国家自然科学基金(31070112)
- 作品数：3 被引量：86H指数：3
- 相关作者：李彤彤李爱华张德锋郭玉娟樊海平更多>>
- 相关机构：中国科学院中国科学院大学福建省淡水水产研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划肇庆市科技创新计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 湖北地区暴发病池塘中嗜水气单胞菌的遗传多样性和毒力特征研究被引量：16
- 2013年
- 为了调查引起鱼类运动型气单胞菌败血症(俗称暴发病)的嗜水气单胞菌的遗传多样性和毒力特征,阐明其流行规律,研究于2006—2009年度从湖北省内3个不同地区的6个发病鱼塘中分离了30株嗜水气单胞菌,其中20株为临床株(分离自血液、肝脏、肾脏或腹水),6株为肠道株,4株为池水株。基于所有菌株gyrB基因序列,构建了系统发育树;通过ERIC(Enterobacterial repetitive intergenic consensus,肠道细菌基因间重复序列)指纹图谱进行菌株的遗传分型;用PCR方法检测了7个毒力基因在菌株中的分布模式。这7个基因包括气溶素(aerA)、溶血素(hlyA)、热不稳定性细胞兴奋性肠毒素(alt)、热稳定性细胞兴奋性肠毒素(ast)、弹性蛋白酶(ahpB)、脂酶(lip)和鞭毛基因(fla)。此外,以斑马鱼为感染对象,通过腹腔注射测定了15株代表菌株的毒力。结果表明:不同来源的20株临床株、1株肠道株和3株池水株具有相同的遗传特性,体现为在系统树上聚为一枝,序列相似性为100%,具有相同的ERIC指纹图谱,毒力基因分布模式为:aerA+hlyA+alt+ast+ahpB+lip+fla+,且均为强毒株(LD50<9.74×104cfu/尾)。与临床株相比,其余5株肠道株和1株池水株或具有不同的ERIC指纹图谱或具有不同的毒力基因分布模式,显示出了遗传多样性,且毒力均弱于临床株(LD50>1.01×106cfu/尾)。这说明在一定时间、一定区域内,作为暴发病病原的嗜水气单胞菌为同一克隆系在流行,不存在明显的变异或遗传多样性。此结果有助于阐明嗜水气单胞菌引起的暴发病的流行规律,制定相应的防御措施。多种毒力基因在致病性菌株中的联合流行为发病机理的解析奠定了基础。此外,鉴于毒力基因谱与致病性之间的相关性,表明毒力基因可作为标记基因,用于致病性菌株的检测。
- 张旭杰杨五名李彤彤李爱华
- 关键词：嗜水气单胞菌毒力基因毒力
- 中国南方地区罗非鱼无乳链球菌的分子流行病学研究被引量：68
- 2012年
- 从广东省以及海南省等地区养殖的患病罗非鱼体内分离、收集到多株致病菌,经生化分析和分子生物学鉴定,均为无乳链球菌。对这些菌株分别进行了耐药谱测定、分子分型试验以及分子血清型分析。药敏试验结果表明,2007—2010年分离到的无乳链球菌耐药谱基本相似;多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)试验中,选择5个高变异指数的可变数目重复位点(VNTR)进行分子分型,结果表明,所有鱼源无乳链球菌菌株为同一MLVA型,而作为对照的牛源无乳链球菌则明显不同;为了对这些菌株进一步分型,分别进行了分子血清型和表面蛋白抗原基因的检测,结果表明,鱼源无乳链球菌的分子血清型均为Ⅰa型,表面蛋白抗原均为alpha-C蛋白。这进一步说明了不同年份和不同地区的鱼源无乳链球菌在基因水平上为同一分子类型,具有相同的起源或传染源。同时也说明,我国南方地区罗非鱼无乳链球菌在这几年中未发生明显的遗传变异。这些结果为罗非鱼无乳链球菌病疫苗研制,疫病监测及药物防治的研究提供理论依据。
- 郭玉娟张德锋樊海平陈学年李彤彤李爱华
- 关键词：罗非鱼无乳链球菌MLVA
- 玉屏风散对鱼类非特异性免疫和免疫相关基因表达的影响被引量：3
- 2015年
- 为探究传统中药玉屏风散在水产养殖上的生物学功效,在基础饲料中分别添加2.5%、5%和10%的玉屏风散和1%的芪参散配成实验饲料,饲喂实验鱼2周,然后分别观察两种中药对罗非鱼(体重约220 g)的生长、非特异性免疫及免疫相关基因表达的影响以及对草鱼(体重约20 g)免疫保护率的影响。结果显示:各中药组均提高了罗非鱼增重率,10%玉屏风散组效果最显著;各实验组中罗非鱼肝、肾、脾体指数和各血液学指标与对照组无显著差异;各中药组罗非鱼谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)含量均不高于空白对照组;2.5%、10%玉屏风散组和1%芪参散组碱性磷酸酶(AKP)含量均高于对照组(P>0.05);各药物组罗非鱼溶菌酶活性均高于对照组,且2.5%玉屏风散组与对照组差异显著(P<0.05);玉屏风散各剂量组罗非鱼呼吸暴发活性均高于对照组(P>0.05);罗非鱼肝脏中热休克蛋白70(HSP70)在各实验组中表达量均上调,肾脏中HSP70在2.5%和5%玉屏风散组表达量上调,脾脏中HSP70在各实验组中表达量均下调;肝脏中转化生长因子受体TGFRⅢ在2.5%玉屏风散组表达量上调,肾脏中TGFRⅢ在2.5%玉屏风散组和1%芪参散组表达量上调,脾脏中TGFRⅢ在各实验组中表达量均上调;玉屏风散各剂量组能够提高草鱼对嗜水气单胞菌的抵抗能力,表现为死亡率降低和进入血液的细菌减少,其中5%玉屏风散组效果最佳。实验表明,玉屏风散能够有效促进罗非鱼生长,对其非特异性免疫指标以及免疫相关基因表达均有不同程度的促进作用,并能够有效地提高草鱼的免疫保护率。
- 张倩倩刘天强李彤彤徐静龙梦王谢昊龚小宁李爱华
- 关键词：罗非鱼玉屏风散生理生化指标非特异性免疫免疫基因免疫保护率
