中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2008-08)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：张宇宏刘万利陈强张国华姚斌更多>>
- 相关机构：中国农业科学院生物技术研究所中国农业科学院饲料研究所兰州大学更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 冰川土壤来源Brachybacterium sp. DB5低温脂肪酶基因的克隆与表达被引量：5
- 2009年
- 从新疆一号冰川土壤来源的54株低温细菌中筛出11株产脂肪酶菌株,其中一株短状杆菌Brachybac-terium sp. DB5产脂肪酶活力较高。通过同源克隆和TAIL-PCR技术从Brachybacterium sp. DB5基因组DNA中克隆得到一个脂肪酶基因LipDB5。LipDB5基因全长933 bp,编码310个氨基酸和一个终止密码子,理论蛋白分子质量为34.8 kDa,无信号肽序列。将LipDB5基因在大肠杆菌中进行重组表达,重组脂肪酶最适反应温度30℃,在5℃时能保持最高活力的34.7%,对热不稳定,60℃处理30 min剩余17.4%酶活。研究结果表明LipDB5具有低温脂肪酶的性质,在低温生物催化领域具有潜在的应用前景。
- 刘万利张国华陈强杨培龙张宇宏姚斌
- 关键词：低温脂肪酶基因表达
- 来源于青霉菌聚半乳糖醛酸酶的筛选及其在大肠杆菌中的异源表达
- 2011年
- 聚半乳糖醛酸酶属于果胶水解酶类,在食品、饲料、纺织和造纸等工业生产中应用广泛。本研究筛选获得一株能分解果胶的青霉菌Penicilliumsp.FJ2,使用简并引物PCR和TAIL-PCR方法从该菌中克隆得到一个聚半乳糖醛酸酶基因pgp1。pgp1基因全长1225bp,包含2个内含子,其cDNA全长1104bp,编码367个氨基酸和一个终止密码子。将pgp1基因连接pET-30a(+)载体并转化大肠杆菌BL21(DE3),重组蛋白以包涵体形式获得表达。通过尿素溶解和梯度稀释方法对重组蛋白PGP1进行了重折叠复性试验,复性后的PGP1聚半乳糖醛酸酶活力达到12.9U/mL,比活力为5.83U/mg。
- 曹威周利伟张伟张宇宏
- 关键词：果胶酶青霉菌包涵体复性
