江苏省“青蓝工程”基金(20081215)
- 作品数：15 被引量：28H指数：3
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- 脱细胞基质在组织工程气管移植中的研究进展被引量：1
- 2013年
- 目的综述脱细胞基质在组织工程气管中的研究现状、进展及未来前景。方法广泛查阅脱细胞基质在组织工程气管研究中的相关文献,对不同脱细胞基质修复人和动物气管病损的研究现状进行综合分析。结果气管组织工程应用的脱细胞基质包括空肠、膀胱、主动脉和气管。结论脱细胞膀胱基质及空肠基质在修复气管小范围非环形病损中具有较好效果,脱细胞主动脉基质在长段气管病损中的应用还需进一步研究,脱细胞气管基质在长段气管病损中具有良好的应用前景。
- 章方彪张卫东史宏灿
- 关键词：脱细胞基质空肠膀胱主动脉
- 红细胞裂解液法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞被引量：4
- 2013年
- 背景:有研究向骨髓液中加入红细胞裂解液来提高分离纯化骨髓间充质干细胞的效率,以期获得纯度高、数量多的骨髓间充质干细胞。目的:进一步验证红细胞裂解液法体外分离纯化兔骨髓间充质干细胞的增殖特性,并对其进行细胞生物学鉴定。方法:使用红细胞裂解液提取含有兔骨髓间充质干细胞的骨髓悬混液,于4,7,10,13 d记录比较原代细胞的生长相对数量;观察传代细胞的生长情况,绘出P2、P3、P4及P5代细胞的生长曲线,比较各代细胞的增殖特点;倒置相差显微镜观察细胞的形态,细胞免疫荧光及流式细胞仪检测所获得细胞的CD44、CD34表面抗原的表达情况。结果与结论:红细胞裂解液法所获得的兔骨髓间充质干细胞为均一规则的以梭形为主的贴壁细胞,其胞核胞核均质、核仁明显、胞浆丰富,且CD44抗原表达阳性、CD34抗原表达阴性;原代细胞生长曲线呈类"S"型;P4代细胞具有较好的增殖活性,其生长速度、所获取的细胞数量均优于其他代数细胞。说明红细胞裂解液法可以在体外较好的培养出骨髓间充质干细胞,其P4代细胞是骨髓间充质干细胞增殖能力最强的一代细胞。
- 张卫东章方彪史宏灿谭荣邦叶钢李广宇潘枢孙飞
- 关键词：干细胞骨髓干细胞骨髓间充质干细胞细胞生物学国家自然科学基金
- 体外诱导骨髓间充质干细胞定向分化为软骨细胞的实验研究被引量：5
- 2013年
- 目的体外分离培养、扩增骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),诱导其定向分化为软骨细胞,为MSCs应用于临床、构建组织工程气管软骨提供实验依据。方法采用全骨髓培养+贴壁纯化法分离培养MSCs,流式细胞仪鉴定MSCs,以转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)、胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)作为主要的诱导因子诱导MSCs定向分化为软骨细胞。21 d后用Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色法鉴定诱导出的细胞,在光学显微镜和电子显微镜下观察MSCs诱导前、后的细微和超微结构改变。结果诱导21 d后Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色呈阳性。光学显微镜和电子显微镜检查显示:MSCs呈梭形,诱导后细胞增大,呈多边形、星形、三角形。透射电子显微镜显示:诱导后细胞器丰富,胞核增大,核仁增多。结论 MSCs诱导分化为软骨细胞的超微结构表现为细胞器丰富、胞核增大、核仁增多,提示细胞分化、代谢功能旺盛。
- 谭荣邦史宏灿
- 关键词：软骨分化
- 气管替代物研究的现状与进展被引量：3
- 2012年
- 从大量的实验研究和有限的临床应用来看,目前气管置换术尚不能成熟应用,主要在于替代物的生物相容性差,且不能有效地血管化,常易伴发替代物移位、脱落、上皮缺血、坏死,以及细菌侵袭、感染等并发症。本文从气管替代物类型的角度,回顾了近年来在动物实验及临床应用上取得的成果,并对未来的研究做出展望。
- 陈林松史宏灿
- 关键词：气管替代物同种异体移植生物假体
