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国家自然科学基金(30810103907)

作品数:11 被引量:27H指数:3
相关作者:马恩波张建珍郭亚平张学尧王跃更多>>
相关机构:山西大学山西省农业科学院山西省农业科学院农业环境与资源研究所更多>>
发文基金:国家自然科学基金中国博士后科学基金山西省农业科学院博士研究基金更多>>
相关领域:生物学农业科学环境科学与工程更多>>

文献类型

  • 9篇中文期刊文章

领域

  • 6篇农业科学
  • 4篇生物学
  • 2篇环境科学与工...

主题

  • 4篇稻蝗
  • 4篇转移酶
  • 4篇谷胱甘肽
  • 4篇飞蝗
  • 3篇中华稻蝗
  • 3篇硫转移酶
  • 3篇谷胱甘肽S-...
  • 3篇谷胱甘肽硫转...
  • 3篇谷胱甘肽硫转...
  • 2篇东亚飞蝗
  • 2篇镉(CD)
  • 2篇克隆
  • 1篇稻蝗属
  • 1篇毒性效应
  • 1篇序列分析及表...
  • 1篇氧化物歧化酶
  • 1篇液相
  • 1篇液相色谱
  • 1篇原核表达
  • 1篇色谱

机构

  • 8篇山西大学
  • 1篇山西农业大学
  • 1篇山西省农业科...
  • 1篇山西省农业科...

作者

  • 7篇马恩波
  • 5篇张建珍
  • 4篇郭亚平
  • 3篇张学尧
  • 2篇李丽君
  • 2篇王跃
  • 2篇郭艳琼
  • 1篇李清
  • 1篇张建琴
  • 1篇宣涛
  • 1篇王建新
  • 1篇吴海花
  • 1篇李大琪
  • 1篇秦雪梅
  • 1篇李涛
  • 1篇秦国华
  • 1篇武文丽
  • 1篇刘娇
  • 1篇刘平
  • 1篇刘婷

传媒

  • 3篇应用昆虫学报
  • 2篇中国农业科学
  • 2篇农业环境科学...
  • 1篇昆虫学报
  • 1篇Agricu...

