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基因芯片筛选BPDE转化16HBE相关基因的研究: 目的采用基因芯片技术筛选二羟环氧苯并芘(BPDE)转化人支气管上皮细胞(16HBE)的相关基因,探讨该技术在分子毒理学研究中的应用价值。方法将实验组(BPDE-16HBE)和对照组(16HBE)的mRNA逆转录合成cDN...; 宾晓农谭敏吕嘉春蒋义国陈家堃; 关键词：基因芯片二羟环氧苯并芘人支气管上皮细胞; 文献传递

BPDE和NiS转化的16HBE恶性细胞系的建立及其生物学特性研究: 目的:探讨用BPDE和NiS转化的16HBE恶性细胞系BPDE-16HBE和NiS-16HBE的致癌性和转移潜能,并鉴定其生物学差异。方法:应用单个细胞克隆技术分离建立BPDE、NiS转化的16HBE恶性细胞株BPDE-...; 宾晓农谭敏吕嘉春纪卫东陈永忠蒋义国陈家堃; 关键词：苯并(A)芘恶性转化致癌性; 文献传递

反式二羟环氧苯并芘诱导人支气管上皮细胞翻译延长因子1α1基因的表达被引量：1: 2005年; 目的探讨反式二羟环氧苯并芘(反式-BPDE)诱导转化(16HBE-T)与成瘤(16HBE-C)人支气管上皮细胞(16HBE)翻译延长因子1α1基因的表达变化。方法联合应用抑制性消减杂交、生物信息学分析以及半定量RT-PCR等方法,分别以16HBE-T和16HBE-C细胞cDNA为检测子,以正常16HBE细胞(16HBE-N)cDNA为驱动子,构建消减杂交文库,经2次杂交和2次PCR后,插入TA克隆载体克隆,经筛选、测序、序列分析后,设计特异引物,以β-肌动蛋白(β-actin)为内参照,进行半定量PCR。结果有9条差异表达片段与Genbank的翻译延长因子1α1的不同片段相同,半定量PCR表明,翻译延长因子1α1在16HBE-T和16HBE-C细胞中的表达水平分别为16HBE-N细胞的1.148倍和1.253倍,表明表达水平上调。结论翻译延长因子1α1可能与反式-BPDE的转化及成瘤有部分关系。; 安社娟陈家堃陈学敏赵艳丰刘莉莉; 关键词：苯并(A)芘抑制性消减杂交生物信息学

BPDE与NiS转化的16HBE恶性细胞系的建立及其生物学特性研究: 目的:探讨用BPDE和NiS转化的16HBE恶性细胞系BPDE-16HBE和NiS-16HBE的致癌性和转移潜能,并鉴定其生物学差异。方法:应用单个细胞克隆技术分离建立BPDE、NiS转化的16HBE恶性细胞株BPDE-...; 宾晓农谭敏吕嘉春纪卫东陈家堃蒋义国; 关键词：苯并(A)芘恶性转化致癌性; 文献传递

多环芳烃致癌的分子毒理学研究进展被引量：64: 2005年; 多环芳烃是环境中广泛存在的污染物 ,其中毒机制尚不十分清楚。本文从其与细胞色素P4 5 0的关系、多环芳烃受体的作用及其对癌基因与抑癌基因的影响等方面进行综述。; 安社娟陈家堃陈学敏; 关键词：多环芳烃细胞色素P450 癌基因抑癌基因

抑制性消减杂交技术检测反式二羟环氧苯并芘转化细胞与正常细胞基因表达差异被引量：3: 2004年; 目的　筛选 7,8 二羟 9,10 环氧苯并芘 (BPDE)转化细胞与正常细胞的基因表达差异。方法　以BPDE转化支气管上皮细胞 (16HBE)细胞为检测子 (tester) ,正常 16HBE细胞为驱动子 (driver) ,应用抑制性消减杂交方法构建cDNA消减文库 ,经 2次消减杂交和 2次PCR后 ,将巢式PCR产物插入TA载体克隆 ,随机挑选克隆进行鉴定和测序 ,并用斑点杂交法验证其同源性 ,将所得序列进行GenBank的BLAST分析。结果　发现了 7个在BPDE转化细胞中高表达的基因 ,为翻译延长因子 1α1、线粒体基因、溶解物载体家族 2 5、EphA2、酪氨酸 3 加单氧酶色氨酸 - 5 -加单氧酶活化蛋白、乳酸脱氢酶A、TRIM2 8等 ,尚有一条在GenBank的已知基因中找不到对应序列 ,在EST序列中找到全长对应序列。结论　发现的高表达基因可能在BPDE的致癌机制中起作用 ,另外 ,可能有未知基因与BPDE的恶性转化作用有关。; 安社娟陈家堃陈学敏赵艳丰刘莉莉; 关键词：基因抑制性消减杂交