- 细胞外基质在长段气管病损治疗中的应用与研究进展被引量：2
- 2013年
- 气管的病损超过一定的长度则需要进行气管移植。传统采用天然组织和自体组织替代气管,因局部感染、气管狭窄、气管软化和免疫排斥反应等因素均未能获得良好的疗效。近年来,组织工程气管的出现为气管移植提供了新的思路,但选择理想的细胞外基质用于构建组织工程气管尚未达成统一的意见。目前,在气管组织工程领域研究和应用的细胞外基质主要包括同种异体气管基质、同种异体主动脉基质和生物复合材料。采用不同方法获得的同种异体基质及生物复合材料各具有其优势及劣势。本文主要针对细胞外基质在长段气管病损治疗中的应用、研究进展及未来前景进行综述。
- 章方彪张卫东史宏灿
- 关键词：细胞外基质主动脉气管生物复合材料
- 间充质干细胞构建组织工程化气管的研究与应用被引量：1
- 2013年
- 背景:间充质干细胞诸多特有的良好生物学特性使得其在组织工程化气管研究中成为理想的种子细胞来源。目的:总结间充质干细胞在构建组织工程化气管领域的研究现状、进展、存在的问题及展望。方法:由作者检索PubMed数据库及CNKI数据库1979至2012年,在英文标题和摘要中以"mesenchymal stem cells,tissue-engineered trachea"和"tracheal chondrocytes,tracheal epithelial cells,tracheal vascular endothelial cells"检索,中文文献检索中以"间充质干细胞、组织工程化气管、气管软骨细胞、气管上皮细胞和气管血管内皮细胞"为关键词,选择与组织工程化气管相关的文章,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志的文章,共纳入51篇。结果与结论:组织工程化气管种子细胞研究主要包括软骨细胞、上皮细胞和血管内皮细胞。实验已证实,间充质干细胞可定向分化为软骨细胞,细胞因子在诱导间充质干细胞分化为软骨过程中起着关键作用。目前尚未发现合适的诱导因子能特异性诱导间充质干细胞定向分化气管上皮细胞。有研究发现间充质干细胞具有向上皮细胞分化的潜能。间充质干细胞在体内或体外特殊条件下可诱导分化为血管内皮细胞,为间充质干细胞作为种子细胞分化血管内皮细胞应用于组织工程化气管起到借鉴作用。
- 谭荣邦史宏灿
- 关键词：干细胞间充质干细胞气管上皮细胞
- 排斥反应在同种异体气管移植物中的研究进展被引量：2
- 2015年
- 气管的一些良性或恶性病变从理论上说是可以通过简单的手术切除,并将断端进行端端吻合来治疗的。然而这仅限于病损长度不超过成人气管长度的50%、小孩气管长度的30%。对大多患者而言,可以进行气管移植替代。然而气管移植有诸多问题有待解决,例如免疫排斥、再血管化、感染、肉芽组织增生等方面的问题。本文主要针对如何用不同的降低免疫排斥反应的方法来阐述免疫排斥反应在同种异体气管移植物领域的研究进展及应用现状。
- 刘星辰孙飞史宏灿
- 关键词：免疫排斥气管移植同种异体移植物
- 气管软骨细胞和羧乙基壳聚糖-羟基磷灰石泡沫支架复合及裸鼠皮下植入被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨以兔气管软骨细胞为种子细胞在自制羧乙基壳聚糖-羟基磷灰石泡沫（NCECS-HA）支架合成组织工程气管软骨的可行性.方法 通过真空冷冻干燥法制得NCECS-HA泡沫支架.从6个月大的大耳白兔取气管软骨片段,Ⅱ型胶原酶消化,将所获得第3代软骨细胞种植于NCECS-HA三维支架上.细胞-支架复合物在24孔板中培养5 d以后,将其植入裸鼠皮下8周.然后取出分别进行HE染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色和甲苯胺蓝染色,观察软骨细胞基质分泌情况.结果 8周后,构建出组织工程气管软骨示光泽良好,甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色显示细胞-支架复合物中的软骨细胞可以像天然软骨一样分泌糖氨多糖和Ⅱ型胶原.结论 生物材料NCECS-HA对于兔软骨细胞有良好的生物相容性,可作为生物组织工程支架.
