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国家自然科学基金(39900069)

作品数:11 被引量:158H指数:7
相关作者:许丽艳李恩民沈忠英熊华淇蔡唯佳更多>>
相关机构:汕头大学中国预防医学科学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 7篇医药卫生
  • 4篇生物学
  • 1篇自动化与计算...

主题

  • 5篇食管
  • 4篇NGAL
  • 3篇食管癌
  • 3篇细胞
  • 3篇基因
  • 2篇蛋白
  • 2篇肿瘤
  • 2篇MMP-9
  • 1篇蛋白鉴定
  • 1篇蛋白酶
  • 1篇蛋白质
  • 1篇蛋白质结构
  • 1篇蛋白质组
  • 1篇电泳
  • 1篇信号
  • 1篇信号传导
  • 1篇信号传导通路
  • 1篇人乳
  • 1篇人乳头瘤
  • 1篇人乳头瘤状病...

机构

  • 9篇汕头大学

作者

  • 8篇许丽艳
  • 7篇李恩民
  • 5篇沈忠英
  • 3篇熊华淇
  • 2篇韩溟
  • 2篇蔡唯佳
  • 2篇吴贤英
  • 2篇牛永东
  • 1篇李淳
  • 1篇韩雅莉
  • 1篇荣举
  • 1篇王子良
  • 1篇徐小虎
  • 1篇郑瑞明
  • 1篇熊兴东
  • 1篇王朝阳

传媒

  • 4篇肿瘤防治杂志
  • 1篇生命科学
  • 1篇国外医学(肿...
  • 1篇生物化学与生...
  • 1篇癌变.畸变....
  • 1篇World ...
  • 1篇生物信息学

