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聚乙二醇伴随式离子交换层析分离重组乙肝病毒表面抗原被引量：3: 2005年; 针对由中国仓鼠卵巢细胞(CHO)表达的多聚亚基蛋白HBsAg在离子交换层析过程中容易因亚基解离而导致蛋白解聚和丧失生物活性的难题,实验中选择聚乙二醇(PEG)作为保护剂伴随式(Polyethylene Glycol-Accompanied)离子交换层析分离纯化HBsAg。实验表明,在流动相中加入1%PEG10000(WV)作为纯化伴侣,HBsAg的回收率由55%左右提高到80%以上,纯化倍数基本保持在12左右。对纯化产物进行SDS_PAGE分析表明,1%PEG10000的纯化伴侣伴随式离子交换层析能全部保留HBsAg的糖基化蛋白单体(27kD和30kD),高效液相色谱联用多角度激光散射(High Performance Size Exclusion Chromatography-Multiangle Laser Light Scattering,HPSEC-MALLS)进一步分析阐明了PEG能促使HBsAg颗粒尺寸分布更均一,结构更接近天然乙肝表面抗原。; 闭静秀周卫斌李岩黄永东张焱董爱华苏志国; 关键词：聚乙二醇乙肝表面抗原离子交换层析

自动样品前处理在乳品中二恶英和共平面多氯联苯同时测定中的应用被引量：7: 2007年; 采用索氏提取及自动净化处理系统对乳品进行提取和净化，在高分辨气相色谱-高分辨双聚焦质谱仪（HRGC／HRMS）上进行定性和定量检测。在3种不同残留水平的奶粉样品中，17种多氯代二苯并-对二恶英和多氯代二苯并呋喃（PCDD／Fs）的测定结果与给定值具有很好的一致性，且所有具有保证值的二恶英同系物测定结果的相对标准偏差（RSD）均小于20％；12种共平面多氯联苯（PCBs）测定结果的RSD均在1596以内，内标物的回收率为44％～133％，完全符合国际标准方法的要求。母乳样品的国际考核结果表明本方法在不同实验室间具有良好的准确度和精密度。本方法定量准确可靠，适用于乳品中二恶英及共平面PCBs的同时检测。; 张磊李敬光吴永宁赵云峰; 关键词：同位素稀释二恶英多氯联苯

PEG沉淀结合层析分离重组乙肝病毒表面抗原被引量：6: 2006年; 应用聚乙二醇(PEG)沉淀结合层析技术纯化乙肝病毒表面抗原(HBsAg),对PEG浓度、pH值、离子强度等影响PEG沉淀的因素进行了正交实验研究.结果表明,浓度为0.12g/mL的PEG6000在4℃,pH9.0条件下沉淀HBsAg纯化效果比较理想,纯化倍数达3.7,回收率96.8%,有效地去除了生物大分子杂质和牛血清白蛋白(BSA),PEG在后续的凝胶过滤中可以除去,整个工艺的回收率可提高到41%.; 张焱闭静秀周卫斌李岩董爱华孙娟苏志国; 关键词：分离纯化

间臂和丁基密度对疏水层析分离纯化重组乙肝病毒表面抗原的影响: 2007年; 以国产高交联度的快流速琼脂糖为基质,合成了针对纯化中国仓鼠卵巢细胞表达乙肝病毒表面抗原(CHO-HBsAg)的不同间臂(3C、8C和10C)和不同配基密度的丁基疏水介质。配基密度的增加和间臂C链的延长都会增加介质的疏水性,从而影响其对CHO-HBsAg的分离效果。采用正交实验考察了配基密度、盐浓度、pH值三个影响因素对不同间臂疏水介质性能的影响。以分离CHO表达的乙肝病毒表面抗原(CHO-HBsAg)的收率和纯化倍数为主要指标。根据正交试验结果,分离效果最佳的介质间臂为8C、配基密度为22μmol/mL。该介质在硫酸铵浓度9%、pH7.0条件下,CHO-HBsAg的收率可以接近100%,纯化倍数达到60。; 李瑞红李岩闭静秀赵岚周卫斌黄永东张焱孙李靖王化军苏志国; 关键词：分离纯化正交试验

一种新型的琼脂糖疏水层析介质开发及其在重组乙肝表面抗原(CHO-HBsAg)分离纯化中的应用被引量：5: 2006年; 以粒径均一的国产高交联度快速流琼脂糖为基质,采用活化、交联等步骤合成了针对分离纯化CHO-HBsAg的3C间臂的丁基琼脂糖疏水介质,通过控制丁基配基密度提高分离HBsAg的纯化倍数和回收率,获得了纯化倍数约20、HBsAg回收率约80%的介质。评估了合成介质的理化性质,流速为500cm/h时柱压力小于0.06MPa,表明介质具有较高的机械强度和良好的流动性能,介质经过酸、碱、变性剂等处理后化学性质稳定。将介质合成工艺进一步放大到2L介质/批,应用到HBsAg分离纯化的三步层析整和工艺中,结果表明,批量合成的疏水介质,HBsAg回收率与进口介质相当,HBsAg终产品纯度在95%以上,符合国家药典要求。最后考察了介质合成批次间的配基密度的可控性和单批次合成介质的重复使用性,结果表明,合成工艺和介质的重复性能满足产业化要求,这种成本低的介质有望替代目前工业生产广泛使用的进口疏水介质。; 王阳木闭静秀赵岚周卫斌李岩黄永东张焱林海苏志国; 关键词：层析介质纯化

加强持久性有机污染物监测能力开展履行斯德哥尔摩公约成效评估被引量：4: 2008年; 1999年比利时因饲料发生二嘿英类（dioxins）污染动物性食品，造成14亿欧元的直接损失和政局不稳。20世纪因其污染引发的一系列灾难事件，如美国拉布卡纳尔镇、日本和中国台湾米糠油事件等，给持久性有机污染物（persistent organic pollutants，POPs）对于食品安全和生态环境的危害敲响了警钟。涉及POPs的论文数目和质量在环境类国际刊物中显著增加，已经在其长距离传输模型、复合效应和低剂量效应方面产生了一批有影响的成果。; 吴永宁李敬光; 关键词：持久性有机污染物公约生态环境动物性食品灾难事件

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国家高技术研究发展计划(2002AA217031)