国家教育部博士点基金(200805720004)
- 作品数：10 被引量：30H指数：4
- 相关作者：詹若挺何瑞陈蔚文黄琼林梁凌玲更多>>
- 相关机构：广州中医药大学教育部更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金广东省高等学校学科建设专项资金科研类项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 青天葵及其混伪品的rbcL基因序列鉴定研究(英文)被引量：6
- 2012年
- 本研究旨在利用植物DNA条形候选片段rbcL基因的序列信息鉴别青天葵及其混伪品。采用试剂盒法提取青天葵及其混伪品的叶片总DNA,一对通用引物应用于PCR扩增和双向测序。采用DNAMAN、CLUSTALX和MEGA4.0等软件进行序列拼接比对、遗传距离分析和聚类分析。获得的青天葵及其混伪品rbcL基因序列长度为502 bp,3个类型的青天葵序列完全一致,它们与毛叶芋兰之间存在5处差异;青天葵种内K2P遗传距离小于其与混伪品的种间K2P遗传距离;NJ聚类树显示,各物种均表现出单系性,并与其它物种相互区别。表明rbcL基因可用于鉴别青天葵及其混伪品。
- 黄琼林梁凌玲何瑞詹若挺陈蔚文
- 关键词：青天葵RBCL基因混伪品分子鉴别
- 青天葵EBP1基因原核表达载体的构建被引量：2
- 2012年
- [目的]构建青天葵器官大小调控基因——Erb3结合蛋白(Erb3-binding protein,EBP1)编码基因的原核表达载体,以期为通过原核表达体系鉴定该基因的功能奠定基础。[方法]将引入酶切位点的NfEBP1基因的PCR产物及表达载体pET-28、pET-16b分别进行双酶切,之后连接相应的酶切产物,热击转化到E.coli Top10细胞,通过菌落PCR、测序和酶切筛选阳性重组子。将确认的阳性重组子质粒转化至E.coli BL21表达宿主菌,并对其进行双酶切验证。[结果]构建了重组表达质粒pET-28-NfEBP1-1188和pET-16-NfEBP1-1188,其转化E.coli BL21表达宿主细胞后,分别获得含有2个载体的工程菌。[结论]该研究成功构建了青天葵EBP1基因的原核表达载体,为后续通过原核表达体系鉴定该基因的功能奠定了基础。
- 黄琼林何瑞詹若挺陈蔚文
- 关键词：青天葵原核表达载体
- 青天葵实时荧光定量PCR内参基因的选择被引量：7
- 2013年
- 目的筛选合适的内参基因用于青天葵实时荧光定量PCR分析的校正。方法以毛唇芋兰3个组织(叶片、叶柄和球茎)为材料,利用实时荧光定量PCR技术探讨18S rRNA、actin、ubiquitin、EF-1α和β-tubulin 5个常用内参基因在毛唇芋兰不同组织中表达差异。利用GeNorm和NormFinder软件比较各内参基因的Ct值,以分析他们在青天葵3个组织的表达稳定性。结果 5个内参基因的表达稳定性各异,GeNorm软件分析结果表明,稳定性β-tubulin=EF-1α>ubiquitin>actin>18S rRNA;NormFinder软件结果显示β-tubulin稳定性最好,EF-1α次之,18S rRNA则最差。两个不同软件分析结果一致。结论β-tubulin可作为毛唇芋兰不同组织中基因表达差异分析的校正内参基因。
- 黄琼林梁凌玲何瑞詹若挺陈蔚文
- 关键词：青天葵荧光定量PCR内参基因CT值基因表达
- 青天葵组培扩繁中的污染控制初探被引量：3
- 2010年
- 目的研究青天葵组织培养中的污染问题,并提出防治措施。方法通过对污染的青天葵材料使用无菌水,生理盐水(0.9%NaCl),0.1%升汞,漂渍液和消毒片(次氯酸钠)清洗,对感染植物消毒效果进行研究,并考察了次氯酸钠的灭菌浓度及灭菌时间。结果青天葵组培物使用5%次氯酸钠清洗10min效果较好,可基本抑制污染,植物材料仍能正常生长;升汞灭菌虽可较彻底抑制污染,但对植物伤害较大,只用于对感染的球茎灭菌。结论通过污染控制研究,能提高青天葵组织培养的成功率。
- 袁源何瑞詹若挺
- 关键词：青天葵抗污染
- 岭南道地药材青天葵的组织培养与植株再生被引量：3
- 2012年
- 以青天葵新鲜球茎为试材,对离体条件下青天葵的愈伤组织诱导及其植株再生进行研究。结果表明:0.1%升汞溶液处理青天葵球茎10min、玻璃培养皿有利于青天葵愈伤组织的诱导;青天葵走茎及愈伤组织在MS+1.0mg/L 6-BA培养基中培养可得到大量丛生芽及愈伤组织,多次继代培养可得到完整植株;将青天葵走茎接种于含有0.1%活性炭的MS培养基中可获得大量组培球茎。
