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国家自然科学基金(81072828)

作品数：10 被引量：102H指数：6
相关作者：苏友新闫虎张庆陈宝军林学义更多>>
相关机构：福建中医药大学福州市第二医院福建卫生职业技术学院更多>>
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文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 10篇医药卫生

主题

  • 6篇软骨
  • 6篇软骨细胞
  • 6篇骨细胞
  • 5篇关节
  • 4篇壮骨
  • 3篇蛋白
  • 3篇退变
  • 3篇骨关节
  • 3篇骨关节炎
  • 3篇关节软骨
  • 3篇关节软骨细胞
  • 3篇关节炎
  • 3篇CAVEOL...
  • 2篇蛋白酶
  • 2篇信号
  • 2篇信号通路
  • 2篇人软骨细胞
  • 2篇体外
  • 2篇体外分离
  • 2篇体外培养

机构

  • 9篇福建中医药大...
  • 1篇福州市第二医...
  • 1篇福建卫生职业...

作者

  • 8篇苏友新
  • 7篇闫虎
  • 6篇陈宝军
  • 6篇张庆
  • 3篇张子怡
  • 3篇王艺茹
  • 3篇周必洪
  • 3篇林学义
  • 1篇翁绳健
  • 1篇李亚楠
  • 1篇王雯婷
  • 1篇郭洁梅
  • 1篇卢美丽

传媒

  • 2篇中国中西医结...
  • 2篇福建中医药
  • 2篇中华中医药杂...
  • 1篇Chines...
  • 1篇福建中医药大...
  • 1篇中国组织工程...
  • 1篇康复学报

