河北省自然科学基金(C2008000948)
- 作品数：4 被引量：10H指数：1
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- γ-synuclein在食管癌中的表达及其对食管癌Eca-109细胞侵袭力的影响
- 2012年
- 目的:研究γ-synuclein在食管癌中的表达及其对人食管癌细胞株Eca-109侵袭力的影响。方法:选取2010年1月至12月于河北医科大学第四医院食管癌患者组织标本30例,同时取10例正常食管组织作对照。采用免疫组化法观察食管癌组织中γ-synuclein的表达情况。采用脂质体法转染含γ-synuclein的重组质粒pcDNA3.0-γ-synuclein,应用RT-PCR检测转染后Eca-109细胞中γ-synuclein mRNA的表达,流式细胞术检测γ-synuclein蛋白的表达,利用Transwell实验检测转染后Eca-109细胞侵袭力的变化。结果:与正常食管组织相比,食管癌组织中γ-synuclein蛋白阳性表达率明显增强(83.3%vs40.0%,P<0.05),Ⅰ-Ⅱ期食管癌患者γ-synuclein表达率明显低于Ⅲ-Ⅳ期(22.2%vs 76.2%,P<0.05)。pcDNA3.0-γ-synu-clein质粒转染后,Eca-109细胞中γ-synuclein mRNA表达水平显著高于空质粒转染组和未转染组[(1.10±0.03)vs(0.42±0.03),(0.45±0.15),P<0.01],蛋白表达水平也明显增高[(1.05±0.061)vs(0.80±0.45),(0.79±0.46);P<0.05],穿膜细胞数明显增加[(167±2.51)vs(65±2.60),(70±2.50);P<0.01]。结论:食管癌组织高表达γ-synuclein,其表达上调能增强人食管癌Eca-109细胞的侵袭力,提示其在食管癌的转移和恶性发展中发挥重要作用。
- 荆丽王玉栋吕雅蕾左静冯莉刘巍
- 关键词：食管癌Γ-SYNUCLEIN转染
- siRNA干扰ERCC2表达影响食管癌细胞KYSE150对紫杉醇的敏感性被引量：1
- 2009年
- 目的:通过siRNA干扰沉默食管癌KYSE150细胞中切除修复鼠缺陷交叉互补基因2(excision repair cross-comple-menting rodent repair deficiency,complementatin group 2,ERCC2)的表达,以观察其对紫杉醇(paclitaxel,PTX)敏感性的改变,初步探讨逆转KYSE150细胞对PTX耐药性的新的可能机制。方法:体外合成靶向ERCC2的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA);脂质体法瞬时转染ERCC2高表达细胞株KYSE150;RT-PCR和FCM分别检测转染组细胞中ERCC2 mRNA和蛋白的表达水平;MTT法检测转染前后细胞对PTX敏感性的变化。结果:RT-PCR检测结果提示,si-ERCC2组在转染后24、48和72 h时细胞中均未测出ERCC2 mRNA特异性条带的表达;FCM检测结果提示,si-ERCC2组中ERCC2蛋白表达量随着处理时间(24、48和72 h)的延长而逐渐下降,表达量分别下调了31.2%、51.6%和60.0%(P<0.01);si-ERCC2组PTX的IC50值为(6.32±0.87)mg/mL,与对照组比较,IC50值明显降低(P<0.01)。结论:siRNA成功封闭了目的基因ERCC2在转录和翻译水平上的表达,封闭ERCC2表达能部分逆转KYSE150细胞对PTX的耐药性。
- 王玉栋崔志英左静冯莉吕雅蕾刘巍
- 关键词：食管肿瘤紫杉醇
- ERCC1、ERCC2与食管癌临床病理特征和预后关系的研究被引量：9
- 2010年
- 目的通过检测食管癌组织ERCC1、ERCC2蛋白的表达,探讨其与临床病理特征和预后的关系。方法随机抽取河北医科大学第四医院2001年1月1日至2001年12月31日间手术切除的食管癌患者137例,剔除双重癌、曾接受放疗、应用非铂类术前化疗患者共29例,入组病例为108例,对其进行临床病理资料登记并随访至2006年12月31日。共随访97例并建立患者临床资料Excel数据库。选取可随访97例食管癌患者纳入病例组分析,同时选取50例正常食管黏膜组织作为对照组。采用免疫组织化学SP法检测ERCC1、ERCC2在食管癌和正常黏膜组织中的蛋白水平表达,分析ERCC1和ERCC2表达与食管癌临床病理特征的相关性及与预后的关系。结果食管癌组织ERCC1、ERCC2表达阳性率分别为38.1%(37/97)、24.7%(24/97),正常食管黏膜组织中表达阳性率分别为52.0%(26/50)、42.0%(21/50)。ERCC1在正常黏膜组织中表达高于癌组织(P>0.05),ERCC2在正常黏膜组织中表达亦高于癌组织(P<0.05)。ERCC1、ERCC2表达与食管癌组织分化程度呈正相关,与性别、年龄、部位、肿瘤长度、浸润深度、病理类型、淋巴结转移以及TNM分期无相关性。ERCC1阳性表达的食管癌患者5年生存率为51.35%(19/37),ERCC1阴性表达的5年生存率26.67%(16/60),经Kaplan-Meier分析,两组差异有统计学意义(P<0.05)。ERCC2阳性表达的食管癌患者5年生存率为50.00%(12/24),ERCC2阴性表达的5年生存率31.51%(23/73),经Kaplan-Meier分析,两组差异接近统计学意义(P=0.070)。结论 ERCC1、ERCC2在正常食管黏膜组织中的表达均高于食管癌组织,且均与分化程度呈正相关。ERCC1阳性表达者预后优于阴性者,ERCC2阳性表达组则显示预后优于阴性表达组的趋势。
- 吕雅蕾刘巍左静王玉栋刘晓冯莉荆丽
- 关键词：食管癌ERCC1ERCC2预后免疫组化
- siRNA干扰ERCC2表达对食管癌细胞紫杉醇敏感性的影响
- 2009年
- 背景与目的:通过siRNA干扰沉默ERCC2基因,观察食管癌细胞株对紫杉醇敏感性的改变,初步探讨新的紫杉醇耐药可能机制。方法:体外合成靶向ERCC2的siRNA(si-ERCC2@;应用脂质体法瞬时转染ERCC2高表达细胞株KYSE150;应用RT-PCR和流式细胞术(FCM@分别检测转染组细胞ERCC2mRNA和蛋白的表达水平;应用MTT法检测转染前后细胞对紫杉醇敏感性的变化。结果:si-ERCC2组在转染后24、48、72h均未测出ERCC2特异性条带且ERCC2蛋白表达量分别下调了31.2%,51.6%和60.0%。si-ERCC2组紫杉醇IC50值为6.3±0.9μg/mL,较对照组降低49%。结论:siRNA成功封闭了目的基因ERCC2在转录和翻译水平的表达,封闭ERCC2表达能部分逆转紫杉醇耐药现象。
- 王玉栋崔志英左静冯莉吕雅蕾刘巍
- 关键词：食管癌细胞株ERCC2紫杉醇IC50