年份

  • 3篇2003
  • 5篇2002
  • 2篇2001
11 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
NGAL基因cDNA的克隆及其表达载体的构建被引量:4
2001年
目的 :克隆NGAL基因的cDNA ,并构建其表达载体。方法 :应用RT PCR技术 ,从食管癌细胞系SHEEC中扩增出NGAL(neutrophilgelatinase associatedlipocalin)基因的cDNA ,并重组到中间载体pT Adv中 ,经测序和与NCBI数据库比较证实是NGAL基因的全编序列。然后把它分别插入到真核表达载体pcDNA 3和原核表达载体pGEX 4T 3中。结果 :获得了NGAL基因的cDNA全序列 ,构建了NGAL的正、反向真核表达载体pcDNA NGAL(+ - )和原核表达载体pGEX NGAL ,并在大肠埃希菌TOP10F′中成功地表达出NGAL融合蛋白。结论 :为研究NGAL基因的新功能和制备其抗体 ,进而阐明NGAL在食管癌等肿瘤中的生物学作用提供了有利工具。
熊华淇许丽艳李恩民蔡唯佳沈忠英徐小虎
关键词:CDNA克隆食管癌细胞系表达载体构建
NGAL的结构与功能研究进展被引量:20
2002年
NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)是一种新的lipocalin,其结构与功能的研究进展为人瞩目。目前认为 NGAL具有运输疏水性小分子,调节明胶酶B(gelatinase B或matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)活性等功能,并可能参与免疫炎症反应以及肿瘤的发生发展,特别是肿瘤的浸润转移等过程。最近,NGAL蛋白的空间结构已被研究清楚。这对于促进NGAL生物学作用或功能的研究,特别是对其新的生物学作用或功能的探索,比如与肿瘤的关系(NGAL可能是一种新的癌基因或促癌基因)将具有十分重要的意义。对此作者进行了综合评述。
许丽艳李恩民熊华淇
关键词:NGAL基因结构蛋白质结构MMP-9肿瘤癌基因
食管鳞癌中HPV-16/18感染与c-erbB-2、p53和Rb表达及其意义被引量:11
2002年
目的 :探讨食管鳞癌组织中人乳头瘤病毒HPV 16 / 18感染与c erbB 2、p5 3和Rb表达及其意义。方法 :采用聚合酶链反应 (PCR)法检测 90例活检存档的食管鳞癌蜡块中HPV 16 / 18的感染情况 ,从中随机选择 2 0例 ,采用免疫组化法检测单独的HPV 16感染及c erbB 2、p5 3和Rb表达。结果 :PCR检测食管癌组织HPV 16 / 18的感染率为 31 1% (2 8/ 90 ) ;免疫组化法检测食管癌组织中单独的HPV 16的感染率为 5 5 % (11/ 2 0 )。食管癌组织表达c erbB 2、Rb和p5 3和Rb的阳性率分别为 75 % (15 / 2 0 )、6 5 % (13/ 2 0 )和 80 % (16 / 2 0 )。HPV 16感染与c erbB 2、Rb和p5 3表达之间未见相关性。HPV 16感染以及c erbB 2、p5 3和Rb表达与淋巴结转移之间差异无显著性 (P >0 0 5 )。p5 3表达与食管癌组织学分级之间差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,而HPV 16感染以及Rb和c erbB 2表达与食管癌组织学分级之间差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :食管癌组织中HPV 16 / 18感染与c erbB 2、p5 3和Rb表达之间的关系是复杂的 ,尚有待于进一步研究。
牛永东李恩民吴贤英郑瑞明沈忠英许丽艳
关键词:食管鳞癌C-ERBB-2P53RB
Upregulated expression of Ezrin and invasive phenotype in malignantly transformed esophageal epithelial cells被引量:51
2003年
AIM: To investigate the correlation between ezrin expression and invasive phenotype formation in malignantly transformed esophageal epithelial cells. METHODS: The experimental cell line employed in the present study was originated form the progressive induction of a human embryonic esophageal epithelial cell line (SHEE)by the E6E7 genes of human papillomavirus (HPV) type 18.The cells at the 35th passage after induction called SHEEIMM were in a state of immortalized phase and used as the control,while that of the 85th passage denominated as SHEEMT represented the status of cells that were malignantly transformed. The expression changes of ezrin and its mRNA in both cell passages were respectively analyzed by RT-PCR and Western blot. Invasive phenotype was assessed in vivo by inoculating these cells into the severe combined immunodeficient (SCID) mice via subcutaneous and intraperitoneal injection, and in vitro by inoculating them on the surface of the amnion membranes, which then was determined by light microscopy and scanning electron microscopy. RESULTS: Upregulated expression of ezrin protein and its mRNA was observed in SHEEMT compared with that in SHEEIMM cells. The SHEEMT cells inoculated in SCID mice were observed forming tumor masses in both visceral organs and soft tissues in a period of 40 days with a special propensity to invading mesentery and