国家教育部博士点基金(20060698049)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 相关作者：刘敏郭晓娟郭佑民段小艺杨军乐更多>>
- 相关机构：西安交通大学医学院第二附属医院西安交通大学西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
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- 食管癌组织表皮生长因子受体Ⅲ型突变体表达及其意义的探讨被引量：1
- 2009年
- 目的:检测表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)在食管癌组织中的表达,探讨其与食管癌发生、发展的关系。方法:采用免疫组化和蛋白质印迹实验检测EGFRvⅢ在66例人食管癌组织的表达情况,评价EGFRvⅢ表达在食管癌患者的性别、年龄分布、肿瘤大小、生长方式、TNM分期和淋巴结转移等临床病理参数的表达分布情况。结果:免疫组化结果显示EGFRvⅢ主要分布于胞膜及胞质内,在肿瘤及正常组织表达的平均净灰度值分别为22.46±4.21和5.54±3.01,两者相比差异有统计学意义,t=6.701,P=0.001。蛋白质印迹实验结果显示,EGFRvⅢ在肿瘤及瘤旁正常组织中表达的平均净灰度值分别为0.828±0.15和0.083±0.049,两者相比差异有统计学意义,t=9.362,P=0.000。两种检验方法均显示,不同性别、年龄、肿瘤大小、生长方式组间EGFRvⅢ表达,差异无统计学意义(P>0.05),TNM分期、淋巴结转移和病理分级中EGFRvⅢ表达差异均有统计学意义,P<0.05。EGFRvⅢ在两种实验方法的一致性检验(r=0.917,P<0.001),提示两种方法结果一致性好。结论:EGFRvⅢ可能参与食管癌发生,并在食管癌的侵袭和转移中起重要作用。
- 刘敏郭晓娟郭佑民段小艺
- 关键词：表皮生长因子免疫组织化学
- 基质金属蛋白酶2靶向穿膜肽表征分析及体外显像研究被引量：5
- 2007年
- 目的构建以基质金属蛋白酶2为靶点的穿膜肽,标记荧光素及顺磁性粒子,初步探讨体外成像价值。方法固相合成基质金属蛋白酶2(MMP-2)为靶点的可活化穿膜肽(CPPs),标记荧光素 FITC,构建荧光素分子探针 A;标记磁共振对比剂二亚乙基三胺五乙酸钆(Gd-DTPA),构建磁共振分析探针 B。高效液相色谱纯化探针及质谱测定分子量。聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测定可活化穿膜肽的等电点。400 MHz 磁共振谱仪翻转恢复序列测定磁共振探针 B 的自旋-点阵弛缓时间(T_1);制备人肺癌细胞株 A549爬片,FITC 和荧光素分子探针 A 分别孵育细胞爬片30 min 倒置荧光显微镜观察细胞内荧光分布;抗 MMP-2单克隆抗体孵育细胞后,荧光素分子探针 A 孵育细胞后荧光显像及流式细胞分析细胞摄取的状况。明胶酶谱分析细胞表达 MMP-2的情况;以 A549为对象,120nmol/ml 磁共振探针 B 和常规磁共振对比剂分别作用于细胞10、30、60、90 min 后,1.5T MRI T_1WI 视觉评价法分析细胞内磁共振信号,并与空白细胞组比较,方差分析各组细胞信号变化特征。透射电镜分析磁共振探针 B 细胞内分布。结果采用标准的芴甲氧羰基合成方案,质谱鉴定荧光素分子探针A分子量3789.74;磁共振分子探针 B 分子量3911.93。测定聚丙烯酰胺等电聚焦电泳目的条带 pH值为11.005,即为可活化穿膜肽的等电点。17℃400 MHz 磁共振谱仪测定浓度为0.5 mmol/L 的 Gd-DTPA 与磁共振探针 B 去离子水溶液的纵向驰豫时间 T_1分别为0.052 s±0.01 s 和0.050 s±0.001 s,两种配合物自旋-晶格驰豫效能分别为4.998 L·mmol^(-)·s^(-1)及6.452 L·mmol^(-1)·s^(-1)。倒置荧光镜成像显示 FITC 作用细胞组内未见荧光素分布,荧光素探针 A 作用组 A549细胞质和细胞核内出现明显得荧光素分布。抗 MMP-2单克隆抗体孵育 A549后,荧光摄取减少。以明胶酶谱分析细胞无血清培养基中 MMP-2表达显示肿瘤
- 刘敏郭佑民王鹏郭晓娟杨军乐王嗣岑段小艺徐贵平
- 关键词：肽类基质金属蛋白酶造影剂
