您的位置： 专家智库 > >

广东省自然科学基金(07117550)

作品数：11 被引量：50H指数：4
相关作者：蒋义国沈月兰周兰兰刘林华杨巧媛更多>>
相关机构：广州医学院珠海市疾病预防控制中心江西省人民医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 11篇中文期刊文章

领域

  • 11篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 9篇细胞
  • 7篇上皮
  • 6篇支气管
  • 6篇支气管上皮
  • 6篇上皮细胞
  • 6篇气管
  • 6篇气管上皮
  • 6篇二羟环氧苯并...
  • 5篇支气管上皮细...
  • 5篇人支气管上皮
  • 5篇气管上皮细胞
  • 5篇基因
  • 4篇人支气管上皮...
  • 3篇转化细胞
  • 3篇小发夹RNA
  • 3篇恶性
  • 3篇恶性转化
  • 3篇恶性转化细胞
  • 3篇发夹
  • 3篇N-RAS

机构

  • 10篇广州医学院
  • 3篇珠海市疾病预...
  • 2篇江西省人民医...
  • 1篇广东医学院
  • 1篇华中科技大学

作者

  • 10篇蒋义国
  • 7篇沈月兰
  • 6篇周兰兰
  • 4篇刘林华
  • 3篇谭爱军
  • 3篇杨巧媛
  • 3篇傅娟
  • 2篇付娟
  • 2篇曹虹
  • 1篇居颖
  • 1篇陈学敏
  • 1篇纪卫东
  • 1篇段慧菡

传媒

  • 5篇环境与健康杂...
  • 2篇毒理学杂志
  • 1篇卫生研究
  • 1篇中华预防医学...
  • 1篇中华劳动卫生...
  • 1篇Biomed...

