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磷酸盐对Escherichia coli TRJH L-色氨酸发酵代谢流分布的影响被引量：8: 2009年; 应用代谢流分析方法研究了磷酸盐对Escherichia coli TRJH L-色氨酸发酵中后期胞内代谢流分布的影响.结果表明:在发酵中后期添加4.0,g/L,KH2PO4时,与不添加KH2PO4相比,L-色氨酸合成的代谢流增加了19.3%,而副产物Lac、HAc和Ala的代谢流仅增加了6.0%、7.8%和6.8%.与添加8.0,g/L,KH2PO4比较,副产物代谢流的增量明显减少,说明磷酸盐的过量添加会使EMP途径代谢流量超过TCA及L-色氨酸合成支路的代谢能力,从而导致副产物的生成增加,L-色氨酸生物合成的转化率相对降低.因此,在L-色氨酸发酵过程中应该严格控制磷酸盐的用量.; 赵春光谢希贤徐庆阳陈宁; 关键词：L-色氨酸线性规划代谢流分析磷酸盐

HPLC快速测定发酵液中L–色氨酸被引量：15: 2010年; 建立一种测定发酵液中L–色氨酸的高效液相色谱(HPLC)方法.以Agilent C18(5μm,150.mm×4.6.mm)为分离柱,V(0.03%的KH2PO4溶液)﹕V(甲醇)=90﹕10为流动相,流量为1 mL/min,在278.nm处检测L–色氨酸.该方法简便、快速、准确,在0.000～1.000.g/L范围内线性关系良好(R2=0.999 9),平均回收率为98.93%,精密度(RSD)为0.247%,可有效应用于发酵液中L–色氨酸含量的测定.; 程立坤徐庆阳谢希贤陈宁; 关键词：L-色氨酸 HPLC

丝状真菌产黄青霉DNA提取方法的改进被引量：4: 2010年; 为探索提取产黄青霉基因组DNA的简便方法,采用起始菌体量0.2 g,10 g/L十六烷基三甲基溴化铵裂解液,通过液氮/65℃反复冻融对菌种破壁,代替了液氮研磨,且不需要玻璃珠,操作简便,重复性好,提取的DNA质量高,极大地方便了后续基因操作.; 赵颖刘静戴梦郑桂珍章丽张佳王富强; 关键词：十六烷基三甲基溴化铵

阿维菌素发酵过程液流体特性分析被引量：3: 2010年; 本文对15L实验室规模发酵罐阿维菌素发酵过程主要特点,尤其是发酵液流体特性进行了研究。结果表明,阿维菌素发酵液总体为非牛顿流体,并满足剪切稀化特性,且随着发酵的进行,表观粘度和稠度系数K按一定的规律变化;而在搅拌转速一定的情况下,维持发酵液溶氧水平所需的通气量与发酵液的流变特性有紧密的关联性。较高的溶氧水平有利于获得较高效价的阿维菌素;但过高的溶氧会导致生物量迅速增长,如果控制不当,则将导致发酵液流变特性迅速恶化,并最终可能引起菌丝发糊现象的出现。因此对于高溶氧条件下的阿维菌素发酵过程,前期发酵液流体特性及反应器流场的监控非常必要。; 秦震方储消和陈中兵夏建业王永红; 关键词：阿维菌素流体特性非牛顿流体

大肠杆菌L-组氨酸生物合成途径的改造及其对工程菌L-组氨酸产量的影响被引量：1: 2011年; 改造大肠杆菌L–组氨酸生物合成途径,以提高L–组氨酸的产量.用NTG诱变大肠杆菌M-17(SGr),依次赋予其2–噻唑丙氨酸(2-TA)和组氨酸氧肟酸盐(HisHx)遗传标记,再以突变株M-18(SGr+2-TAr+HisHxr)基因组为模板,扩增组氨酸操纵子基因,构建出重组质粒pUC118-his-operon,将重组质粒导入突变株M-18(SGr+2-TAr+HisHxr)得到工程菌E.coli M-19(SGr+2-TAr+HisHxr/pUC118-his-operon).根据zwf和prs基因序列分别合成引物进行PCR扩增,PCR产物与载体pSTV28连接,构建重组质粒pSTV28-zwf、pSTV28-prs和pSTV28-zwf-prs,将重组质粒分别转化至工程菌E.coli M-19,摇瓶发酵测定重组工程菌L–组氨酸的产量.摇瓶发酵结果显示,L–组氨酸产量与对照株相比,工程菌E.coli M-19提高了4.5倍,双质粒系统重组工程菌E.coli MZH-19、E.coli MPH-19和E.coli MZPH-19分别提高了5.14、5.78、8.43倍.; 魏伟刘倩卢利宁谢希贤; 关键词：L-组氨酸大肠杆菌摇瓶发酵

接种方式对阿维菌素发酵过程的影响被引量：2: 2009年; 在摇瓶发酵中对除虫链霉菌的孢子接种工艺进行了初步研究，同时比较了孢子接种、常规的挖块接种和菌丝接种3种不同接种方式对除虫链霉菌菌体生长和细胞代谢参数的影响。实验结果表明：孢子接种的最适孢子接种量在4～6×10^6个／mL范围内，而不同接种方式导致了发酵过程除虫链霉菌营养物质消耗、PH值变化、菌丝形态以及效价等方面差异。孢子接种方式在摇瓶发酵中表现出明显优势，采用孢子接种方式获得最终阿维菌素的效价比常规的挖块接种方式提高10％以上，比菌丝接种方式提高了20％以上。; 姚小员储消和庄英萍梁剑光王永红储炬张嗣良; 关键词：除虫链霉菌阿维菌素接种方式

柠檬酸发酵过程中液化条件的影响被引量：4: 2011年; 为了更为精确地调控柠檬酸的发酵过程,作者对其原料玉米粉在不同的液化条件下的液化效果进行了研究。结果发现,在95℃、液固比3.17∶1、搅拌转速160 r/min的条件下,液化效率最高,18 min即可完成。加酶量、介质pH、液化时间的长短影响液化后糖液的成分,其中高加酶量、自然pH值条件、短时间液化均有利于糖液中溶磷、铁离子、锰离子保持在低浓度水平,这对柠檬酸的高产非常重要。; 代真真周勇刘玉伟满云张继学王永红; 关键词：玉米粉耐高温Α-淀粉酶液化

超声波辅助Urea-Free试剂结合热变性快速酶解蛋白质被引量：3: 2010年; 建立了一个超声功率-超声时间的安全区域,在此范围内进行超声波辅助酶解时,能避免超声波随机断裂蛋白质;在此安全区域内采用响应面法获得最佳超声功率和超声时间。建立了超声波辅助Urea-Free试剂结合热变性快速酶解蛋白质的方法,将蛋白质依次进行10min超声波浴辅助Urea-Free还原烷基化反应、90℃热变性15min,超声波辅助胰蛋白酶酶解15s。应用此快速酶解方法鉴定3种典型标准蛋白质(牛血清白蛋白、细胞色素C和肌红蛋白),在25min内达到与传统整夜酶解方法相同的鉴定结果,并获得更高的序列覆盖率。; 李雅萍李友元周新文陈长华张嗣良杨芃原; 关键词：超声波辅助热变性酶解质谱

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