国家科技支撑计划(2008BAI63B03)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：刘莹孙启鸿高建恩柳晓兰杨金菊更多>>
- 相关机构：军事医学科学院第二军医大学北京蛋白质组研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗人GPC3单克隆抗体在肝脏肿瘤组织学检测中的应用被引量：2
- 2010年
- 目的应用抗人GPC3单克隆抗体检测肝脏良、恶性肿瘤组织中GPC3蛋白的表达。方法采用自制鼠抗人GPC3单克隆抗体及免疫组织化学技术检测19例正常肝组织、94例肝细胞癌(HCC)组织、20例胆管细胞癌组织、42例肝脏良性肿瘤组织中GPC3蛋白的表达,并分析GPC3蛋白表达水平与HCC患者临床病理参数的关系。结果 GPC3蛋白在肝细胞癌组织中阳性率达到79.8%,而血管瘤旁正常肝组织、胆管细胞癌组织和肝脏良性肿瘤组织中均不表达,差异具有统计学意义(P<0.001)。HCC组织中GPC3蛋白的表达与血清AFP水平(P=0.020)、是否伴有门静脉癌栓(P=0.050)、有无包膜等因素相关(P=0.043)。结论抗人GPC3单克隆抗体可特异性检出肝细胞癌组织GPC3蛋白的表达,值得进一步研究以应用于临床诊治。
- 周赟谈冶雄胡栋平张蓓蓓王庆丛文铭王红阳
- 关键词：单克隆抗体肝肿瘤免疫组织化学
- 肝癌相关的单克隆抗体的制备及其抗原表位分析
- 2011年
- 目的:制备肝癌相关的单克隆抗体(mAb)用于肝癌的诊断。方法:用高转移肝癌细胞系HCCLM-6细胞免疫BALB/c小鼠后,取小鼠脾细胞与Sp2/0融合建立杂交瘤细胞系。通过ELISA法筛选HCCLM-6细胞蛋白的特异性mAb,用免疫组化染色法筛查对肝癌组织阳性率高的mAb,并用免疫荧光方法鉴定其在不同肿瘤细胞系中的表达,最后通过筛选Uni-ZAP XR人肝细胞cDNA表达文库初步鉴定mAb识别的抗原及其表位。结果:建立了28株杂交瘤细胞株,用ELISA法和免疫组化染色法筛选出肝癌阳性率较高的mAbQGA062。通过人肝细胞cDNA表达文库筛选初步鉴定表明mAb QGA062识别的抗原是纤维连接蛋白(FN),经分析其抗原表位位于肽段YTVSLVAIKGNQESPK。结论:获得与肝癌相关的mAb QGA062,并鉴定了其识别的抗原和表位,为肝癌的诊断和FN参与肝癌转移的机制研究提供了重要的制剂。
- 杨秉芬刘蓉刘莹杨金菊柳晓兰高建恩孙启鸿
- 关键词：肝癌单克隆抗体表位分析
- FHR4抗体的制备与初步鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的制备Complemen tfactorH4(FHR4/CFHL4)多克隆和单克隆抗体(mAb),并进行特性鉴定。方法以成人肝cDNA表达文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-FHR4和PET-32a-FHR4。GST-FHR4融合蛋白在大肠杆菌中高效表达,作为免疫原制备兔多抗和鼠单抗。采用ELISA法和Westernblot鉴定抗FHR4兔抗血清在重组蛋白和天然蛋白中的特异性。采用蛋白印迹,间接免疫荧光,免疫组化鉴定mAb的特异性。结果 GST-FHR4融合蛋白在相对分子质量约58000处呈现明显表达条带。Westernblot鉴定表明,制备的抗FHR4兔多克隆抗体可特异地识别成人肝总蛋白中相对分子质量约37000和45000的FHR4蛋白。获得2株可稳定分泌抗FHR4的杂交瘤细胞株可识别重组人FHR4蛋白,同时可特异性结合HepG2细胞浆中的蛋白和成人肝脏组织肝细胞浆中的蛋白。结论成功制备出兔抗人FHR4抗血清和2株抗FHR4的mAbs,为进一步研究FHR4的功能奠定了基础。
- 张迎春刘莹杨金菊柳晓兰迟俊刘静高建恩唐晓波朱大岭孙启鸿
- 关键词：COMPLEMENT原核表达多克隆抗体单克隆抗体