- 张晓丽梁凌玲詹若挺何瑞
- 关键词：青天葵球茎再生植株
- 青天葵EBP1基因原核表达载体的构建(英文)被引量：1
- 2012年
- [目的]构建青天葵器官大小调控基因———Erb3结合蛋白(Erb3-binding protein,EBP1)编码基因的原核表达载体,以期为通过原核表达体系鉴定该基因的功能奠定基础。[方法]将引入酶切位点的NfEBP1基因的PCR产物及表达载体pET-28、pET-16b分别进行双酶切,之后连接相应的酶切产物,热击转化到E.coli Top10细胞,通过菌落PCR、测序和酶切筛选阳性重组子。将确认的阳性重组子质粒转化至E.coli BL21表达宿主菌,并对其进行双酶切进行验证。[结果]构建了重组表达质粒pET-28-NfEBP1-1188和pET-16-NfEBP1-1188,其转化E.coliBL21表达宿主细胞后,获得含有2个载体的工程菌。[结论]该研究成功构建了青天葵EBP1基因的原核表达载体,为后续通过原核表达体系鉴定该基因的功能奠定了基础。
- 黄琼林何瑞詹若挺陈蔚文
- 关键词：青天葵结合蛋白原核表达载体
- 应用matK基因鉴别青天葵及其常见混伪品被引量：8
- 2014年
- 分析了青天葵及其混伪品matK序列,以期在分子水平建立青天葵及其常见混伪品的鉴别方法。采用一对通用引物对matK基因进行PCR扩增并测序,所得序列用DNAMAN、MEGA等软件进行分析。获得青天葵及其混伪品的matK基因序列长度为587 bp,平均GC含量为32.8%。青天葵的种内遗传距离为0,与混伪品种间遗传距离范围为0.016～0.375。基于matK基因序列构建的NJ聚类树能明显地区别青天葵及其混伪品。因此,应用matK基因序列可以有效鉴别青天葵及其混伪品。
- 黄琼林梁凌玲何瑞詹若挺陈蔚文
- 关键词：青天葵MATK基因混伪品
- 基于条形码ITS2序列的青天葵及其混伪品分子鉴别被引量：6
- 2012年
- 通过分析青天葵及其常见混伪品的ITS2序列,建立青天葵新型真伪鉴别方法。采用植物基因组DNA提取试剂盒提取青天葵及其混伪品的叶片DNA,一对通用引物PCR扩增ITS2基因片段并直接双向测序。采用DNAMAN、ClustalX软件拼接比对序列,MEGA4.0软件构建NJ树,Schultz等建立的数据库和网站预测lTS2序列的二级结构。结果显示,获得的12条ITS2序列的长度范围为203-242 bp,GC含量范围为53.1%-71.8%。所有样品ITS2序列比对后的长度为249 bp,其中存在226个变异位点。青天葵种间K2P遗传距离(1.125)远大于种内K2P遗传距离(0.004)。基于ITS2的序列的NJ树和二级结构均能直观地区分青天葵及其混伪品。
- 黄琼林马新业何瑞詹若挺陈蔚文
- 关键词：青天葵分子鉴别
- 植物器官大小相关基因研究进展（英文）被引量：1
- 2013年
- 器官大小是植物形态的一个重要特征,而且具有严格的种属特异性。植物器官大小虽然受到外在的环境因素(如光照、营养等)的影响,但它是由内在特有的细胞数目和细胞大小决定的。许多基因能通过转录调节、蛋白合成、激素调节或松弛细胞壁等途径作用于植物细胞繁殖和/或细胞扩张,它们的过表达或缺失表达能改变植物器官大小和加快植物生长。尽管如此,这些基因是通过相对独立的途径起作用,在植物中难以阐明一个相对整合的器官大小基因调控网络,这也是亟待解决的问题。目前,一些与器官大小相关的基因已经应用于农作物育种,并培育出显著增大的农作物品种,这也证实了利用器官大小基因进行植物品种选育的可行性。因此,通过研究药用植物器官大小的基因,在分子水平上有目的地调控器官的大小和形态,是缓解当前许多药用植物面临的资源紧缺、枯竭、濒危困境的可考虑途径之一。
- 黄琼林何瑞詹若挺陈蔚文
- 关键词：基因细胞增殖
- 青天葵扩繁体系建立的研究进展被引量：3
- 2010年
- 查阅近5年相关文献,综合分析青天葵扩繁体系的研究成果及存在问题。对青天葵在品种鉴别、栽培技术等方面进行了较全面的总结。扩繁技术是青天葵药材资源可持续开发利用的重要保障,通过对以往文献的综述为建立可操作的青天葵扩繁体系,进一步实现工业化生产打下基础。
- 袁源何瑞詹若挺
- 关键词：青天葵人工栽培
