国家自然科学基金(30770009) 作品数:10 被引量:80 H指数:5 相关作者: 孙晓东 吕国忠 毕思远 陈曦 赵志慧 更多>> 相关机构: 大连民族学院 辽宁师范大学 沈阳农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中央高校基本科研业务费专项资金 国家科技基础性工作专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 化学工程 更多>>
棒曲霉Asp-195v产蛋白酶条件的优化 2010年 [目的]优化高产蛋白酶棒曲霉Asp-195v的发酵条件。[方法]利用正交设计方法研究培养基成分配比、含水量、初始pH值、培养时间、接种量和培养温度等发酵条件对棒曲霉Asp-195v产蛋白酶的影响。[结果]影响该菌株产酶的最主要因素是培养时间,其次是温度,其他4个因素对该菌株产酶影响较小。该菌株最适产酶条件为:培养基成分中麸皮和豆粕比例为7∶3(总量为10g),含水量为90ml(250ml三角瓶),pH值为7,培养时间为72h,接种量为1.5ml,培养温度为24℃,摇床转数为120r/min。棒曲霉Asp-195v对盐有一定耐受力,其中24%NaCl中的蛋白酶与空白样品相比仍有47.6%的活性。[结论]该菌株在豆酱生产中具有良好的应用价值。 毕思远 陈嵘 孙晓东 陈曦 吕国忠 辛鑫 孙晓燕关键词:蛋白酶 正交设计 串珠镰孢菌种名的废弃及其与腾仓赤霉复合种的关系 被引量:36 2010年 通常所说的串珠镰孢菌Fusarium moniliforme Sheld.是镰孢菌属Fusarium Link中最重要的植物病原菌之一,可侵染多种作物引起严重病害,特别是在禾谷类作物上,如玉米穗腐病、小麦赤霉病、水稻恶苗病、高粱穗腐病等(White 1999;Parry et al.1995;Nyvall et al.1999;Frederiksen&Odvody 2000:Leslie et al.2005)。 吕国忠 赵志慧 孙晓东 姜子德 杨红关键词:复合种 禾谷类作物 玉米穗腐病 种名 水稻恶苗病 东北地区人参根际土壤真菌多样性的研究(英文) 被引量:8 2010年 [目的]了解人参根际土壤中的病原真菌种类及其分布规律。[方法]于2008和2009年的5~10月间,选取辽宁省的桓仁县、吉林省的集安市和抚松县3个地区人参产地的林下参、棚下参和农田参生长地作为主要的采样地,采用"之"字形采样法采集土壤样品200余份。采用土壤稀释平板法,将样品分别稀释至10-3、10-4、10-5倍;采用土壤平板法,称取0.005g的土壤样品,与孟加拉红培养基混合均匀。分离培养时,置于25℃恒温箱中培养5~7d;对菌种进行纯化时,将Fusari-um转移至SNA培养基上;将Penicillium和Aspergillus转至CA、CYA、MEA培养基上,置于恒温箱25℃光暗交替培养。将其他真菌转至PDA培养基上进行标准培养。对分离获得的真菌菌落进行纯化培养,在显微镜下观察真菌形态特征并进行种类鉴定。[结果]该研究共分离和鉴定出22属33种真菌,其中在桓仁地区分离出15种真菌,在集安地区分离出17种真菌,在抚松地区分离出13种真菌。人参生长的环境条件对人参根际土壤真菌种群的组成、数量及多样性分布均有一定的影响。三地人参根际土壤真菌的优势种群为青霉、木霉及镰孢菌。集安市人参根际土壤真菌的优势种群为青霉,桓仁县优势种群为木霉。从生态学研究结果来看,集安市多样性指数(2.2794)和丰富度指数(3.5054)均高于桓仁县和抚松县,表明其生态环境适于较多生物类群生长。但集安市人参根际土壤真菌的均匀度最低(0.8045),说明其分布并不十分均匀。抚松人参根际土壤真菌的均匀度最高(0.8707),说明该地区该种复合栽培方式人参根际土壤真菌种群趋向稳定。桓仁地区各项指标居中,说明林下栽培的人参气候冷凉湿润、四季分明,真菌的物种丰富度、个体数、多样性指数都趋于稳定,这也体现了地貌、土壤综合作用的结果。[结论]该研究为科学和有效地防治人参病害提供了理论依据。 陈曦 孙晓东 毕思远 吕国忠关键词:微生物 生态 东北地区人参根际土壤真菌多样性研究 被引量:13 2010年 [目的]了解人参根际土壤中的病原真菌种类及其分布规律。[方法]于2008和2009年的5~10月间在辽宁省的桓仁县、吉林省的集安市和抚松县的大型人参种植区采集人参根际土壤样品200余份,采用土壤稀释平板法和土壤颗粒法进行土壤真菌的分离和培养,然后进行分类鉴定。[结果]该研究共分离和鉴定出22属33种真菌。人参生长的环境条件对人参根际土壤真菌种群的组成、数量及多样性分布均有一定的影响。三地人参根际土壤真菌的优势种群为青霉、木霉及镰孢菌。集安市人参根际土壤真菌的优势种群为青霉,桓仁县优势种群为木霉。从生态学研究结果来看,集安市多样性指数(H′)和均匀度指数(J)均高于桓仁县和抚松县,表明生态环境的多样性对人参根际土壤真菌的生物多样性存在明显影响。[结论]该研究为科学和有效地防治人参病害提供了理论依据。 陈曦 孙晓东 毕思远 吕国忠关键词:微生物 生态 专一转化人参二醇类皂苷Rb_1为Rd的真菌菌株的筛选 被引量:13 2011年 于2009年的7-10月间在辽宁省的桓仁,吉林省的集安、靖宇、抚松等药材产区采集人参及人参根际土壤样品45份。