年份

  • 3篇2010
  • 4篇2009
  • 3篇2008
  • 1篇2007
共 11 条 记 录，以下是 1-10
全选 清除 导出
排序方式：
Ras基因家族在二羟环氧苯并(a)芘恶性转化细胞中的表达研究被引量：3
2008年
目的检测环境致癌物苯并(a)芘代谢物二羟环氧苯并芘(BPDE)对人支气管上皮细胞Ras基因家族表达的影响。方法以正常人支气管上皮细胞为对照组,经BPDE恶性转化人支气管上皮细胞为实验组,分别利用RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学方法,检测Ras基因家族在mRNA和蛋白水平表达变化。结果RT-PCR实验表明,BPDE恶性转化细胞H-Ras、K-Ras和N-Ras mRNA表达水平分别是正常细胞的2.237、1.254和3.616;Western blot实验显示,H-Ras、K-Ras和N-Ras蛋白表达量分别是正常细胞的1.273倍、1.547和1.600倍;免疫细胞化学实验表明,恶性转化细胞H、K和N-Ras蛋白表达明显强于正常细胞。结论BPDE诱发人支气管上皮细胞恶性转化存在H-Ras、K-Ras和N-Ras基因过表达。
周兰兰谭爱军蒋义国沈月兰傅娟
关键词：二羟环氧苯并芘人支气管上皮细胞苯并(A)芘
N-Ras基因表达沉默与二羟环氧苯并芘转化的人支气管上皮细胞生长的关系
2009年
目的构建N-Ras基因小发卡结构RNA(shRNA)干扰真核表达质粒载体,并初步观察其对二羟环氧苯并芘(BPDE)转化的人支气管上皮细胞(16HBE-T)生长的影响。方法根据GenBank提供的N-Ras cDNA序列,设计并合成shRNA寡核苷酸片段,与含U6启动子的pGPU6/GFP/Neo质粒定向连接,构建4个真核表达载体,并经限制性内切酶酶切和DNA测序进行鉴定。转染16HBE-T细胞48 h后,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测重组质粒对N-Ras基因表达的影响;用噻唑蓝法(MTT)观察重组质粒对细胞生长的抑制作用。结果构建了4个N-Ras shRNA真核表达载体,经限制性内切酶酶切和DNA测序证实与设计完全一致。构建的4个表达载体pGPU6/GFP/Neo-NRas-566、pGPU6/GFP/Neo-NRas-305、pGPU6/GFP/Neo-NRas-613和pGPU6/GFP/Neo-NRas-791分别转染16HBE-T细胞48 h后,RT-PCR显示N-Ras基因mRNA表达水平依次下调95%、70%、92%和60%;Western blot显示蛋白表达依次降低92%、45%、58%和34%。MTT发现16HBE-T细胞的生长受到明显抑制,且与N-Ras基因表达水平正相关。结论成功构建了N-Ras基因特异性shRNA真核细胞表达载体,有效沉默了N-Ras在16HBE-T细胞中的表达,抑制了恶性转化细胞的生长。
周兰兰蒋义国谭爱军沈月兰刘林华杨巧媛
关键词：二羟环氧苯并芘RNA干扰小发夹RNAN-RAS
N-Ras基因靶向的shRNA抑制二羟环氧苯并芘诱导的恶变细胞增殖
2009年
目的用小发卡RNA(small hairpin RNA,shRNA)干扰技术沉默N-Ras基因表达,探讨N-Ras基因表达对二羟环氧苯并芘(BPDE)转化人支气管上皮细胞(16HBE-T)恶性性状的影响。方法将已建立的针对N-Ras基因的shRNA干扰表达质粒载体pGPU6/GFP/Neo-NRas-566转染16HBE-T细胞,经G418筛选,建立稳定沉默N-Ras基因转化细胞系。采用Western blot筛选最佳N-Ras基因沉默细胞系,用流式检测N-Ras沉默细胞周期变化,用软琼脂实验和裸鼠成瘤实验进行细胞表型分析。结果成功培养出稳定沉默N-Ras基因的16HBE-T细胞系,Western blot显示N-Ras蛋白抑制率最高达86%。流式分析发现稳定沉默N-Ras基因表达诱导转化细胞G0/G1期捕获,软琼脂实验和裸鼠成瘤实验发现稳定沉默N-Ras基因降低了体外恶性转化细胞的集落形成率、抑制了体内肿瘤细胞生长。结论N-Ras基因沉默可以降低转化细胞的细胞周期进程和细胞恶性性状表型,提示N-Ras基因在二羟环氧苯并芘诱导细胞恶变过程中具有重要作用。
周兰兰蒋义国谭爱军沈月兰刘林华杨巧媛
关键词：二羟环氧苯并芘小发夹RNAN-RAS基因
二羟环氧苯并芘恶性转化细胞的microRNA表达谱被引量：2
2008年
目的检测二羟环氧苯并芘（BPDE）恶性转化细胞的microRNA（miRNA）表达谱，寻找恶性转化细胞与对照细胞差异表达的miRNA。方法以溶剂二甲亚砜助溶的终浓度为2．0μmol／L的BPDE培养液培养人支气管上皮细胞株16HBE，获得BPDE恶性转化的细胞模型为实验组，同时，以含二甲亚砜的培养液培养正常16HBE作为对照组。通过微阵列技术检测实验组与对照组327个人类miRNA，并选择差异表达明显的miR-10a和miR-320用反转录荧光定量PCR方法对微阵列结果加以验证。结果获得2组细胞327个miRNA表达谱，发现差异表达miRNA55个，其中46个表达上调，9个表达下调，并得到反转录荧光定量PCR的验证。结论获得BPDE恶性转化细胞与正常16HBE细胞差异表达的miRNA，为进一步寻找BPDE恶性转化细胞特征性miRNA提供了研究基础。
蒋义国沈月兰付娟周兰兰曹虹
关键词：二羟环氧苯并芘上皮细胞细胞恶性转化微阵列分析
