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清华大学自主科研计划(2010THZ03)
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胡旭林
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清华大学自主科研计划
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胡旭林
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1篇
2013
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在人胚胎干细胞中高效表达PELO蛋白
2013年
以PELO全长cDNA为模板,采用TOPO克隆的方法,将人的PELO基因克隆到pENTR-D-TOPO载体上,形成pENTR-D-PELO克隆载体。然后通过同源重组将含有EF1α启动子的pENTR-5’-EF1α和pENTR-D-PELO重组到表达载体p2k7上,形成EF1α-PELO-p2k7表达载体。将构建好的PELO高表达载体在293FT细胞中制备成相应的慢病毒表达载体,并用慢病毒侵染人胚胎干细胞,最终成功实现在人胚胎干细胞中稳定且高效地表达PELO蛋白。
胡旭林
纪家葵
关键词:
胚胎干细胞
慢病毒
同源重组
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