北京市自然科学基金(7034050)
- 作品数：7 被引量：13H指数：2
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- 相关机构：解放军第302医院解放军医学图书馆军事医学科学院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
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- 抗SARS冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备和初步应用被引量：6
- 2005年
- 目的:研制抗SARSCoVN蛋白的单克隆抗体(mAb)。方法:以纯化的GSTN免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗SARSCoVN蛋白mAb;用免疫双扩散鉴定Ig亚类;Westernblot和免疫组化鉴定mAb的特异性;间接ELISA检测mAb的腹水效价、相对亲和常数。结果:获得1株可分泌特异性mAb的抗SARSCoVN蛋白的杂交瘤细胞系3E10H,Ig亚类为IgG2b;其腹水效价为8×10-5;其相对亲和力1.725×10-10mol/L,Westernblot和免疫组化阳性。结论:获得特异性抗SARSCoVN蛋白的mAb,为进一步用于临床诊断和实验研究创造了条件。
- 孙杰文翠容戚扬李靖汪莉亚周继文程云
- 关键词：N蛋白单克隆抗体
- 抗SARS冠状病毒N蛋白多克隆抗体的制备和鉴定
- 2006年
- 目的制备抗SARS冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白的多克隆抗体。方法以纯化的GST-N免疫新西兰白兔,制备抗SARS-CoVN蛋白多抗,间接ELISA法检测兔血清效价,Westernblot和免疫组化鉴定多抗的特异性。结果制备的抗SARS-CoVN蛋白多克隆抗体经ELISA检测效价为1·2×10-5,Westernblot和免疫组化证实此抗体可与SARS-CoVN蛋白特异性结合。结论成功地制备了抗SARS-CoVN蛋白多抗,为进一步的临床诊断和实验研究创造了条件。
- 戚扬文翠容迟淑萍孙杰朱雷周继文程云
- 关键词：SARS病毒N蛋白
- PGEFP-C1/N载体的构建及其在转染细胞中的初步定位
- 2005年
- 目的观察SARS冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白的亚细胞定位。方法将SARS-CoV N基因片段克隆入融合绿色荧光蛋白载体(PGEFP-C1)中。采用瞬时转染技术,在A549、VeroE6细胞株中利用荧光显微镜观察GPT-N蛋白的亚细胞定位,Westernblot鉴定N蛋白的表达。结果成功构建了PGEFP-C1/N表达载体,在A549、VeroE6细胞中观察到N蛋白定位于细胞胞浆中,Western blot证实了N蛋白表达。结论SARS-CoV N蛋白在真核细胞中定位于细胞胞质中。
- 戚扬孙杰文翠容李靖舒翠莉程云
- 关键词：SARS病毒N蛋白亚细胞定位
- 用抗SARS冠状病毒N蛋白单克隆抗体定位研究受染器官被引量：1
- 2009年
- 目的利用单克隆抗体研究人体内严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS-CoV)感染的靶细胞。方法利用抗SARS-CoV N蛋白单克隆抗体,采用免疫组织化学检测的方法,对一例SARS死亡病例进行组织定位研究。结果在该病例多器官的组织中检测到SARS-CoV。结论SARS-CoV在体内多种组织中存在得到证实,SARS是以肺脏为主要靶器官的多脏器受染的疾病,这为SARS临床诊断和实验研究提供了依据。
- 戚扬郝俊勤迟淑萍孙艳玲赵景民程云
- 关键词：N蛋白单克隆抗体
- SARS患者血清中SARS相关冠状病毒抗体产生规律的初步分析被引量：5
- 2003年
- 目的 :了解严重急性呼吸综合征 (SARS)患者血清中 SARS病毒特异性 Ig M、Ig G抗体产生的规律。方法 :随机选取32例 SARS患者 5 5份血清标本 ,应用 EL ISA分别检测抗 SARS病毒 Ig M、Ig G抗体。结果 :Ig M抗体阳性率为 5 6 .4 % ,平均出现时间为 (5 .88± 2 .6 2 ) d,其中 2例患者在发病后第 2天即出现阳性 ,平均消失时间为 (14 .2 5± 2 .97) d;Ig G抗体阳性率为4 1.9% ,平均出现时间为 (11.4 0± 4 .2 0 ) d,其中 2例患者在发病后第 3天即为阳性 ;Ig M和 Ig G抗体的总体阳性漏检率为6 .2 5 %。结论 :SARS患者于发病后 3～ 7d血清中出现特异的 Ig M抗体 ,可用于实验室诊断 ;同时进行 Ig M和 Ig G抗体的检测可用于发病 8～ 14
- 李靖陈昊李伯安柯屾赵军郑宇何卫平舒翠莉高蓉程云
- 关键词：严重急性呼吸综合征SARS冠状病毒抗体IGMIGG
- 一株变异SARS冠状病毒N蛋白的原核表达及活性测定被引量：1
- 2004年
- 目的 :克隆编码严重急性呼吸综合征冠状病毒 (SARS CoV)N蛋白的DNA ,构建原核表达质粒pGEX 2T/N ,并诱导表达。方法 :采用RT PCR方法从病毒培养液中获得N基因片段 ,并克隆入T EASY载体中。经PCR、双酶切鉴定后 ,测序。将N蛋白基因序列定向插入原核表达载体pGEX 2T中 ,表达融合蛋白。用表达产物与抗SARS CoV抗体阳性血清做Westernblot。结果 :N蛋白DNA测序的结果与GenBank比对缺失 2 0个bp。GST N融合蛋白以可溶形式表达。Westernblot检测表明 ,其与抗SARS CoV抗体阳性血清的反应呈阳性。结论 :成功地构建原核表达质粒pGEX 2T/N ,并表达GST N融合蛋白 ,为下一步的研究奠定了基础。
- 戚扬郑宇舒翠莉姜丽胡燕貌盼勇程云
- 关键词：严重急性呼吸综合征N蛋白
- SARS冠状病毒N蛋白的原核表达及活性测定被引量：1
- 2005年
- 目的克隆编码严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARSCoV)N蛋白的DNA,构建原核表达质粒pGEX2T/N,并诱导表达。方法采用RTPCR方法从病毒培养液中获得N基因片段。将N蛋白基因序列定向插入原核表达载体pGEX2T中,在大肠杆菌中表达融合蛋白。用表达产物与抗SARSCoV抗体阳性血清做Westernblot。结果获得N基因片段;GSTN融合蛋白以可溶形式表达;Westernblot检测表明,其与抗SARSCoV抗体阳性血清的反应呈阳性。结论成功地构建原核表达质粒pGEX2T/N,并表达GSTN融合蛋白,为下一步的研究奠定了基础。
- 文翠容胡谨华迟淑萍戚扬貌盼勇程云
- 关键词：严重急性呼吸综合征N蛋白基因表达调控病毒
