新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目(201110101)
- 作品数：13 被引量：30H指数：3
- 相关作者：夏丽洁张富春吴艳玲马纪刘忠渊更多>>
- 相关机构：新疆大学湖南福来格生物技术有限公司更多>>
- 发文基金：新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 新疆家蚕抗菌肽CecropinXJ对荷瘤小鼠免疫系统的影响被引量：3
- 2014年
- 目的:抗菌肽是生物防御系统中产生的一类对抗外源性病原体的肽类物质,是生物体内固有的、非特异性免疫系统的重要组成部分。在动物模型及人体中,免疫系统在控制肿瘤方面具有重要作用。本文通过建立BALB/c荷瘤小鼠模型,探讨新疆家蚕抗菌肽CecropinXJ对人食管癌Eca109细胞荷瘤小鼠是否通过影响机体免疫应答发挥抗肿瘤作用。方法:通过免疫组化和流式细胞术等方法检测免疫应答相关细胞因子和DC表面分子的表达。结果:10 mg/kg CecropinXJ对Eca109细胞移植瘤具有显著的抑制作用。10 mg/kg CecropinXJ给药组肿瘤体积和肿瘤重量与生理盐水对照组相比,具有显著差异(P<0.05)。同时,CecropinXJ可抑制肿瘤组织癌细胞的浸润生长而对小鼠体内脏器无影响。在CecropinXJ抑制肿瘤生长过程中,VEGF和b FGF上调表达。与对照组相比,CecropinXJ对荷瘤小鼠的抑瘤作用不能够显著促进CD4、IL-4和IFN-γ的表达,同时也不涉及脾脏中DCs表面分子的表达(P>0.05),但对TNF-α的表达具有显著的促进作用(P<0.01)。结论:CecropinXJ可以显著抑制荷瘤小鼠体内肿瘤的生长,在该过程中,可能并不通过影响机体免疫应答发挥抗肿瘤作用。
- 夏丽洁吴艳玲康苏张富春
- 关键词：抗菌肽免疫应答抗肿瘤
- 新疆家蚕抗菌肽体外抑制人胃癌细胞AGS的增殖
- 2014年
- 新疆家蚕抗菌肽（Cecropin XJ）具有抑制肿瘤细胞生长的能力。为研究不同浓度Cecropin XJ体外对人胃癌细胞AGS生长的影响,分别采用MTT比色法、软琼脂集落形成实验、流式细胞术、划痕愈合和Transwell实验进行检测。结果表明,20-100μg/mL的Cecropin XJ能够显著抑制AGS细胞的增殖,并具有剂量和时间依赖性。同时,20,50,100μg/mL的Cecropin XJ处理后集落形成率分别降低了（35.81±13.10）%、（48.12±5.68）%和（81.46±6.21）%。AGS细胞经不同浓度Cecropin XJ处理24 h后,凋亡率逐渐上升并且细胞周期阻滞于S期。20μg/mL Cecropin XJ能够显著抑制AGS细胞的迁移和侵袭,100μg/mL Cecropin XJ几乎完全抑制AGS细胞的迁移和侵袭。以上结果说明,Cecropin XJ能够抑制AGS细胞生长、增殖,有可能成为人胃癌治疗的辅助药物。
- 吴艳玲夏丽洁张富春
- 关键词：新疆家蚕抗菌肽增殖抑制细胞周期
- 新疆家蚕抗菌肽可有效抑制掌面革兰氏阴性菌的研究
- 2014年
- 抗菌肽具有抑制细菌的作用,是天然防腐剂和潜在的抗生素替代品。为了解新疆家蚕抗菌肽(CecropinXJ)能否有效抑制手掌表面细菌,本研究采用擦拭法获取手掌表面细菌擦拭液,并用不同浓度CecropinXJ处理手掌擦拭液,通过平板菌落计数法评价CecropinXJ的抑菌效果,结果表明随着CecropinXJ浓度增加,其抑菌能力越好。当CecropinXJ添加到0.4%时,抑菌能力达到商业洗手液水平(P>0.05);进一步对16SrDNA进行测序分析,结果发现手掌表面细菌多为革兰氏阴性菌,添加CecropinXJ后,手掌表面的革兰氏阴性菌生长能有效被抑制。本试验结果表明CecropinXJ可以用作消毒清洁产品进行开发。