反式二羟环氧苯并(a)芘相关新基因brg的全长克隆: 2006年; 背景与目的:在前期研究中发现,16HBE-C细胞表达变化的基因中有未知基因参与,因其与BPDE有关,所以命名为brg(anti-BPDErelatedgene)基因。本研究应用cDNA末端快速扩增法(rapidamplificationofcDNAends,RACE)扩增此未知基因的全长,以进行下一步的基因功能研究。材料与方法:应用cDNA末端快速扩增法(RACE技术),对3'和5'端分别设计了梯度PCR,巢式PCR等优化程序,以获得特异的产物,然后对特异产物直接测序,将测序结果进行生物信息学分析,基因拼接等获得新基因brg全长。结果:3'和5'端均成功获得特异性产物,3'RACE测序为394bp,有明显的PolyA加尾信号,有编码区的终止密码子;5'RACE测序为1017bp,有起始密码子ATG,其中197bp为3'和5'全长共有序列。将3'和5'序列拼接,结果全长1214bp,生物信息学分析brg基因阅读框1032bp,编码344个氨基酸。结论:所得结果与设计一致,说明所采用的技术路线是简便可行的,brg基因可能在反式二羟环氧苯并(a)芘的致癌机制中起重要作用。; 安社娟陈家陈华洁常薇刘莉莉赵艳丰陈学敏; 关键词：CDNA末端快速扩增基因

二羟环氧苯并芘诱导转化与翻译延长因子的关系被引量：3: 2006年; 目的探讨真核翻译延长因子1α1(eTEF1α1)基因在反式二羟环氧苯并芘致癌机制中所起的作用。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增真核翻译延长因子1α1基因全长,插入pcDNATM3.1 D irectional TOPO表达载体,以脂质体转染介导的技术和G418细胞筛选法转染人支气管上皮细胞,构建转基因稳定表达的细胞株。用半定量RT-PCR方法分析转基因表达产物,对转基因细胞株,进行双层软琼脂试验以确定基因的恶性特性。结果成功扩增出eTEF1α1基因全长,构建出稳定表达真核翻译延长因子1α1基因的细胞株。稳定转染eTEF1α1基因的细胞株,能在双层软琼脂中形成克隆。结论真核翻译延长因子1α1基因与反式二羟环氧苯并芘的恶性转化有关。; 安社娟陈家堃常薇陈华洁刘莉莉赵艳丰陈学敏

叶绿酸抑制细胞恶性转化的蛋白表达差异分析: 目的:采用蛋白质组学技术分析叶绿酸抑制细胞恶性转化的蛋白差异表达,探讨叶绿酸抗细胞转化的分子机制。方法:一步法分别提取二羟环氧苯并芘(BPDE)诱导的转化细胞B-1和叶绿酸与BPDE共处理的抗转化细胞CB-1总蛋白,应用...; 纪卫东陈家堃蒋义国吕嘉春吴中亮冯苏妹; 关键词：叶绿酸蛋白质组; 文献传递

层粘连蛋白受体基因表达谱分析被引量：3: 2006年; 目的探讨层粘连蛋白受体(67LR1)基因相关的一组基因表达变化,为反式二羟环氧苯并芘致癌机制的研究提供依据。方法构建67LR1转基因表达载体,转染人支气管上皮细胞(16HBE),获得转基因67LR1的瞬时表达的细胞株。用半定量RT-PCR方法分析转基因表达产物,应用含8 064个基因点的微芯公司基因表达谱芯片CSC-GE-80与双荧光标记样品与芯片杂交和扫描、图像数据分析等一系列处理进行表达谱分析。结果成功构建出瞬时表达67LR1的细胞株。基因表达谱分析,2组相比发生了显著性表达变化的基因有295个,其中表现为上调的基因有145个,下调表达的基因有150个。在发生了显著性表达改变的基因中,比较有明显功能分类特征的包括与信号转导相关的基因,与肿瘤相关的基因,与免疫反应相关的基因以及与蛋白质合成系统相关的基因等。结论67LR1基因功能涉及到信号转导、肿瘤相关基因等方面,相关基因的表达变化具有复杂性。; 安社娟陈家堃常薇陈华洁刘莉莉赵艳丰陈学敏; 关键词：基因芯片层粘连蛋白受体

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