MicroRNA Expression Profiles and MiR-10a Target in Anti-benzo[a] pyrene-7,8-diol-9,10-epoxide-transformed Human 16HBE Cells被引量：26
2009年
Objective To screen miRNA profiles of malignantly transformed human bronchial epithelial cells, 16HBE-T, induced by anti-benzo[a]pyrene-trans-7,8-diol-9,10-epoxide （anti-BPDE）, and to analyze putative miR-10a targets in 16HBE-T. Methods A novel microarray platform was employed to screen miRNA profiles of 16HBE-T cells transformed by anti-BPDE. Microarray data for miR-10a and miR-320 were validated using quantitative real time polymerase chain reaction （QRT-PCR）. The expression of a putative target for miR-10a, HOXA1, was analyzed by reverse transcription polymerase chain reaction （RT-PCR） and QRT-PCR. Results In comparison with the vehicle-treated cells （16HBE-N）, 16HBE-T exhibited differential expression of 54 miRNAs, in which, 45 were over-expressed and 9 were down-regulated. The five most highly expressed miRNAs were miR-494, miR-320, miR-498, miR-129, and miR-106a. The lowest expressed miRNAs were miR-10a, miR-493-5p, and miR-363＊. Three members of miR-17-92 cluster, miR-17-5p, miR-20a, and miR-92, showed significantly higher abundance in 16BHE-T as miR-21, miR-141, miR-27a, miR-27b, miR-16 and miRNAs of the let-7 family. The putative target for miR-10a, HOXA1 mRNA was up-regulated 3-9-fold in 16HBE-T, as compared with 16HBE-N. Conclusion The findings of the study provide information on differentially expressed miRNA in malignant 16HBE-T, and also suggest a potential role of these miRNAs in cell transformation induced by anti-BPDE. HOXA1 is similarly up-regulated, suggesting that miR-10a is associated with the process of HOXA 1-mediated transformation.
YUE-LAN SHENYI-Guo JIANGANNE R. GREENLEELAN-LAN ZHOULIN-HUA LIU
关键词：MICRORNA
苯并[a]芘暴露的小鼠原代支气管上皮细胞中miR-320对细胞周期的影响被引量：8
2010年
目的检测miR-320在苯并[a]芘(B[a]P)暴露的小鼠原代支气管上皮细胞的表达水平,探讨B[a]P染毒的小鼠支气管上皮细胞中miR-320对细胞周期的影响。方法以1.00μmol/LB[a]P染毒原代培养小鼠支气管上皮细胞。以定量PCR检测染毒细胞中miR-320的表达。以FACSArray流式液相芯片分析仪检测细胞周期和细胞周期素依赖性激酶6(CDK6)的表达水平。结果 miR-320在B[a]P染毒细胞中表达上调。染毒细胞出现G1期阻滞现象,与溶剂对照组的[(62.70±1.54)%]G1期细胞比例相比,(84.28±0.36)%的细胞停留在G1期。抑制miR-320表达后G1期阻滞现象缓解。染毒细胞中的CDK6表达降低,抑制miR-320表达后,与B[a]P组相比,CDK6的表达量有(2.0±0.3)倍的升高。结论 miR-320在一定程度上通过对CDK6表达的调控影响B[a]P暴露的细胞的细胞周期。
段慧菡蒋义国
关键词：苯并[A]芘原代细胞培养支气管上皮细胞细胞周期
二羟环氧苯并芘对人支气管上皮细胞N-Ras基因表达的影响被引量：2
2007年