- 康苏夏丽洁刘军马纪张富春
- 关键词：新疆家蚕抗菌肽革兰氏阴性菌
- 家蚕抗菌肽Cecropin-XJ的原核优化表达及活性检测被引量：3
- 2012年
- Cecropin-XJ是一种从家蚕幼虫体内分离纯化的具有很强热稳定性、酸碱适应性和广谱抗菌性的新型家蚕抗菌肽。以融合不同标签的表达载体构建pET28a-Cecropin-XJ、pET30a-Cecropin-XJ、pET32a-Cecropin-XJ、pMAL-p2X-Cecropin-XJ重组质粒,转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,并优化诱导时间、诱导温度、诱导剂IPTG浓度等条件,通过对目的蛋白表达的检测分析,选择、建立Cecropin-XJ在大肠杆菌中高效、可溶性表达的技术体系。试验结果表明:采用构建的重组原核表达载体pET32a-Cecropin-XJ在IPTG终浓度为0.8 mmol/L、培养温度为37℃的条件下诱导5 h,目的蛋白的表达量可达10 mg/L,重组蛋白主要以可溶性表达产物形式存在,可溶性蛋白的表达量约占菌体总蛋白的35%,经金属螯合层析进一步纯化后的Cecropin-XJ融合蛋白纯度可达90%以上。体外抑菌试验显示Cecropin-XJ融合蛋白对金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌活性。
- 夏丽洁刘忠渊许岗张富春
- 关键词：CECROPIN-XJ原核表达抑菌活性
- 新疆家蚕抗菌肽诱导人胃癌细胞AGS凋亡的研究被引量：4
- 2015年
- 目的探讨新疆家蚕抗菌肽（cecropinXJ）是否通过诱导人胃癌细胞AGS凋亡产生抗肿瘤的作用。方法选择0．01～1000mg·L^-1浓度范围内的cecropinXJ与人胃癌细胞AGS和人正常胃上皮细胞GES-1共培养24h，采用MTT法检测cecropinXJ对AGS细胞和GES-1细胞增殖的影响；透射电镜观察细胞超微结构变化；Hoechst染色观察细胞凋亡情况；流式细胞术检测细胞内活性氧和线粒体膜电位的变化；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Westernblot检测Bax、Bcl-2、caspase-3以及细胞色素CmRNA和蛋白水平的表达变化。结果CecropinXJ在体外能明显抑制胃癌AGS细胞的增殖（P〈0．05），并具有浓度依赖性，IC90值为61．19mg·L^-1，但对GES-1细胞无明显的抑制增殖作用。经cecropinXJ处理24h后，AGS细胞核固缩，呈现典型细胞凋亡特征，同时细胞内活性氧增加，线粒体膜电位下降。qRT-PCR和Westernblot结果表明，cecropinXJ能够引起Bcl-2表达下调，Bax表达上调，促进细胞色素C的释放并活化caspase-3。CecropinXJ促进caspase-3活性呈剂量依赖，经caspase-3和caspase-9特异性抑制剂处理后可降低cecropinXJ介导的AGS细胞死亡率。结论CecropinXJ可通过下调Bcl-2表达，上调Bax表达和活化caspase-3诱导AGS细胞凋亡，是其抗肿瘤机制之一。
- 吴艳玲夏丽洁张富春
- 关键词：胃癌AGS细胞BAXCASPASE-3
