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RNAi对HCV ns5b基因表达的抑制作用被引量：8: 2003年; 目的 :研究RNAi(RNAinterference)效应对HCVns5b基因表达的抑制作用 .方法 :根据HCVns5b基因序列及其二级结构特征 ,依据Tuschl等设计siRNA的原则 ,确定并合成了针对ns5b基因的siRNAs;利用电转化方法将合成的siRNAs转染NS5B EGFPHepG2细胞株 ,以未转染的细胞为对照 ;细胞爬片后经DAPI染色 ,荧光显微镜下观察和半定量RT PCR法检测siRNAs的抑制效应 .结果 :化学合成的siRNAs可以抑制HCVns5b基因的表达 ,效率可达 70 %-80 %以上 .结论 :在细胞水平上 ,化学合成的siRNAs可以抑制HCVns5b基因的表达。; 雷迎峰薛小平尹文张伟吕欣; 关键词：C型肝炎样病毒属

牵拉培养对表皮细胞生长及EGF分泌的影响被引量：7: 2004年; 目的:研究牵拉培养对表皮细胞生长的影响以及内源性EGF的分泌情况。方法:用酶消化法对表皮细胞进行原代培养,将实验分为二组:实验组和对照组,实验组采用细胞负压牵引装置培养,对照组细胞不受牵拉,连续观察72小时,分别于12、24、36、48、60、72小时,收集细胞培养液,同时于72小时观察表皮细胞在牵拉条件下和非牵拉条件下的生长情况;用ELISA法测定表皮细胞在牵拉条件下和非牵拉条件下分泌EGF的情况。结果:实验组表皮细胞经72小时牵拉后生长良好,而对照组的细胞死亡,实验组牵拉36小时EGF浓度为16.03pg/mL,其他时间点未测到,而非牵拉组各时间点均未测出EGF。结论:牵拉不但可促进表皮细胞的增殖和生长,而且可促进表皮细胞分泌EGF。; 贾平郭树忠张琳西陈富林易成刚; 关键词：皮肤扩张术表皮细胞表皮生长因子应力

机械应力对培养人皮肤成纤维细胞增殖细胞核抗原的表达的影响被引量：1: 2003年; 目的:研究牵拉幅度为40%的单次持续牵拉作用于培养的人皮肤成纤维细胞对细胞增殖影响。方法:体外培养人正常皮肤成纤维细胞,将细胞转移至牵拉细胞培养模型中的弹性膜上,待细胞贴壁达75%-80%融合时,实施40%单次持续牵拉,用WESTERN-BLOT对牵拉组与非牵拉组48h的增殖细胞核抗原(PCNA)表达进行检测。结果:牵拉组PCNA可见阳性表达而对照组结果呈阴性。结论:单次40%持续牵拉可以引起细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达,应力可以促进细胞增殖。; 舒茂国郭树忠韩岩杨力张琳西贾平夏文森; 关键词：人皮肤成纤维细胞增殖细胞核抗原细胞增殖

丙型肝炎病毒ns5b基因的克隆、表达及鉴定被引量：4: 2003年; 目的 :构建HCVns5b基因的重组原核表达质粒 ,并获得NS5B蛋白的高效表达 ,为制备抗NS5B抗体及以其为靶位的抗HCV感染研究创造条件 .方法 :利用PCR技术扩增HCVns5b基因 ,XhoⅠ和KpnⅠ双酶切后连接到经同样酶切的原核表达载体pRSETA上 ,转化大肠杆菌JM 10 9菌株 ,获得阳性重组质粒pRSETA ns5b ,阳性质粒转化BL2 1(DE3) ,IPTG诱导表达 ,表达产物经SDS PAGE和WesternBlot电泳进行鉴定 ,并以薄层扫描分析对其定量 .结果 :成功构建了HCVNS5B蛋白表达载体 pRSETA ns5b,经诱导明显表达出6His NS5B融合蛋白 ,表达产物主要以包涵体形式存在 ,表达量占菌体蛋白 2 5 % ,Western Blot结果显示表达蛋白保持活性 .结论 :HCVNS5B蛋白在体外得到了有效表达 .; 刘卫东薛小平雷迎峰尹文吕欣; 关键词：C型肝炎样病毒属重组融合蛋白质类基因表达

E-钙粘素在扩张皮肤组织中的表达被引量：2: 2006年; 目的:研究E-钙粘素在扩张皮肤组织中的表达。方法:利用免疫组织化学技术S-ABC法,对人扩张皮肤和正常皮肤E-钙粘素的分布和表达进行测定,并对结果进行图像分析。结果:扩张皮肤和正常皮肤表皮基底层均有E-钙粘素的表达和分布,但扩张皮肤中的E-钙粘素的分布和表达较明显,染色较深且密,部分阳性细胞呈多层排列;对正常皮肤和扩张皮肤的相对灰度值和阳性细胞密度的图像分析,进一步证实了上述观察结果。结论:扩张皮肤表皮细胞E-钙粘素表达增加,推测E-钙粘素可能在扩张皮肤细胞增殖过程中发挥一定的作用。在扩张刺激的作用下,表皮细胞内的E-钙粘素被大量表达,推测钙粘素可以增加细胞间粘附,并把机械信号传递给细胞内,激活下游分子,进而引起细胞的增殖,最终实现皮肤的扩张。; 周庆红郭树忠舒茂国易成刚张琳西鲁开化; 关键词：皮肤软组织扩张术 E-钙粘素表皮细胞免疫组织化学

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陕西省自然科学基金(2001SM51)