浙江省医药卫生科学研究基金(2012KYA061)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 相关作者：章伟朱发明吕杭军王炜和艳敏更多>>
- 相关机构：浙江省血液中心更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HLA-DPB1基因第2和第3外显子测序方法的建立及其多态性分析被引量：1
- 2015年
- 目的建立HLA-DPB1基因第2～3外显子测序方法，并分析其多态性。方法根据HLA-DPB1基因序列，设计位点特异性引物扩增242名浙江汉族人群HLA-DPB1第2～3外显子序列，PCR扩增产物经双酶切后对第2和3外显子进行双向测序分析，采用Assign3．5＋SBT分析软件判读HLA-DPB1等位基因型。结果PCR扩增获得特异性的单一目的片段，其产物经直接测序后得到清晰的序列图。242名浙江汉族人群中共检测到18个HLADPB1等位基因，频率超过0．05的等位基因为DPB1＊05：01：01／135：0l（0．4112）、DPB1＊02：01：02（0．1901）、DPB1＊04：01：01（0．1136）以及DPB1＊02：02（0．0620），并确认1个新等位基因DPB1＊168：01。在第3外显子中发现9个多态性位点，其中517A〉T为本实验新检出的1个多态性位点。结论本实验建立的HLA～DPB1第2～3外显子测序方法是可行的，HLA-DPB1第3外显子存在一定多态性。
- 和艳敏陶苏丹章伟王炜何吉朱发明吕杭军
- 关键词：多态性造血干细胞移植
- 人类白细胞抗原HLA-C＊04：01：01G组的区分鉴别被引量：1
- 2014年
- 本研究旨在区分人类白细胞抗原(HLA)-C*04:01:01G组内等位基因,并分析其与HLA-A、-B的连锁情况。通过收集HLA-C*04:01:01G组标本,采用多聚酶链反应序列分型法(PCR-SBT)分析HLA-C座位第2-7外显子序列,采用PCR-SBT方法对HLA-A、-B、-DRB1和-DQB1基因进行分型。结果表明:在189例HLA-C*04:01:01G组标本中,178例(94.2%)为HLA-C*04:01,11例(5.8%)为C*04:82;共检出HLA-C*04:01:01和C*04:82相关单体型72条,频率大于0.0050的单体型为26条;连锁分析显示HLA-C*04:01:01与A*02:03,A*02:07,A*11:01,A*33:03,B*13:01,B*15:01,B*15:05,B*15:27,B*40:01,B*54:01关联,而HLA-C*04:82与B*40:01关联。结论:HLA-C*04:01:01G组中存在HLA-C*04:01:01和HLA-C*04:82,在常规分型指定中应加以鉴别。
- 王炜陈男英章伟何俊俊韩浙东秦斐董丽娜朱发明吕杭军
- 关键词：HLA
- KIR3DL1启动子区域CpG岛甲基化对抗原表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的：探索KIR3DL1启动子区域CpG岛甲基化对抗原表达的影响。方法选择抗原高表达KIR3DL1＊01502和低表达KIR3DL1＊005样本，分别测定启动子区域碱基序列和启动子区CpG岛甲基化程度。对携带有KIR3DL1＊01502、KIR3DL1＊005的NK细胞分别采用5-aza进行去甲基化处理，利用流式细胞仪检测KIR3DL1抗原。结果 KIR3DL1＊01502和KIR3DL1＊005启动子区域－65和－269位存在碱基差异，这导致它们的启动子区域有两个不同的CpG岛。 KIR3DL1＊01502启动子区CpG岛高度甲基化，去甲基化后相应的细胞表面抗原表达显著增加。而携带KIR3DL1＊005的细胞去甲基化处理后，抗原表达没有明显变化。结论 KIR3DL1＊01502启动子区域CpG岛甲基化影响抗原的表达，但是不同抗原表达模式的KIR3DL1等位基因可能存在不同的调控机制。
- 陶苏丹和艳敏董丽娜章伟何吉朱发明吕杭军
- 关键词：杀伤细胞免疫球蛋白样受体甲基化启动子
- 用生物素标记探针和链亲和素磁珠分离HLA-A、-B、-C位点单体型
- 2014年
- 目的建立生物素标记探针和链亲和素磁珠分离人类白细胞抗原（humanleukocyteantigen，HLA）-A、-B、-C单体型的技术，以解决HLA分型过程中部分模棱两可的结果。方法根据IMGT／HLA数据库中HLA等位基因的序列信息，设计5’端生物素标记探针。将探针与104份标本基因组DNA混合杂交，然后加入链亲和素磁珠孵育，形成链亲和素磁珠一生物素探针一单链DNA复合物，通过洗涤和解析从而实施有效的分离。对分离出的单体型基因组DNA进行HLA-A、-B或-C位点扩增和测序分析。结果设计的12个HLA-A、19个HLA-B、13个HLA-C位点探针中，经测序证实分别有9个、9个、5个探针成功分离了单链DNA标本。结论建立的探针和磁珠分离HLAA、-B、-C单体型技术具有可行性，可以解决HLA测序分型中部分模棱两可结果，提高分型的准确性。
- 陶苏丹和艳敏章伟王炜何吉朱发明吕杭军
- 关键词：人类白细胞抗原生物素探针