- 王万鹏史宏灿陆妍朱爱萍李海甲陈林松
- 关键词：软骨细胞壳聚糖羟基磷灰石
- 去污剂-联合酶法行兔脱细胞组织工程气管制备及性能评价被引量：3
- 2014年
- 目的探讨兔气管支架最佳脱细胞周期，进行生物力学性能及细胞外基质结构完整性评价。方法选取40只健康新西兰兔，体质量2．5～3．0kg，雌雄不限。随机数字表法分为8组（n=5），A组为新鲜对照组，B、C、D、E、F、G、H组对应脱细胞1、3、5、6、7、8、9周期组。取同种气管，通过去污剂一联合酶法（DEM）分别行气管周期脱细胞处理，通过HE、Movat五色、DAPI染色显微镜观察、扫描电镜观察及生物力学性能测定，判断最佳脱细胞周期并行相关性能评价。结果与对照组相比，经7个DEM循环之后组织工程基质细胞核溶解、极少数细胞残留，结构体系未见明显破坏；组织学与分子生物学分析证实细胞成分及细胞核物质近乎全部去除；扫描电子显微镜（SEM）显示脱细胞基质依然保持完整的结构体系；生物力学证实脱细胞并未对基质形态学及机械性能产生明显影响；免疫荧光分析显示脱细胞气管基质细胞核物质显著减少（P〈0．05）。结论通过7周期改良DEM处理，能够有效获取长段无免疫原性脱细胞兔组织工程气管，具有与原生气管相似的结构体系及生物力学性能，是一种较为理想的支架材料。
- 孙飞潘枢史宏灿章方彪张卫东叶刚刘星辰
- 关键词：气管细胞外基质
- 羧乙基壳聚糖-纳米羟基磷灰石复合材料细胞相容性和生物力学性能的实验研究被引量：1
- 2011年
- 目的制备羧乙基壳聚糖一纳米羟基磷灰石（NCECS／nHA）复合材料，研究其生物力学性能以及与气管软骨细胞的生物相容性。方法气管软骨片段取自8周龄大耳白兔，Ⅱ型胶原酶消化，将所获得软骨细胞传代培养。将体外制备的NCECS／nHA复合材料分别进行干态标本和湿态标本的生物力学检测。将第3代软骨细胞种植到NCECS／nHA复合材料，分别计算材料表面软骨细胞在2h、6h、12h细胞贴壁率，并用噻唑蓝（MTT）法测定细胞增殖活性。结果NCECS／nHA复合材料具有良好的生物力学性能。兔气管软骨细胞在NCECS／nHA复合材料表面上12h的贴壁率达（88．4＋2．1）％，与其他组差异无统计学意义（P〉0．05）。同时MTF显示气管软骨细胞在NCECS／nHA复合材料表面生长状态良好。扫描电镜结果显示软骨细胞在NCECS／nHA薄膜上增殖和分化良好。结论NCECS／nHA复合材料具备良好的细胞相容性和适宜的生物力学强度，作为一种具有开发潜力的生物材料，可用于组织工程气管的体外构建。
- 史宏灿王万鹏陆妍朱爱萍陈林松李海甲
- 关键词：生物力学生物相容性纳米羟基磷灰石