年份

  • 1篇2019
  • 2篇2012
  • 4篇2011
  • 2篇2010
11 条 记 录,以下是 1-9
排序方式:
稻蝗属特异性SCAR分子标记的鉴定被引量:2
2010年
【目的】研究稻蝗属特异性DNA分子标记,为稻蝗属物种的分类鉴定提供快速有效的分子检测方法。【方法】基于稻蝗属物种及其近缘属种的大量RAPD-PCR结果,筛选出稻蝗属物种特异性的RAPD条带,对该特异RAPD条带进行克隆、测序。基于所测序列设计特异引物,以稻蝗属不同物种和蝗总科其它物种基因组DNA为模板进行PCR扩增。【结果】随机引物S823可在稻蝗属不同物种扩增出约650bp的RAPD条带,经对该条带的克隆、测序,发现在3个受试的稻蝗属物种中序列同源度达92.3%—96.6%,序列G+C含量大于15%,并富含大量的A、T重复区;基于已知序列设计的特异引物对稻蝗属7个物种可以扩增出目的条带(550bp),而对赤胫伪稻蝗及蝗总科其它物种均无扩增条带。【结论】鉴定了稻蝗属特异的RAPD条带,基于该条带序列设计的特异引物可用于稻蝗属物种的快速分子鉴定。
张建珍李大琪李涛马恩波郭亚平
关键词:稻蝗属RAPD-PCRSCAR分子标记
镉对中华稻蝗保护酶系统的毒性效应被引量:7
2010年
采用急性染毒方法研究Cd2+胁迫对不同发育阶段中华稻蝗SOD、CAT、POD活性的影响。结果表明,在Cd2+的作用下,不同发育阶段中华稻蝗体内SOD、CAT、POD活性均发生变化。SOD、CAT、POD 3种酶对Cd2+有一定的耐受性:当Cd2+浓度在这3种酶的耐受范围内酶活性提高,反之酶活性降低。Cd2+对不同发育阶段虫体3种抗氧化酶的影响不同:3龄若虫SOD、POD活性最高;雌性成虫CAT活性最低,而3龄雄性若虫CAT活性最高。
李丽君郭亚平武文丽王跃马恩波
关键词:中华稻蝗镉(CD)超氧化物歧化酶(SOD)
飞蝗LmGSTS2的酶学特性及其对马拉硫磷、p,p’-DDT的代谢分析被引量:1
2019年
【目的】将飞蝗(Locusta migratoria)谷胱甘肽硫转移酶sigma2(glutathione-S-transferases sigma2,LmGSTS2)在大肠杆菌中原核表达后进行纯化,研究LmGSTS2的酶学特性,并分析其对马拉硫磷和p,p’-DDT的代谢作用。结合飞蝗体内LmGSTs2的RNA干扰及杀虫剂生物学测定,评估LmGSTS2对杀虫剂的代谢解毒能力,为飞蝗抗性治理及合理施药提供理论依据。【方法】将LmGSTS2在BL21(DE3)中表达,通过Ni-NTA亲和层析对LmGSTS2进行纯化,以CDNB为底物检测LmGSTS2在不同温度和pH条件下的酶活性变化。在最适条件下(pH=7,27℃),用纯化的LmGSTS2蛋白与马拉硫磷和p,p’-DDT进行孵育,通过超高效液相色谱(UPLC)评估LmGSTS2对马拉硫磷和p,p’-DDT的代谢解毒能力。进一步将3μg ds LmGSTs2注入2龄飞蝗若虫体内,24 h后检测目的基因LmGSTs2的沉默效率,并结合杀虫剂生测试验分析飞蝗对杀虫剂敏感度的变化。【结果】将LmGSTS2在大肠杆菌中诱导表达,经SDS-PAGE检测后,发现与两个对照组pET28a/BL21(DE3)和未诱导的pET28a/BL21(DE3)-LmGSTS2相比,诱导后的pET28a/BL21(DE3)-LmGSTS2总蛋白在25 kD左右出现与目标蛋白大小相符的单一条带,表明LmGSTS2成功表达。对纯化后LmGSTS2蛋白的酶学特性研究结果表明,其最适反应pH范围为6—8,在pH=7时酶活性达到顶峰;最适反应温度范围为25—30℃,27℃时活性最高。在最适条件下,LmGSTS2分别与马拉硫磷和p,p’-DDT进行孵育。UPLC结果显示,与3个对照组相比(GSH+insecticide、active LmGSTS2+insecticide及inactive LmGSTS2+GSH+insecticide),LmGSTS2组马拉硫磷色谱峰面积分别降低83.6%、84.0%和84.6%,差异显著(P<0.05),而p,p’-DDT色谱峰面积与对照组相比无显著变化(P>0.05),说明LmGSTS2可对马拉硫磷进行代谢,对p,p’-DDT无代谢作用。进一步通过RNA干扰结合杀虫剂生测在飞蝗体内检测LmGSTS2蛋白对马拉硫磷的代谢解毒作用。将靶标基因的双链RNA注入2龄飞蝗若虫体内,2
马雯刘娇张学尧申国华秦雪梅张建琴
关键词:飞蝗谷胱甘肽硫转移酶超高效液相色谱
东亚飞蝗谷胱甘肽S-转移酶RNA干扰效率研究被引量:2
2011年
东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis(Meyen)是我国主要的农业害虫之一,已发现东亚飞蝗对某些农药产生了抗性,其抗性机制可能与谷胱甘肽硫转移酶(GST)代谢解毒相关。本研究利用特异性引物合成东亚飞蝗GST4个不同家族基因的双链RNA(dsRNA),将dsRNA注射到东亚飞蝗幼虫体内,采用Real time RT-PCR技术测定了干扰不同时间后目的基因mRNA的表达水平。结果表明,4个不同家族GST的沉默效应具有时间差异。来自delta家族的LmGSTd1和sigma家族的LmGSTs5基因在注射dsRNA后12h时mRNA量就已显著下降;而来自theta家族的LmGSTt1和unknown家族的LmGSTu1基因在注射24h后mRNA水平才呈现显著下降。本研究对后续东亚飞蝗GST功能及抗性机制研究提供了基础资料和依据,同时对其它昆虫RNA干扰研究具有一定的借鉴作用。
刘婷秦国华张建珍马恩波
关键词:谷胱甘肽硫转移酶东亚飞蝗RNA干扰
中华稻蝗谷胱甘肽S-转移酶的分离纯化被引量:3
2011年
采用硫酸铵沉淀法和GSH-agarose亲和层析法,对中华稻蝗Oxya chinensis(Thunberg)5龄若虫谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferases,GSTs)进行了分离纯化。结果表明:经硫酸铵沉淀,饱和度在60%~80%下沉淀中GSTs比活力较高,饱和度90%时比活力达到最高,为0.3046μmol/min/mg protein,纯化倍数为1.82。进一步经GSH-agarose亲和层析纯化后,比活力最高达到8.5185μmol/min/mg protein,纯化倍数为50.88。经SDS-PAGE电泳检测,呈现单一的条带,亚基的分子量约为25.4ku。此组分的纯化成功为进一步研究中华稻蝗谷胱甘肽S-转移酶的酶学性质、结构特点和作用原理提供了基础资料。