年份

  • 1篇2020
  • 1篇2019
  • 5篇2014
  • 3篇2013
共 10 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
壮骨健膝方对IL-1β诱导后软骨细胞表达Caveolin-1、p-p38、MMP-3、MMP-13及TNF-α的影响被引量：5
2014年
目的:观察壮骨健膝方对IL-1β诱导后软骨细胞中Caveolin-1、p-p38及其培养液中MMP-3、MMP-13和TNF-α表达的影响,探讨该方保护关节软骨的机制。方法:制备兔含药血清;取新西兰大白兔膝关节第二代软骨细胞,以10ng/mL IL-1β进行诱导,48h后随机分为空白血清组、含药血清组、阻滞剂A组、阻滞剂B组,并设未诱导的细胞为正常对照组,分别用不同方法干预6h后,检测软骨细胞及其培养液中上述5个指标的表达。结果:空白血清组5个指标的表达均高于其它各组(P<0.05),而3个干预组均能降低其表达(P<0.05),其中含药血清与SB203580联用的阻滞剂B组效果最明显。结论:壮骨健膝方对关节软骨的保护作用可能与其抑制Caveolinp38MAPK信号通路的激活,进而降低软骨细胞表达MMP-3、MMP-13及TNF-α有关。
陈宝军闫虎林学义张庆张子怡王艺茹李亚楠苏友新
关键词：小窝蛋白1磷酸化P38基质金属蛋白酶3基质金属蛋白酶13
人正常及骨关节炎关节软骨细胞的体外分离培养及鉴定被引量：6
2014年
目的建立人正常关节及人骨关节炎(OA)关节软骨细胞体外分离、培养及鉴定方法,比较二者之间部分软骨细胞生物学特征的差异。方法取人正常及人OA关节软骨组织,用胰蛋白酶联合Ⅱ型胶原酶消化法分离软骨细胞,进行原代、传代培养。采用生长情况观察、甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学方法对第2代软骨细胞进行比较。结果人正常关节软骨细胞生长及增殖快于人OA关节软骨细胞,且表型稳定;甲苯胺蓝及免疫组织化学染色显示人正常关节软骨细胞染色后异染颗粒的阳性表达均高于人OA关节软骨细胞。结论体外分离培养的人OA关节软骨细胞符合软骨细胞退变的表现,可为OA的相关实验研究提供细胞来源。
张庆翁绳健陈宝军闫虎王艺茹张子怡苏友新
关键词：人关节软骨细胞骨关节炎体外分离体外培养
Zhuanggu Jianxi Decoction(壮骨健膝方) Limits Interleukin-1β-Induced Degeneration Chondrocytes via the Caveolin-p38 MAPK Signal Pathway被引量：6
2014年
Objective:To evaluate the effect of Zhuanggu Jianxi Decoction(壮骨健膝方,ZGJXD)on interleukin-1β(IL-1β)-induced degeneration of chondrocytes(CDs)as well as the activation of caveolin-p38 mitogenactivated protein kinase(MAPK)signal pathway,investigating the possible molecular mechanism that ZGJXD treats osteoarthritis.Methods:Serum pharmacology was applied in the present study,where ZGJXD was orally administrated to New Zealand rabbits and then ZGJXD containing serum(ZGJXD-S)was collected for following in vitro experiments.CDs were isolated aseptically from New Zealand rabbits and then cultured in vitro.Upon IL-1βstimulation,the degeneration of CDs was verified by inverted microscope,toluidine blue stain and typeⅡcollagen immunocytochemistry.After IL-1β-stimulated CDs were intervened with blank control serum,ZGJXD-S,together with or without SB203580(a specific inhibitor of p38 MAPK)for 48 h,caveolin-1 protein expression and the phosphorylation level of p38 were determined by Western blotting,and the mRNA expression of IL-1β,tumor necrosis factorα(TNF-α),matrix metalloproteinase 3(MMP-3)and MMP-13 were examined by real-time polymerase chain reaction.Results:IL-1βstimulation induced degeneration of CDs,increased caveolin-1 expression and p38 phosphorylation,up-regulated the mRNA level of IL-1β,TNF-α,MMP-3 and MMP-13.However,the IL-1β-induced activation of caveolin-p38 signaling and alteration in the expression of p38 downstream target genes were suppressed by ZGJXD-S and/or SB203580 in CDs.Conclusion:ZGJXD can prevent CDs degeneration via inhibition of caveolin-p38 MAPK signal pathway,which might be one of the mechanisms that ZGJXD treats osteoarthritis.
