广西大学博士科研启动基金(DD160008)
- 作品数：4 被引量：13H指数：3
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- 木豆种子酸性磷酸酯酶AcPase I的部分纯化和动力学特性被引量：5
- 2007年
- 以萌发的木豆种子为材料,经过匀浆、硫酸铵分部（20%-60%饱和度）沉淀、DEAE-Sephadex A25离子交换与凝胶柱层析,可得到两个酶活力峰AcPase I和AcPase。将AcPase I过HA和ConA-Sepharose 4B柱层析后,被纯化了51.3倍,比活性为10.80U/mg。AcPase I经PAGE和SDS-PAGE分析都呈现单一蛋白酶带,证明Ac-Pase I是单亚基蛋白酶,其亚基分子量约为32kDa。以对硝基苯磷酸作底物时,AcPase I最适pH为4.0,最适温度为50℃,Km为2.48mmol/L,专一性常数为1.47U/mM.mg,AcPase I对焦磷酸有最小的米氏常数0.15mmol/L,有最大的专一性常数74.63 U/mM.mg。因此,AcPase I的这些动力学特性可为今后进一步研究提供理论依据。
- 杨杰董登峰王永峰
- 关键词：木豆酸性磷酸酯酶纯化动力学
- 大豆磷酸烯醇式丙酮酸磷酸酯酶(PEPP)研究:I.对非生物胁迫的反应被引量：5
- 2005年
- 对缺磷、铝毒、盐、干旱、Fe、Mn、Cu、Zn胁迫下大豆根系和叶片磷酸烯醇式丙酮酸磷酸酯酶(PEPP)活性进行了测定,结果表明:(1)长期缺磷和铝毒胁迫可显著提高大豆根系的PEPP活性,并表现出加成效应;(2)长期铝毒、缺磷和铝毒耦合胁迫也显著提高大豆敏感品种BL2叶片的PEPP活性;(3)盐胁迫、干旱以及长期Fe、Mn、Cu、Zn过量都显著提高大豆根系的PEPP活性,Fe、Cu、Zn缺乏则对根系和叶片的PEPP活性影响不大,长期缺Mn显著降低大豆根系及叶片的PEPP活性。
- 董登峰江立庚杨杰陈念平
- 关键词：大豆非生物胁迫
- 大豆磷酸烯醇式丙酮酸磷酸酯酶(PEPP)研究:Ⅱ.纯化与特性被引量：2
- 2005年
- 从大豆叶片中分离磷酸烯醇式丙酮酸磷酸酯酶(phosphoenolpyruvate phosphatase,PEPP),通过硫酸胺分部(20%～50%饱和度)沉淀、DEAE-纤维素层析、羟基磷灰石层析将酶纯化了96.81倍,酶活性达17.91 U/mg蛋白.该酶专一性较强,米氏常数(Km)为0.39 mmol/L(PEP),最适pH 6.8,在pH6.0～7.4范围内及50℃以下较稳定,被Mg2+、Mn2+激活,F-、Cu2+、Zn2+、PO43+、MoO42-抑制.
- 董登峰江立庚杨杰陈念平
- 关键词：大豆纯化
- 大豆磷酸烯醇式丙酮酸磷酸酯酶研究 Ⅲ、非专一性酸性磷酸酯酶的纯化与特性被引量：7
- 2005年
- 从大豆叶片中分离能水解磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)的酸性磷酸酯酶,通过硫酸胺分部(20%～50%饱和度)沉淀、DEAE纤维素层析、刀豆球蛋白琼脂糖凝胶亲和层析将酶纯化了422.47倍,活性达78.16U/mg蛋白。该酶对PEP专一性不强,Km为1.09mmol/L(PEP),最适pH5.8,在pH4.8～7.0范围内及60℃以下较稳定,水解PEP的活性被Mg2+、Mn2+激活,F、Cu2+、Zn2+、PO43、MoO42及3磷酸甘油酸(3PGA)、三磷酸腺苷ATP等代谢物抑制,受异柠檬酸等有机酸影响较小。
- 董登峰杨杰江立庚陈念平
- 关键词：大豆纯化