- 新疆家蚕抗菌肽对鲜榨果汁防腐效果的影响被引量：7
- 2014年
- 抗菌肽具有抑制细菌的功能,是天然防腐剂和潜在的抗生素替代品。将不同浓度的新疆家蚕抗菌肽(CecropinXJ)添加到鲜榨的番茄汁和葡萄汁中,分别从感官品质、菌液OD值及菌落计数等方面研究其对鲜榨果汁的抑菌效果。实验结果表明,相对于对照组,CecropinXJ能有效抑制鲜榨果汁中病原微生物生长,在一定程度上对鲜榨番茄汁和葡萄汁起到保护作用。0.02%(w/v)新疆家蚕抗菌肽CecropinXJ与相同浓度的山梨酸钾防腐效果无统计学差异,可显著延长鲜榨番茄汁和葡萄汁保鲜期,表明CecropinXJ在食品防腐产业应用中将具有潜在的商业价值。
- 康苏夏丽洁马纪张富春
- 关键词：新疆家蚕抗菌肽番茄汁葡萄汁防腐
- 单域抗体与抗感染免疫
- 2012年
- 随着分子生物学技术的发展及抗体研究的不断深入,单域抗体(single domain antibodie,sdAb)的研究已成为肿瘤靶向治疗研究领域的热点之一。作为实验研究和治疗应用的重要工具与制剂,单域抗体在调节免疫功能,中和毒素和抗微生物感染等方面具有广阔的应用前景。
- 夏丽洁张富春
- 关键词：单域抗体感染免疫
- 新疆家蚕抗菌肽对小鼠体征指标和脏器组织影响的研究被引量：5
- 2013年
- 抗菌肽具有杀灭细菌的功能,是天然防腐剂和潜在的抗生素替代品。本研究通过对新疆家蚕抗菌肽(CecropinXJ)灌胃小鼠后相关体征指标变化和脏器组织影响的分析,检测了重组新疆家蚕抗菌肽毒性。新疆家蚕抗菌肽经大量诱导表达和分离纯化后,对小鼠进行灌胃,分析小鼠体重及脏器(肝脏、胃、脾脏和胰脏)系数的变化,观察脏器组织损伤情况。结果表明,新疆家蚕抗菌肽对小鼠体重及脏器(胃、脾脏和胰脏)系数无显著影响(p>0.05),而对小鼠的肝脏系数有影响(p<0.05)。这些结果为新疆家蚕抗菌肽抗菌产品的安全应用提供了科学依据。
- 康苏夏丽洁马纪张富春
- 关键词：新疆家蚕抗菌肽小鼠脏器系数脏器损伤
- 电脉冲刺激法提高小鼠miR-122表达的研究
- 2014年
- 目的:电脉冲能够改变细胞膜的通透性,促进外源DNA进入细胞内。通过基因导入仪电脉冲刺激已注入质粒pcDNA3.0-miR-122的小鼠肌肉细胞,检测对小鼠miR-122表达的影响。方法:将扩增得到的pre-miR-122克隆到真核表达载体pcDNA3.0上,构建pcDNA3.0-miR-122表达质粒。利用基因导入仪分别将生理盐水、pcDNA3.0、pcDNA3.0-miR-122质粒DNA导入小鼠腿部肌肉,然后进行电脉冲刺激。qRT-PCR测定各组小鼠血清及肝脏中的miR-122水平,同时检测肝癌组织和经Cecropin XJ处理的肝癌组织中的miR-122水平。结果:基因导入仪电脉冲刺激已注入pcDNA3.0-miR-122的腿部肌肉组织后,小鼠血清和肝脏中miR-122的表达分别提高了23和11倍,经Cecropin XJ处理的小鼠肝癌组织中miR-122的表达比对照高1.6倍。结论:电脉冲刺激能够显著提高小鼠体内miR-122的表达,为探讨miR-122表达对肝癌生长影响的调控作用奠定基础。
- 吴艳玲夏丽洁张富春
- 关键词：小鼠电脉冲法
- 抗菌肽的研究概述及前景展望被引量：3
- 2013年
- 抗菌肽是生物体抵御外界病原体侵袭时产生的一类小分子活性多肽,是生物体内先天性防御系统的重要组成成分。这类活性多肽多数具有热稳定性、酸碱适应性及广谱抗细菌、真菌、病毒、寄生虫及肿瘤细胞等特点。该文综述抗菌肽的来源分类及生物活性,并对其应用前景进行展望。
- 夏丽洁张富春
- 关键词：抗菌肽生物活性
