福建省自然科学基金(B0310004)
- 作品数：7 被引量：52H指数：4
- 相关作者：陈由强陈如凯叶冰莹潘海芳王冰梅更多>>
- 相关机构：福建师范大学中华人民共和国农业部福建农林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金福建省教育厅科技项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- pQE30-bgln原核表达质粒的构建和鉴定被引量：3
- 2005年
- 构建重组原核表达质粒pQE30-bgln使之可以在大肠杆菌中表达以获得β-葡糖苷酶,用于提高从植物中提取白藜芦醇的得率.以克隆质粒pUCP67为模板,用降落PCR的方法扩增β-葡糖苷酶基因片段(bgln).利用原核表达载体pQE30构建pQE30-bgln重组质粒,用酶切电泳验证重组结果的正确性,测序检测质粒重组后序列情况.PCR结果显示扩增片段2.2 kb,与预期相同.重组质粒酶切后显示其大小约5.6kb,大小及酶切图谱与预期相同.经测序发现插入片段读码框正确.可用于原核表达的pQE30-bgln质粒构建成功.
- 潘海芳王冰梅叶冰莹黄骐陈如凯陈由强
- 关键词：Β-葡糖苷酶原核表达白藜芦醇
- 花生白藜芦醇合酶基因转化单子叶植物表达载体的构建
- 2007年
- 构建了花生白藜芦醇合酶基因(RS)转化单子叶植物的表达载体,该表达载体含有ub i启动子和内含子,能启动该基因在单子叶植物中高效地表达.通过PCR反应扩增出目的片段,连接到克隆载体Pub i35s上,切下含ub i和RS约3 000 bp的片段连接到植物表达载体pCAM B IA-1 380上.经PCR和酶切检测,结果与预期相同,经测序确定插入片段读码框正确.该表达载体可用于单子叶植物高效的表达.
- 许玉芬叶冰莹陈由强王冰梅黄庆煌林志楷陈如凯
- 关键词：花生白藜芦醇合酶基因UBI单子叶植物
- pVT102U/α-bgln重组真核表达质粒的构建和鉴定被引量：1
- 2007年
- 构建重组真核表达质粒pVT102U/α-bgln使之可以在酿酒酵母中表达以获得β-葡糖苷酶,用于提高从植物中提取白藜芦醇的得率.以含有从黑曲霉中获得的编码β-葡萄糖苷酶(bgln)成熟肽的cDNA的克隆质粒pMD19T-bgln为模板,用PCR的方法扩增β-葡糖苷酶基因片段(bgln),利用真核表达载体pVT102U/α构建pVT102U/α-bgln重组质粒,PCR结果显示扩增片段约2.6 kb,与预期相同.用酶切电泳验证重组结果的正确性,重组质粒酶切后显示其大小约10 kb,大小及酶切图谱与预期相同.测序检测质粒重组后序列情况,经测序发现插入片段两端序列无改变,且读码框正确.pVT102U/α-bgln质粒构建成功.
- 林志楷叶冰莹潘海芳陈由强陈如凯
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶真核表达
- MPLC测定虎杖中白藜芦醇含量被引量：8
- 2006年
- 建立测定虎杖中白藜芦醇含量的反相中压高效液相色谱分析方法。实验采用SOURCE 5RPC ST4．6／150预装拄，以乙腈：水（体积比30：70V／V）溶液为流动相、流速1mL/min、检测波长308nm。结果表明白藜芦醇对照品浓度在0．6～1．6mg／mL时，浓度与峰面积呈良好的线形关系（R=0．9919）；加样回收率为103．0～90．4％，RSD=7．21％。采用中压高效液相色谱法测定虎杖中自藜芦醇含量，操作方便，准确性和实用性好。
- 张凌燕叶冰莹黄骐陈由强陈如凯
- 关键词：虎杖白藜芦醇
- 长叶榧(Torreya jackii Chun)遗传多样性分析被引量：11
- 2004年
- 利用RAPD技术分析了长叶榧(TorreyajackiiChun)的遗传结构,用18个引物对来自福建省泰宁县的3个不同居群的66个长叶榧样本进行分析。结果显示,长叶榧群体水平的多态位点百分率达87%,居群水平的多态位点百分率分别为83%、68%和80%。群体水平上的Nei基因多样性指数为0 2479,居群水平上分别为0 2182、0 1684和0 1881。群体水平上的平均杂合度达到0 2447,居群水平上分别为0 2215、0 1729和0 1950。30 35%的遗传变异存在于居群间,69 65%的遗传变异存在于居群内。长叶榧居群的基因流量为1.6899,显示长叶榧仍具有通过群体间的基因交流来防止遗传漂变造成的群体分化的能力。
- 叶冰莹庄振宏陈由强黄丰陈如凯
- 关键词：RAPD资源保护
- 卷柏总蛋白质提取方法及双向电泳条件的建立被引量：14
- 2006年
- 目的:建立复苏植物——卷柏总蛋白质的提取方法,以及可以对其蛋白质组进行阵列分离的双向电泳条件。方法:通过多种条件的组合与优化,建立了以物理和化学2种方法充分裂解植物组织细胞,并采用低温操作、加入PVP等去除植物组织中大量的酚类物质,最后离心去除不溶性杂质的卷柏蛋白质组双向电泳(2-DE)样品制备方法。第1向电泳为固相pH梯度等电聚焦,第2向电泳为垂直平板SDS-PAGE。结果:通过对样品制备、蛋白定量、第1向和第2向电泳、染色方法等各实验环节进行控制和优化,凝胶经考马斯亮蓝染色后,可分辨蛋白质斑点数约600个。结论:建立了卷柏总蛋白质的提取方法及蛋白质组双向电泳技术,为后续研究卷柏在干旱胁迫下的差异表达奠定了基础。
- 魏琳陈由强叶冰莹黄骐陈如凯
- 关键词：复苏植物卷柏蛋白质组双向电泳
- 花生白藜芦醇合酶基因的DNA克隆及序列分析被引量：15
- 2005年
- 白藜芦醇合酶(resveratrol synthase,RS)是合成白藜芦醇的关键酶.通过PCR方法从花生基因组DNA中分离出白藜芦醇合酶基因,将其克隆到pMD18-T和pBluescript Ⅱ KS(+)载体并测序,获得全长1 537 bp的片段.序列分析表明,此序列含有2个外显子和1个内含子,编码区由389个氨基酸组成,其相对分子质量为42 800.该白藜芦醇合酶氨基酸368～378位点上存在芪合酶家族的特征位点GVLFGFGPGLT.
- 王冰梅潘海芳叶冰莹黄骐朱锦懋陈如凯陈由强
- 关键词：花生白藜芦醇合酶基因克隆
