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浙江省医药卫生科学研究基金(20078052)
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
相关作者:
陈君柱
张芙荣
赵莉莉
尚云鹏
郭晓纲
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相关机构:
浙江大学医学院附属第一医院
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发文基金:
浙江省医药卫生科学研究基金
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相关领域:
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作者
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邱原刚
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2009
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诱导型一氧化氮合酶参与白细胞介素-1β对人心脏成纤维细胞基质金属蛋白酶-2作用的实验研究
被引量:1
2009年
目的观察白细胞介素-1β(IL-1β)对人心脏成纤维细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的作用及相关机制。方法将3—6代人心脏成纤维细胞接种于6孔培养板内接受各种干预措施。待实验细胞接受刺激12h后,用RT-PCR法观察MMP-2的mRNA表达量。细胞接受各种刺激24h后,收集细胞总蛋白和培养上清,通过凝胶酶谱法进行上清MMP-2的活性检测,采用Western blot法测定细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的表达,采用Griess法衡量细胞上清中一氧化氮(NO)水平。结果IL-1β作用人心脏成纤维细胞24h后,促进了细胞MMP-2的活性增加,其中4ng/ml的IL-1β刺激作用达到高峰,与对照组相比活性增加了(170.24±13.12)%(P〈0.01),并且该浓度IL-1β能时间依赖性地促进心脏成纤维细胞MMP-2的活性增加。IL-1β作用心脏成纤维细胞12h后,与正常对照组相比4ng/ml和10ng/ml IL-1β组MMP-2mRNA表达明显增加(P〈0.01)。IL-1β(4ng/ml)可以明显促进细胞NO水平升高(P〈0.01),而NOS抑制剂N^G-甲基-L-精氨酸(10^-3mol/L)显著抑制了IL-1β诱导的MMP-2mRNA表达(P〈0.01)、MMP-2活性(P〈0.01)以及NO水平的升高(P〈0.01)。通过Western blot发现在生理水平的心脏成纤维细胞上未能检测到iNOS蛋白的表达,而不同浓度的IL-1β明显促进了细胞iNOS的蛋白水平的升高。结论IL-1β能促进人心脏成纤维细胞MMP-2的mRNA表达和活性,并提示其作用与细胞iNOS-NO水平有关。
郭晓纲
陈君柱
朱建华
张芙荣
邱原刚
赵莉莉
尚云鹏
关键词:
心脏
白细胞介素-1Β
一氧化氮合酶
基质金属蛋白酶类
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