哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目(RC2009XK001004)
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 相关作者：李海英于海鹏潘钰蒙明明于冰更多>>
- 相关机构：黑龙江大学中国农业科学院农业信息研究所更多>>
- 发文基金：哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目黑龙江省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 导入额外拷贝nifA基因的大豆根瘤菌工程菌株的构建
- 2010年
- 以快生型大豆根瘤菌(Sinorhizobium fredii)15067的基因组DNA为模板,采用PCR技术,克隆固氮基因nifA全长;将其连入带有lac启动子下游,构建带有LuxAB基因标记的表达载体pTR102,采用三亲本杂交技术转化土著大豆根瘤菌中,构建大豆根瘤菌工程菌株。为研究转基因工程菌株对大豆固氮能力的影响奠定基础。
- 李海英张喜波刘金玲于海鹏杨乐蒙明明贾珊珊
- 关键词：大豆根瘤菌NIFA基因
- 大豆血红蛋白串联基因簇转化根瘤菌工程菌株的构建被引量：2
- 2011年
- 研究提取大豆根瘤总RNA并将其反转录成cDNA,以其为模板采用同源序列克隆法,利用PCR技术获得大豆血红蛋白基因lbc3、lbc2、lbc1、lba的编码区序列;利用DNA重组技术,将4个血红蛋白基因顺序连接,构建成串联基因簇lbc3-lbc2-lbc1-lba(命名为lbX),并构建了lbX的原核表达载体pTR-Plac-lbX;采用三亲本杂交的方法,将原核表达载体pTR-Plac-lbX转化土著大豆根瘤菌,构建转基因根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lbX),为研究转基因工程菌株对大豆根瘤固氮能力的影响奠定基础。
- 于海鹏潘钰李海英
- 关键词：大豆根瘤菌DNA重组技术
- 导入nodD-lba串联基因的根瘤菌工程菌株的构建被引量：2
- 2013年
- 旨在利用同源序列克隆法,克隆出结瘤相关基因nodD和大豆血红蛋白基因lba。以串联的方式将nodD和lba基因连接到lac启动子的下游,通过DNA重组技术构建出带有发光酶基因luxAB的重组载体pTR-Plac-nodD-lba。通过三亲本杂交方法构建转基因费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii),Western blot试验证明导入基因能够进行表达。将初始菌株和基因工程菌株侵染大豆幼苗后进行固氮酶活的测定。测定结果表明,转基因工程菌株均能够提高固氮酶效率,导入串联基因的工程菌株在提高固氮酶活性上比导入lba和nodD基因的工程菌株高出4%和15.1%。
- 李珊珊李海英于冰
- 关键词：费氏中华根瘤菌
- 大豆血红蛋白基因lba转化根瘤菌工程菌株的构建被引量：2
- 2012年
- 以土著大豆根瘤菌接种大豆幼苗45 d后获得的根瘤为材料,提取其总RNA并反转录成cDNA,采用同源序列克隆法扩增大豆血红蛋白基因lba编码区序列。利用DNA重组技术,将lba基因连到lac启动子的下游,利用带有发光酶标记基因luxAB的质粒载体pTR102构建表达载体pTR-Plac-lba。采用三亲本杂交的方式,将表达载体pTR-Plac-lba及作为对照的空载体pTR102分别转化土著大豆根瘤菌,获得根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lba)和SFH(pTR102)。盆栽试验发现,接种SFH(pTR-Plac-lba)的大豆植株各生理指标明显高于接种SFH(pTR102)、土著根瘤菌以及未接菌的大豆植株各生理指标。试验证明,导入大豆血红蛋白基因lba的根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lba)对于提高大豆根瘤的固氮酶活性,增加大豆产量起到显著效果。
- 于海鹏潘钰蒙明明李海英
- 关键词：DNA重组技术工程菌株