闫虎苏友新林学义陈宝军张庆张子怡王艺茹李亚楠卢美丽何浈盛录王雯婷
关键词：小窝蛋白促分裂原活化蛋白激酶
阳和汤对兔膝骨关节炎木瓜蛋白酶模型IL-1、TNF-α的影响被引量：11
2020年
目的:观察阳和汤对兔膝骨关节炎模型中白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,探讨阳和汤防治骨关节炎的作用机制。方法:选取4~6月龄健康新西兰兔32只,雌雄各半,体质量(2.25±0.25)kg;采用随机数字表法分为对照组、模型组、阳和汤组、筋骨痛消丸组,每组8只。适应性饲养2周后,除对照组外,其余3组均采用关节腔内注入木瓜蛋白酶复制膝骨关节炎兔模型:轻度弯曲兔膝关节,经关节正中或两侧进针,将1.6%木瓜蛋白酶生理盐水溶液0.5 mL通过髌上韧带注入膝关节腔,每隔3天注射1次,连续3次。对照组与模型组予0.9%生理盐水灌胃;阳和汤组予6 g/(kg·d)阳和汤灌胃;筋骨痛消丸组予6 g/(kg·d)筋骨痛消丸灌胃。以上干预均1次/d,每周7次,共干预5周。停药1周后,处死全部实验动物,取兔股骨内髁关节软骨,采用肉眼、光镜下进一步观察苏木素-伊红染色后的关节软骨组织形态学改变情况;采用改良Mankin's评分标准评价软骨退变程度;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清和关节液中IL-1、TNF-α含量。结果:与对照组比较,模型组兔的软骨表面凹凸不平、局部缺损,软骨形态结构紊乱,软骨细胞数量减少,潮线紊乱消失,Mankin's评分增高,血清和关节液中IL-1、TNF-α含量增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,阳和汤组、筋骨痛消丸组兔的软骨缺损减轻,软骨形态结构较整齐,软骨细胞数量增多,潮线清晰,Mankin's评分降低,血清和关节液中IL-1、TNF-α含量降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与筋骨痛消丸组比较,阳和汤组兔的软骨形态结构未见明显区别,血清和关节液中IL-1、TNF-α含量无明显区别,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:阳和汤对骨关节炎的软骨损伤具有修复作用,能有效延缓关节软骨退变,其作用机制可能与抑制IL-1、TNF-α等炎性因子表达有关。
洪振强高弘建何俊君黄泽灵
关键词：膝骨关节炎白细胞介素-1肿瘤坏死因子-Α
Ⅱ型胶原酶消化法培养兔关节软骨细胞被引量：23
2013年
背景:目前关节软骨细胞的分离培养技术已经比较成熟,但是研究中发现通过目前技术培养的软骨细胞生长周期慢,容易出现退变现象,不利于后续试验的进行。目的:改进并探讨4周龄新西兰大白兔膝关节软骨细胞的分离与培养的方法。方法:无菌条件下取4周龄新西兰大白兔双侧膝关节软骨,采用Ⅱ型胶原酶消化并机械吹打的方法,分离关节软骨细胞并进行原代、传代培养;采用形态学观察,甲苯胺蓝染色以及Ⅱ型胶原免疫组织化学方法对关节软骨细胞进行鉴定;MTT法检测关节软骨细胞增殖情况。结果与结论:倒置显微镜下见膝关节软骨分离的原代软骨细胞6 h后开始贴壁,72 h可形成单层,96 h即可传代;前3代软骨细胞表型稳定,增殖力良好;第4,5代软骨细胞增殖能力减弱,绝大部分细胞变为长梭形和不规则形状。甲苯胺蓝染色显示培养的软骨细胞细胞质染成浅蓝色,细胞核染成深蓝色;免疫组织化学显示软骨细胞Ⅱ型胶原呈黄褐色阳性表达;MTT法检测表明前3代软骨细胞增殖差异无显著性意义(P>0.05),且第1-3代与4代软骨细胞在培养第4-7天时,吸光度值差异有显著性意义(P<0.05),与第5代软骨细胞在培养1-7天时,吸光度值差异有显著性意义(P<0.05)。提示采用Ⅱ型胶原酶消化并机械吹打的方法能够获得大量生长速度快且不宜退变的新西兰大白兔膝关节软骨细胞,且培养的前3代新西兰兔膝关节软骨细胞最为适宜。
闫虎苏友新林学义陈宝军周必洪张庆
关键词：软骨细胞II型胶原酶退变软骨
人软骨细胞体外分离与培养及其在中医药研究中的应用
2013年
20世纪60年代起人们对软骨组织的研究进入到细胞水平。1967年Manning WK等[1]使用胰蛋白酶联合细菌胶原酶消化分离与培养人软骨细胞获得成功。目前人软骨细胞体外分离与培养的方法已被广泛应用于软骨细胞生物学研究,为髌骨软化症、骨关节炎(osteoarthritis,OA)等疾病的防治及组织工程技术修复软骨缺损等研究提供了重要的方法学参考[2-3]。鉴于中医药在防治疾病方面多靶点、多层次、多环节整体调控的独特优势,借助中医药方法干预人软骨细胞体外分离与培养的骨科方面研究也备受关注。1人软骨细胞体外分离与培养的研究1.
张庆陈宝军闫虎周必洪苏友新
关键词：人软骨细胞体外分离体外培养中医药研究
IL-1β诱导新西兰大白兔膝关节退变软骨细胞的体外培养及鉴定被引量：21
2014年
目的探讨并鉴定IL-1β诱导新西兰大白兔膝关节软骨细胞退变的方法,为从体外培养退变软骨细胞的中医药研究骨关节炎提供实验依据。方法无菌条件下取4周龄新西兰大白兔双侧膝关节软骨,采用Ⅱ型胶原酶消化并机械吹打的方法分离关节软骨细胞,细胞传至第2代时,随机分为正常对照组(Z组)与IL-1β诱导的模型组(M组),Z组不加任何干预,M组加入含10 ng/mL IL-1β的10%FBS培养基,两组均传至第3代。采用形态学、甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色及流式细胞仪技术比较鉴定。结果倒置显微镜下见Z组第2、3代关节软骨细胞表型稳定,增殖力良好,绝大部分细胞变为梭形、铺路石样,M组第2、3代关节软骨细胞变为长梭形或不规则形状;甲苯胺蓝染色及免疫组织化学技术显示Z组第2、3代关节软骨细胞染色后阳性表达均优于M组;流式细胞仪分析显示,M组第2代软骨细胞凋亡率与Z组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论采用IL-1β诱导新西兰大白兔膝关节软骨细胞体外培养模型,细胞明显退变,可用于骨关节炎的相关实验研究。