pancreas, but did not exhibit hepatic metastases. Pathologically, these tumor cells harboring larger nucleus, nucleolus and less cytoplasm could infiltrate and destroy adjacent tissues. In the in vitro study,the inoculated SHEEMT cells could grow in cluster on the amniotic epithelial surface and intrude into the amniotic stroma. In contrast, unrestricted growth and invasiveness were not found in SHEEIMM cells in both in vivo and in vitroexperiment. CONCLUSION: The upregulated ezrin expression is one of the important factors that are possibly associated with the invasive phenotype formation in malignantly transformed esophageal epithelial cells.
Zhong-YingShenLi-YanXuMing-HuaChenEn-MinLiJin-TaoLiXian-YingWuYiZeng
关键词:EZRIN食管上皮细胞人乳头瘤状病毒
双向凝胶电泳图像分析方法的建立被引量:10
2002年
目的 :建立一套双向凝胶电泳图像分析方法 ,为下一步差别蛋白的鉴定提供依据。方法 :采用一步法分别提取人永生化食管上皮细胞系SHEE和由SHEE转化而来的食管癌细胞系SHEEC的可溶性总蛋白。经双向凝胶电泳分离后 ,应用Bio Rad公司的双向电泳凝胶图像分析软件PDQuest 6 .2分析SHEE与SHEEC之间可溶性总蛋白的差异表达情况。结果 :SHEE和SHEEC细胞的双向电泳图谱经背景消减、点检测和匹配后 ,获得了各自的差异蛋白点。其中有 7个蛋白点只出现在SHEE细胞中 ,有 2个蛋白点只出现在SHEEC细胞中。结论 :利用PDQuest 6 .2凝胶图像分析软件可快速有效地对两个密切相关的生物系统之间蛋白质样品双向凝胶电泳结果的差别进行分析处理。
熊兴东许丽艳沈忠英蔡唯佳韩溟牛永东韩雅莉李恩民
关键词:双向凝胶电泳蛋白质组蛋白鉴定
MMP-9与MMP-2在食管癌中的表达及其意义被引量:5
2002年
目的 :阐明MMP 9(matrixmetalloproteinase 9)和MMP 2 (matrixmetalloproteinase 2 )在食管癌组织中的分布特点及其活性变化。方法 :采用免疫组织化学法和酶谱法 (Zymography)分别检测食管癌组织中MMP 9和MMP 2蛋白的分布及其活性。结果 :MMP 9和MMP 2在食管癌组织中的分布呈多样性 ,既存在于癌细胞中 ,也存在于成纤维细胞和组织巨噬细胞中 ;在角质细胞以及细胞间隙中也发现存在着MMP 9和MMP 2蛋白。在食管癌组织、癌旁组织和远端食管组织中存在着各种形式的MMP 9(130× 10 3-异源二聚体、92× 10 3-前酶形式和 84× 10 3-活性形式 )和MMP 2 (72× 10 3-前酶形式和6 2× 10 3-活性形式 )。 84× 10 3(活性形式 )的MMP 9以及 72× 10 3(前酶形式 )和 6 2× 10 3(活性形式 )的MMP 2在食管癌组织中的活性明显比癌旁组织和远端食管组织中的强 (P <0 0 5 )。结论 :MMP 9与MMP
韩溟许丽艳李淳吴贤英沈忠英李恩民
关键词:MMP-9MMP-2食管癌金属蛋白酶类免疫组织化学
NGAL基因在永生化食管上皮细胞恶性转化中过表达的研究被引量:50
2001年
为研究NGAL (neutrophilgelatinase associatedlipocalin)基因在永生化食管上皮细胞恶性转化中的表达情况 ,以永生化食管上皮细胞系SHEE和食管癌细胞系SHEEC互为对照 ,用cDNA微列阵进行筛选 ,用RNA印迹和RT PCR进行鉴定 ,cDNA克隆测序后与GenBank进行BLAST分析比较 .结果表明NGAL基因在SHEEC中出现显著差异过表达 ,其cDNA序列与小鼠 2 4p3、大鼠NRL (neu relatedlipocalin)、人中性粒细胞NGAL和卵巢癌NGAL具有较高的相似性 .这提示NGAL基因在永生化食管上皮细胞恶性转化中可能发挥着重要作用 。
许丽艳李恩民熊华淇蔡唯佳沈忠英
关键词:NGAL差异表达基因恶性转化过表达
NF-κB及其在肿瘤中的生物学行为特征被引量:7
2002年
NF κB是一类普遍存在的转录因子 ,参与着 15 0余种基因的转录调控 ,主要涉及免疫炎症反应、细胞增殖与凋亡等生物学过程。NF κB可被许多刺激因素激活。近年来 ,围绕着NF κB在肿瘤中的生物学行为特征这一问题进行了大量研究 ,本文综述NF κB在肿瘤的发生、浸润、转移和耐药中的作用等方面的进展。
牛永东
关键词:NF-ΚB肿瘤生物学行为信号传导通路
KEGG及其在顺式作用元件预测中的应用被引量:1
2003年
随着生物信息学的飞速发展,与之相应的各种类型的数据库不断涌现,KEGG数据库便是其中之一。本文详细介绍了KEGG数据库的主要内容及其功能,并以运用该数据库Mat Inspector V2.2软件预测NGAL基因5’端转录调控区增强于元件为例说明了KEGG数据库在基因转录调控研究中的应用。
王子良许丽艳李恩民
关键词:生物信息学
食管癌相关基因NGAL四种融合表达载体的构建及其蛋白表达产物的比较分析被引量:2
2003年
目的 :筛选出能高效表达且可溶性好的NGAL(neutrophilgelatinase associatedlipocalin)融合表达载体。方法 :将NGALcDNA全长片段分别定向克隆到表达载体的BamHI +EcoRI位点 ,构建NGAL基因的 4种融合表达载体 ,然后分别转化大肠杆菌并进行IPTG诱导小样表达 ,监测各NGAL融合蛋白在不同诱导时间内的表达量及其可溶性等。选择pHis NGAL和pDsbA2 0 NGAL进行IPTG诱导大样表达 ,通过SDS PAGE比较表达产物的量与可溶性。结果 :成功构建出 4种NGAL融合表达载体。经IPTG诱导小样表达后 ,4种载体的表达水平及其可溶性明显不同 ,DsbA2 0 NGAL、His NGAL和Trx NGAL融合蛋白表达量分别占菌体总蛋白的 33 3%、32 3%、2 8 7% ,而它们的可溶性部分分别占各自总NGAL融合蛋白的96 8%、95 3%和 6 3 0 %。对pDsbA2 0 NGAL和pHis NGAL进行IPTG诱导大样表达后发现 ,DsbA2 0 NGAL融合蛋白的表达量与可溶性较好。结论 :pDsbA2 0 NGAL表达载体是能高效表达且可溶性好的NGAL融合蛋白表达载体。
王朝阳许丽艳荣举韩溟吉坤美沈忠英李恩民
关键词:基因生物合成大肠杆菌基因表达
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