年
目的 探讨人类表皮生长因子受体2（Her-2）靶向重组型caspase-6融合蛋白对骨肉瘤的促凋亡作用.方法 将抗Her-2单链抗体基因e23sFv、绿脓杆菌外毒素PE的转膜结构域基因（PEⅡ）和重组型caspage-6基因连接,构建成Immunocasp-6（e23sFv-PE Ⅱ-casp-6）融合蛋白,将其亚克隆入真核表达载体pCMV中,构建pCMV-e23sfv-PE Ⅱ-caspase-6载体（简称pCMV-6）.将荷瘤裸鼠随机分为治疗组和对照组,采用阳离子脂质体包裹法,将pCMV-6和pCMV分别肌肉注射入荷瘤裸鼠身上,观察肿瘤体积和裸鼠体重的变化,并称取肿瘤重量.采用HE染色法观察肿瘤组织形态学变化,采用末端脱氧核苷酸转移酶标记技术（TUNEL）检测肿瘤组织的凋亡形态,采用免疫组织化学染色检测目的基因的表达.结果 对照组的肿瘤体积、肿瘤重量和裸鼠体重分别为（975.09±49.76）mm3、（1.08±0.16）g和（4.07±0.49）g,治疗组分别为（376.01±265.18）mm2、（0.64±0.18）g和（6.20±1.14）g.HE染色和TUNEL法检测显示,治疗组裸鼠肿瘤组织呈现出典型的凋亡特性,而对照组裸鼠肿瘤组织结构正常.免疫组织化学染色显示,caspase-6在治疗组裸鼠肿瘤组织中呈阳性,而在对照组肿瘤组织和肌肉组织中呈阴性.结论 人重组型caspase-6融合蛋白能靶向性识别、结合Her-2阳性的骨肉瘤细胞,并诱导其发生凋亡,为骨肉瘤的临床治疗提供了一定的实验基础.
周本根裘秀春许彦鸣范清宇
关键词：骨肉瘤重组融合蛋白质类CASPASE-6人类表皮生长因子受体2裸鼠
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