目的探讨环境致癌物苯并(a)芘代谢物二羟环氧苯并芘(BPDE)对人支气管上皮细胞N-Ras基因表达的影响。方法利用RT-PCR和Western blot方法,分别检测N-Ras基因在经BPDE恶性转化细胞中mRNA和蛋白表达水平的变化。利用免疫细胞化学方法检测N-Ras基因在经BPDE恶性转化细胞中定位和蛋白表达量的变化。结果RT-PCR和Western blot实验表明,BPDE恶性转化细胞N-Ras基因的mRNA和蛋白水平分别是正常细胞的3.616和1.600倍。免疫细胞化学实验显示,在BPDE恶性转化细胞和正常细胞中,N-Ras基因在细胞膜和细胞浆中均有表达,且两者相比,前者中的N-Ras蛋白表达明显强于后者。结论N-Ras基因可能在BPDE的致癌机制中起着重要作用。
周兰兰蒋义国沈月兰傅娟曹虹
关键词：空气污染N-RAS基因二羟环氧苯并芘人支气管上皮细胞
结晶型硫化镍对人支气管上皮细胞PTEN基因和miR-22表达的影响被引量：7
2010年
目的分析结晶型硫化镍(NiS)诱导转化人支气管上皮细胞第35代(16HBE-T35)及其前期第18代细胞(16HBE-T18)PTEN基因及miR-22的表达水平,探讨PTEN基因与miR-22在化学致癌过程中的相互关系。方法以16HBE-T35和16HBE-T18细胞为实验组,蒸馏水处理组分别为其相应的对照细胞(16HBE-N35和16HBE-N18),用茎环结构逆转录引物实时定量RT-PCR检测4种细胞miR-22成熟体表达量。运用实时定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测四种细胞PTEN mRNA和蛋白表达量。结果 16HBE-T18细胞和16HBE-T35细胞中miR-22的表达水平分别是16HBE-N18细胞的(0.27±0.09)倍和(3.50±0.31)倍。16HBE-T35细胞的PTEN蛋白表达水平是16HBE-N35细胞的(0.48±0.26)倍,但16HBE-T18细胞和16HBE-N18细胞之间PTEN蛋白表达水平无明显差异。结论在NiS诱导的恶性转化细胞16HBE-T35中,PTEN蛋白表达水平下降,而miR-22表达水平增高。恶性细胞中,miR-22可能在转录后影响PTEN蛋白的表达。
刘林华蒋义国纪卫东杨巧媛
关键词：MICRORNAPTEN基因人支气管上皮细胞
反式-7,8-二羟-9,10-环氧苯并芘诱导恶变细胞中miR-494和miR-22的功能及PTEN的表达被引量：10
2010年
目的分析反式-7,8-二羟-9,10-环氧苯并芘(anti-BPDE)诱导转化人支气管上皮细胞第30代(16HBE-T30)及其前期第15代细胞(16HBE-T15)miR-494及miR-22的表达水平,探讨其在化学致癌过程中的作用及对靶基因PTEN抑癌基因的调控。方法以16HBE-T30和16HBE-T15细胞为实验组,溶剂处理组分别为其相应的对照组细胞(16HBE-N30和16HBE-N15),用茎环结构逆转录引物定量RT-PCR检测四组细胞miR-494及miR-22成熟体表达水平。运用定量RT-PCR和Western blotting分别检测四组细胞PTEN mRNA和蛋白表达水平。运用miRNA前体及抑制剂对miNRA表达进行调控后,再检测PTEN的表达改变,并进行报告基因信号改变、细胞凋亡、软琼脂集落形成率等分析。结果 16HBE-T30中miR-494和miR-22表达水平分别是16HBE-N30的12.6和2.3倍,而16HBE-T15中miR-494、miR-22表达水平较16HBE-N15下降。16HBE-T30中PTEN蛋白表达量低于16HBE-N30。与前体阴性对照组相比,上调的miR-494和miR-22分别将PTEN蛋白的表达量降低至0.8和0.5倍,而降低的miR-494和miR-22分别将PTEN蛋白的表达量上调至1.3和1.5倍。在16HBE-T30细胞中,miR-494和miR-22表达下调均增强caspase-3/7活力,miR-494和miR-22表达上调则减弱其活力。miR-494和miR-22下调能够降低转化细胞的恶性程度。结论 anti-BPDE恶性转化细胞中miR-494和miR-22在转录后水平反向调控靶基因PTEN的表达,这两种miRNA在anti-BPDE致癌过程中发挥类癌基因作用。
刘林华蒋义国
关键词：PTEN基因人支气管上皮细胞
二羟环氧苯并芘恶性转化细胞miR-10a及其靶基因HOXA1的表达改变
2008年
目的检测二羟环氧苯并芘恶性转化细胞miR-10a表达水平,探讨其与靶基因HOXA1癌基因的关系。方法以正常支气管上皮细胞为对照组,二羟环氧苯并芘恶性转化细胞为实验组,用茎环结构逆转录引物逆转录,定量PCR检测两组细胞miR-10a表达水平。运用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、定量PCR和流式细胞术间接法检测2组细胞HOXA1 mRNA和蛋白表达水平。结果二羟环氧苯并芘恶性转化细胞miR-10a表达水平是对照组的0.01倍,RT-PCR HOXA1 mRNA是对照组的(3.12±0.23)倍,定量PCR HOXA1 mRNA是对照组的8.75倍,HOXA1蛋白表达是对照组的3.48倍。结论二羟环氧苯并芘恶性转化细胞miR-10a可能反向调控靶基因HOXA1的表达。
沈月兰蒋义国周兰兰付娟
关键词：二羟环氧苯并芘恶性转化细胞
全选 清除 导出
共2页<12>
聚类工具0