通过真菌分离和培养,共获得真菌菌株105株,经形态学鉴定分属于15属48种。通过活性筛选,得到具有转化人参总皂苷活性的菌株25株,其中菌株SR87和SR105对人参皂苷Rb1具有专一转化活性。通过TLC和HPLC检测,其转化产物为人参皂苷Rd。经形态学鉴定,确定阳性菌株SR87为莫勒接霉Zygorhynchus moelleri,SR105为灰绿犁头霉Absidia glauca。这两株真菌均有较高的转化潜力,可以应用于制备人参皂苷Rd。 张薇 孙晓东 张萍 吕国忠关键词:生物转化 人参皂苷RB1 人参皂苷RD 人参皂苷糖苷水解酶高产菌株CGMCC No.4316发酵工艺 被引量:2 2014年 灰绿犁头霉Absidia glauca CGMCC No.4316具有将人参二醇类皂苷Rb1专一转化成Rd的活性。该文采用TLC法,在单因子试验基础上,应用响应面分析,以人参皂苷糖苷酶活力为响应值,建立回归模型,对培养基等各影响因子进行优化。试验结果表明:以麦麸皮20.47 g/L为碳源,蛋白胨9.74 g/L为氮源,初始pH 6.0,瓶装量45 mL/250 mL,摇瓶转数180 r/min,投料量10%,30℃发酵72 h,其酶活力达到92.78 U/mL。 孙晓雨 吕国忠 谢明杰 赵志慧 孙晓东 苏丹关键词:人参皂苷糖苷酶 发酵优化 响应面 人参锈腐病菌双胞柱孢的鉴定及其生物转化功能研究 被引量:2 2012年 从采自辽宁省桓仁县患有锈腐病的人参组织中分离得到多株柱孢属真菌。通过柯赫氏法则证明柱孢属真菌对人参具有致病性,可引起典型人参锈腐病。经形态学鉴定,确定致病真菌SR79、SR86、SR88、SR90、SR91、SR94、SR95、SR96为双胞柱孢Cylindrocarpon didymium。进一步研究这些菌株对人参皂苷的生物转化作用,通过TLC和HPLC检测,证明菌株SR79具有较强的转化活性,能够将人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd转化成稀有人参皂苷Rh2。结果表明,人参锈腐病菌SR79菌株具有人参皂苷生物转化开发潜力。 吕国忠 张薇 孙晓东关键词:锈腐病 致病真菌 生物转化 从药用植物根际土壤中分离出的2个中国新记录种(英文) 被引量:1 2012年 在进行黑龙江省药用植物根际土壤真菌多样性的研究中,分离获得了2个中国新记录种:蕨枝顶孢[Acremonium pteridii(J.C.Frankland)W.Gains]和穴形节皮菌的金孢属无性型[Chrysosporium anamowh of Arthroderma cuniculi(Dawson)C.A.N.van Oorschot]。蕨枝顶孢的主要形态特征为分生孢子梗单生或二次及三次分支,具有1~3个隔膜,顶端着生单个分生孢子;分生孢子以假头状着生,卵形或者近圆形,内含1个油球。穴形节皮菌的金孢属无性型主要形态特征为短的侧分支与可育菌丝呈直角伸出,分生孢子具柄,生于短的突起上或者直立的侧分支上;分生孢子卵形或棍棒形,顶端钝圆,基部平截,大多数单胞,极少数为由2~3个细胞组成。文中对它们进行了详细的形态特征描述,标本保存于大连民族学院菌种保藏中心。 慕东艳 吕国忠 孙晓东 王娜 赵志慧关键词:培养物 土壤真菌 辽宁地区药用植物根际土壤真菌多样性的研究 被引量:6 2010年 作者于2007和2008年的5-10月间在辽宁省的丹东、凤城、清原、桓仁等药材产区采集土壤样品200余份,通过采用稀释平板法和土壤颗粒平板法进行土壤真菌的分离和培养,共分离和鉴定出27属54种真菌,其中接合菌2属3种、子囊菌1属1种、无性型真菌24属50种。分离到的部分真菌种类是重要的药用植物病原菌,如Cylindrocarpon destructans、Fusarium oxysporum和F.solani。研究发现,Penicillium paxilli、P.expansum、Trichoderma atroviride及T.viride的分离频率最高,是辽宁省4个调查地区药用植物根际土壤真菌的优势菌群。 陈曦 孙晓东 毕思远 张薇 杨红 吕国忠 辛鑫 孙晓燕关键词:人参 种群 棒曲霉Asp-195v产蛋白酶的酶学性质研究 2010年 对液体发酵的棒曲霉Asp-195v菌株所产蛋白酶的活力进行了研究,并通过分离纯化获得了电泳纯的酶蛋白。研究结果表明,该蛋白酶的最适反应温度为40℃,在30-50℃温度范围内相对活力可保持在70%以上;最适pH为7,pH稳定范围在4-8;Mn2+对该蛋白酶活力有明显的激活作用,K+、Ag+、Cu2+、Fe2+、Mg2+、Zn2+、Ca2+、Al3+和Fe3+离子则有明显的抑制作用,尤其是Hg2+和Pb2+对酶活的抑制作用更加强烈;其他试剂如葡萄糖、EDTA对酶活的抑制作用不明显,而蔗糖、SDS和Tween-20对酶活的抑制明显;以酪氨酸为底物采用双倒数作图法测得Vmax为30.40mmol/min,Km为97.53mmol/L。该酶的表观分子量为30.1kDa。 毕思远 孙晓东 陈曦 陈嵘 吕国忠关键词:丝状真菌 蛋白酶 稳定性 酶活