郭艳琼吴海花宣涛张建珍郭亚平马恩波
关键词:谷胱甘肽硫转移酶中华稻蝗纯化
东亚飞蝗羧酸酯酶基因的克隆和原核表达被引量:2
2012年
羧酸酯酶是昆虫体内重要的代谢解毒酶系,其主要功能是水解和结合内源性和外源性含有酯键的有毒物质,减缓其到达靶标部位的时间。东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis(Meyen)是我国重要的农业害虫,对其羧酸酯酶基因克隆和表达有助于深入探索杀虫剂代谢毒理机制。本研究首先对羧酸酯酶基因(CarE4)进行了克隆,并将其插入到pCold TF DNA Vector中,在大肠杆菌中进行了原核表达,最后用疏水层析和离子交换层析方法对目的蛋白进行了纯化。本文成功建立了羧酸酯酶蛋白原核表达和纯化技术体系,为进一步研究东亚飞蝗羧酸酯酶的生理功能、结构特点和作用原理提供了基础资料。
李清张学尧张建珍马恩波
关键词:羧酸酯酶东亚飞蝗克隆离子交换层析疏水层析
Expression and Characterization of a Sigma-Class Glutathione S-transferase of the Oriental Migratory Locust, Locusta migratoria manilensis (Meyen)
2011年
A cDNA encoding a sigma-class glutathione S-transferase of the locust, Locusta migratoria manilensis (LmGSTs1), was cloned by reverse transcriptase-polymerase chain reaction. The 830 bp-long cDNA encoded a 615 bp open reading frame (204 amino acid polypeptide), which exhibited the structural motif and domain organization characteristic of GST sigma-class. It revealed 59, 57, 57, and 56% identities to sigma-class GSTs from Blattella germanica, Gryllotalpa orientalis, Nasonia vitripennis, and Pediculus humanus corporis, respectively. A recombinant protein (LmGSTs1) was functionally expressed in Escherichia coli cells in a soluble form and purified to homogeneity. LmGSTs1 was able to catalyze the biotranslation of glutathione with 1-chloro-2,4-dinitrobenzene, a model substrate for GSTs, as well as with p-nitro-benzyl chloride. Its optimal activity was observed at pH 8.0 and at 30℃. Incubation for 30 min at temperatures below 50℃ scarcely affected the activity. The I50 of reactive blue (RB) was 18.5 μmol L-1. In the presence of 0.05 mmol L-1 ethacrynic acid (ECA), LmGSTs1 showed (81±3)% of the original activities.
JIA MiaoQIN Guo-huaLIU TingZHANG Jian-zhenZHANG Xue-yaoZHU Kun-yanGUO Ya-pingMA En-bo
关键词:GSTLOCUSTORTHOPTERA
飞蝗谷胱甘肽S-转移酶基因克隆、序列分析及表达特征被引量:5
2012年
谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)是一类广泛分布的多功能超家族酶系,其中Omega家族GST在昆虫体内担负重要生理功能。为探讨飞蝗Locusta migratoria Omega家族GST功能,利用RT-PCR技术克隆得到1条飞蝗谷胱甘肽S-转移酶Omega家族基因全长cDNA,命名为LmGSTo1(GenBank登录号:JQ750592)。该基因开放阅读框长738bp,编码245个氨基酸。该酶含有N-端和C-端2个结构域,N-端结构域由5个β-折叠和3个α螺旋组成,包括4个GSH结合位点;C-端结构域由8个α螺旋组成,含有5个底物结合位点。Real-timePCR结果表明,LmGSTo1在飞蝗不同龄期均有表达,在胃盲囊和中肠表达量较低,在前肠、马氏管、肌肉和脂肪体表达量较高;溴氰菊酯处理可导致LmGSTo1表达水平显著下降。这些结果为进一步研究LmGSTo1基因功能提供了依据。
张学尧王建新郭艳琼张建珍马恩波
关键词:飞蝗谷胱甘肽S-转移酶基因克隆
镉长期暴露对中华稻蝗抗氧化机制的影响被引量:6
2011年
采用生长于Cd2+污染条件下的小麦苗喂养中华稻蝗的慢性染毒方法,研究了Cd2+胁迫对中华稻蝗SOD、CAT、GPx活性和H2O2浓度的影响。结果表明,在Cd2+的作用下,中华稻蝗体内SOD、CAT、GPx活性和H2O2浓度均发生变化,表明Cd2+可导致中华稻蝗体内产生ROS。SOD、CAT、GPx3种酶对Cd2+有一定的耐受性:当Cd2+浓度在这3种酶的耐受范围内,酶活性提高,反之酶活性降低。Cd2+与抗氧化系统间的关系复杂,SOD、CAT、GPx共同承担清除ROS、保护中华稻蝗的重要作用。
李丽君郭亚平刘平王跃马恩波
关键词:镉(CD)
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