闫虎苏友新林学义
关键词：白细胞介素-1Β退变膝关节软骨细胞
壮骨健膝方含药血清中药物成分骨碎补柚皮苷对IL-1β诱导兔退变软骨细胞“caveolin-p38MAPK”信号通路的影响被引量：16
2014年
目的观察壮骨健膝方含药血清中药物成分骨碎补柚皮苷(简称柚皮苷)对IL-1β诱导退变软骨细胞中'caveolin-p38MAPK'通路相关信号因子小窝蛋白-1(caveolin-1)、磷酸化p38(p-p38)、磷酸化核转录因子-2(p-ATF-2)、IL-1β及TNF-α等的影响,进一步探讨该方保护关节软骨的机制。方法 (1)通过高效液相-飞行时间质谱联用(HPLC-TOF/MS)技术分析并获得壮骨健膝方含药血清中的原组方药物成分柚皮苷;(2)取4周龄新西兰兔双侧膝关节软骨,建立兔关节软骨细胞体外培养体系,取第二代软骨细胞用于后续实验。MTT法检测柚皮苷对软骨细胞增殖的影响;免疫组化方法检测柚皮苷对IL-1β诱导后的软骨细胞中Ⅱ型胶原表达的影响;Western blot法检测柚皮苷对IL-1β诱导后软骨细胞中caveolin-1、pp38与p-ATF-2蛋白表达的影响;RT-PCR检测柚皮苷对IL-1β诱导后软骨细胞中IL-1β及TNF-αmRNA表达的影响。结果 (1)柚皮苷标准品溶液及壮骨健膝方含药血清离子流图中柚皮苷的出峰时间均为23.5 min,分子量均在581.0~581.5 m/z之间;(2)柚皮苷能促进软骨细胞的增殖,抑制IL-1β对软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响;(3)与模型组比较,柚皮苷能降低IL-1β诱导后软骨细胞中caveolin-1、p-p38、p-ATF-2等蛋白及IL-1β、TNF-αmRNA的表达(P<0.05),并接近正常组水平。结论壮骨健膝方含药血清中原组方药物成分柚皮苷不仅能够促进软骨细胞的增殖,还可保护软骨细胞的功能,其机制可能与柚皮苷降低诱导退变软骨细胞中caveolin-1、p-p38与p-ATF-2的表达,抑制'caveolin-p38MAPK'通路的活动,进而减少通路下游IL-1β及TNF-αmRNA表达有关。
苏友新闫虎陈宝军张庆王艺茹卢美丽王雯婷何浈盛录
关键词：含药血清软骨细胞
壮骨健膝方治疗肝肾亏虚、风寒湿痹型膝骨关节炎76例临床观察被引量：19
2013年
目的观察壮骨健膝方治疗肝肾亏虚、风寒湿痹型膝骨关节炎的临床疗效。方法将152例膝骨关节炎患者采用随机数字表分为2组,治疗组76例给予壮骨健膝方,对照组76例给予美洛昔康片;3周后,观察2组临床疗效及治疗前后各症状评分变化情况。结果治疗组总有效率为94.7%,对照组总有效率为84.2%;治疗组治疗后休息痛、运动痛、压痛症状评分与对照组无显著差异,而肿胀、僵硬及行走能力评分显著低于对照组(P<0.05);胃肠道的不良反应发生率治疗组明显低于对照组。结论壮骨健膝方能有效改善肝肾亏虚、风寒湿痹阻证型膝骨关节炎患者疼痛、肿胀及运动功能障碍等症状,且胃肠道不良反应小,值得临床推广应用。
陈宝军闫虎张庆周必洪张子怡苏友新
关键词：膝骨关节炎肝肾亏虚风寒湿痹
壮骨健膝方含药血清对人退变关节软骨细胞caveolin-p38MAPK信号通路的影响被引量：5
2019年
目的:观察壮骨健膝方含药血清对人退变关节软骨细胞caveolin-p38MAPK信号通路关键信号分子及下游效应产物的影响,阐明该方含药血清保护人退变关节软骨细胞的机制。方法:取正常人及膝骨关节炎(KOA)患者软骨标本体外分离软骨细胞并培养至第3代。将正常人软骨细胞设为正常组,KOA患者软骨细胞随机分为KOA组、阻滞剂组、含药血清组及含药血清+阻滞剂组。分别用20%空白血清、20%空白血清、20%空白血清+20μmol/L SB203580、20%含药血清、20%含药血清+20μmol/L SB203580进行干预;48h后,收集细胞;采用Western Blot检测细胞中caveolin-1、p-p38蛋白表达,RT-PCR检测细胞中TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达。结果:与正常组比较,KOA组软骨细胞中caveolin-1、p-p38蛋白及TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达显著升高(P<0.01,P<0.05);与KOA组比较,阻滞剂组、含药血清组、含药血清+阻滞剂组软骨细胞中caveolin-1、p-p38蛋白及TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达显著降低(P<0.01);与阻滞剂组比较,含药血清组软骨细胞中caveolin-1蛋白及MMP-13 mRNA表达显著降低(P<0.01,P<0.05),p-p38蛋白及TNF-α、MMP-3 mRNA表达显著升高(P<0.01,P<0.05);含药血清+阻滞剂组软骨细胞中caveolin-1、p-p38蛋白及TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达显著降低(P<0.01,P<0.05);与含药血清组比较,含药血清+阻滞剂组软骨细胞中caveolin-1、p-p38蛋白及TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达显著降低(P<0.01)。结论:壮骨健膝方含药血清保护人退变关节软骨细胞的机制可能与其抑制caveolin-p38MAPK信号通路中关键信号分子caveolin-1、p-p38蛋白表达,降低下游效应产物TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达有关。
洪振强滕方舟郭洁梅郭洁梅苏友新
关键词：人软骨细胞基质金属蛋白酶-3基质金属蛋白酶-13
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