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广东省重大科技专项(2005A20901004)
作品数:
1
被引量:7
H指数:1
相关作者:
冀君
张祥斌
李少璃
马静云
毕英佐
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华南农业大学
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李少璃
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张祥斌
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冀君
传媒
1篇
中国兽医科学
年份
1篇
2008
共
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H1N1亚型猪流感病毒HA基因的表达及单克隆抗体的制备
被引量:7
2008年
采用RT-PCR方法扩增了H1N1亚型猪流感病毒(SIV)广东株的血凝素(HA)基因,测序后对HA基因进行了生物信息学分析。将HA基因克隆到高效可溶表达载体pBCX上,成功构建重组表达质粒pBCX-HA。将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG进行诱导表达。诱导表达的HA融合蛋白分子质量约为94.0 ku,表达产物占菌体总蛋白的29.5%。经Western-blot分析证实可溶表达的融合蛋白与H1N1亚型猪流感病毒阳性血清具有良好的免疫反应性。用纯化的HA融合蛋白作包被抗原用于猪流感病毒单克隆抗体的筛选,成功筛选到2株针对HA蛋白抗原表位的单克隆抗体;ELISA结果表明,制备的SIV单克隆抗体ⅢF6A4C10与H1N1亚型SIV抗原具有特异的免疫反应性,为H1N1 SIV的鉴别诊断奠定了基础。
张祥斌
谢青梅
马静云
曹永长
冀君
李少璃
毕英佐
关键词:
H1N1亚型猪流感病毒
血凝素
单克隆抗体
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